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骨髓间充质干细胞复合PLGA支架修复组织损伤的实验研究

刘伟鹏  
【摘要】:目的分离培养骨髓间充质干细胞(MSCs),制备PLGA 多孔泡沫三维细胞支架,观察MSCs 接种在PLGA 多孔泡沫支架上的生长情况,探讨MSCs-PLGA 复合物的构建及对损伤组织的修复作用。 方法1、体外分离培养兔骨髓间充质干细胞:采用贴壁筛选法、DMEM 培养液分离培养原代新西兰幼兔MSCs 并进行传代培养,倒置显微镜下观察细胞形态及生长增殖状况。 2、制备PLGA 细胞支架:选用适宜分子量及成份比率的PLGA,采用溶剂浇铸/粒子沥滤法制备三维多孔泡沫支架,控制合适的厚度、孔径及孔隙率。 3、观察MSCs 细胞在支架上的生长情况: DAPI 标记MSCs,沉淀法接种于细胞支架上,扫描电镜和免疫荧光显微镜观察不同时间段MSCs 在支架上的生长情况。 4、观察MSCs-PLGA 复合物对损伤组织的修复:切除新西兰大白兔背部一定大小的全层皮肤,移植MSCs-PLGA 复合物于创面,并以单纯移植PLGA 多孔泡沫支架为对照,观察两者对创面修复的效果。 5、HE 染色、VG 染色及细胞角蛋白AE1/AE3 免疫组化检测观察MSCs 分化情况及试验组、对照组与正常组织的结构异同。 结果1、MSCs 原代及传代培养:培养3 日后,可见散在分布的长梭形成纤维细


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