收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

脉冲电磁场对成骨细胞增殖、分化功能和Osterix基因表达的影响

张娜  
【摘要】:目的 观察特定频率和强度的脉冲电磁场(Pulsed Electromagnetic Field, PEMF)对新生SD大鼠颅骨来源成骨细胞增殖、分化功能和成骨细胞特异性转录因子Osterix (OSX)基因(mRNA)表达的影响,探讨PEMF对成骨细胞的直接作用,以期为临床应用PEMF治疗骨质疏松症及相关骨代谢性疾病提供理论基础。 方法 1.成骨细胞分离、培养与鉴定: 成骨细胞分离与培养: 取24h内新生SD大鼠,雌雄不限。拉颈处死后,无菌条件下分离大鼠颅盖骨,分别用胰酶-胶原酶消化法和组织块反复贴壁法获取成骨细胞,于37℃、5%C02、饱和湿度培养箱内进行培养。反复贴壁法进行人工传代纯化。本实验所用成骨细胞均为第4代。 成骨细胞鉴定: (1)倒置相差显微镜下观察细胞形态特征、生长状况,并定时进行拍照。 (2)碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP)染色法鉴定成骨细胞。 2.观察PEMF对成骨细胞增殖功能、分化功能和OSX mRNA表达的影响: 取培养至第4代的成骨细胞,胰酶消化后制成细胞悬液,调整细胞浓度,分别以4×104/ml的密度接种到96孔板、以4×104/ml的密度接种到24孔板和以1×105/ml的密度接种到25cm2细胞培养瓶中,培养24h待细胞贴壁后,换入无血清培养液继续培养24h使细胞同步化,再换入新的正常培养基。将细胞分为对照组和脉冲电磁场组(PEMF组),对照组继续正常培养,PEMF组采用频率12 Hz、强度11 mT的PEMF进行干预,60min/(d次),共3d。干预结束后第2d进行如下指标检测: (1)噻唑蓝(MTT)法检测成骨细胞增殖情况; (2)磷酸苯二钠比色法检测成骨细胞裂解液及细胞培养上清液中ALP活力的高低,观察PEMF对成骨细胞分化能力的影响; (3)荧光定量RT-PCR方法检测成骨细胞OSX mRNA表达水平。 结果 1.成骨细胞的分离、培养与鉴定: 采用胰酶-胶原酶消化法和组织块反复贴壁法所得成骨细胞的细胞形态特征和生长状况均符合成骨细胞的特点。经ALP染色后鉴定为成骨细胞。两种方法所得细胞进行纯化后均可得到纯度较高的成骨细胞,用于实验研究。 2. PEMF对成骨细胞增殖功能、分化功能和OSX mRNA表达的影响: MTT结果显示,与对照组(0.239±0.116)相比,PEMF组细胞增殖(0.448±0.074)明显增加,且差异具有显著的统计学意义(P0.01); ALP活力检测结果表明,与对照组(2.552±0.493,0.745±0.372)相比,PEMF组成骨细胞裂解液(0.853±0.276)和细胞培养上清液中(0.620±0.175)ALP的活力值均明显降低,而细胞裂解液的ALP活力降低更明显(分别为P0.01,P0.05);OSX基因表达结果显示,与对照组(1.000±0.072)相比,PEMF组(0.357±0.007)OSX mRNA表达明显下调(P0.01)。 结论 频率12 Hz、强度11 mT,60min/(d次),共3d的PEMF干预促进增殖早期成骨细胞增殖功能,抑制成骨细胞分化功能,并下调OSX的基因表达水平。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 魏学磊;张志伟;马宝通;陆芸;董福慧;;核心结合因子α1对成骨及促进骨折愈合作用研究进展[J];生物医学工程与临床;2011年04期
2 张舒;曹新生;王冰;;成骨细胞和骨细胞的力学信号转导(英文)[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年24期
3 贺佩兰;莫静;黄晓青;王劲;梁军;吕槐青;;ROCK信号通路在流体剪切力诱导的成骨细胞的细胞骨架改建中的作用研究[J];实用医学杂志;2011年16期
4 陈莉;Rachel J Waddington;Alastair J Sloan;;脂多糖刺激小鼠成骨细胞表达白细胞介素-23的实验研究[J];北京口腔医学;2011年03期
5 李景辉;张方明;张振庭;;人恒牙牙髓干细胞体外定向诱导分化为成骨细胞的研究[J];北京口腔医学;2011年03期
6 张国强;王岩;田杰谟;温宁;董利民;王晨;柴伟;;三维连通多孔钛表面成骨能力的实验研究[J];中国骨伤;2011年06期
7 谭诗平;张宁;胡志毅;殷国勇;;GIT1发夹结构对成骨细胞内局部黏附激酶的磷酸化和分布的影响[J];江苏医药;2011年15期
8 向燕;王远亮;罗彦凤;张兵兵;辛娟;郑丹芳;;马来酸酐改性聚乳酸对成骨细胞黏附、增殖和分化的研究[J];生物医学工程学杂志;2011年04期
9 陆斌;李广琪;李建武;谢延;丁宏;杨艳;;近β钛合金对人成骨细胞骨保护素/核因子-κB受体活化因子配体mRNA表达影响的研究[J];中国矫形外科杂志;2011年11期
10 杨峰;汤欣;;低氧诱导因子-1α诱导鼠胚成骨细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的实验研究[J];中国伤残医学;2011年08期
11 徐培;陆钰;吴海珍;赵玫;汪学华;王鑫;储岚岚;;纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架材料复合大鼠成骨细胞培养的实验研究[J];安徽医药;2011年07期
12 芮泽;张宁;胡志毅;殷国勇;;持续性压力促进成骨细胞分泌VEGF的机制[J];南京医科大学学报(自然科学版);2011年07期
13 李偏;冯进益;蔡志刚;谢容泉;王德荫;郑立斌;芮钢;;温敏性壳聚糖水凝胶对大鼠成骨细胞的毒性[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年25期
14 塔娜;谭明生;移平;蒋欣;杨峰;唐向盛;;异补骨脂素对小鼠胚胎前成骨细胞胶原的影响[J];中国中医药信息杂志;2011年04期
15 顾建红;蒋杉杉;刘俊栋;熊桂林;闫汶;刘宗平;;1α,25-(OH)_2D_3对体外培养成骨细胞内钙离子浓度的影响[J];营养学报;2011年03期
16 赵亚红;柯樱;王敏伟;;纳米铜粉对去卵巢大鼠骨量丢失的预防作用及其机制探讨[J];世界临床药物;2011年07期
17 霍波;康英永;胡漫;李平;;成骨细胞力致钙响应和钙传递的研究进展[J];医用生物力学;2011年04期
18 翟远坤;李志忠;陈克明;张娜;程国政;朱瑞清;;淫羊藿苷对体外培养乳鼠颅骨成骨细胞增殖、分化及成熟的影响[J];中药材;2011年06期
19 王惠娟;董进;;转化生长因子β对成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfal基因表达的影响[J];中国当代医药;2011年22期
20 张本贵;吴江;郭应强;陈槐卿;;钛颗粒负荷下成骨细胞对破骨细胞功能的调节作用[J];生物医学工程学杂志;2011年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 祝振华;;缺锌对生长期大鼠长骨成骨细胞维生素D受体及钙结合蛋白基因表达的影响[A];中华医学会第八次全国小儿外科学术会论文集[C];2010年
2 邹海滨;苏宜香;;大豆异黄酮类对体外培养大鼠成骨细胞的影响[A];中国营养学会第五届妇幼营养学术会议论文摘要汇编[C];2002年
3 杨茗;傅风华;张树平;;菝葜皂苷元对成骨细胞活性的影响[A];2008年全国抗衰老与老年痴呆学术会议论文集[C];2008年
4 全仁夫;杨迪生;苗旭东;李伟;吴晓春;汪宏斌;;二氧化锆梯度复合羟基磷灰石生物材料对大鼠成骨细胞体外活性的影响[A];2008年浙江省骨科学学术年会论文汇编[C];2008年
5 刘琴丽;孙树津;霍波;龙勉;;成骨细胞铺展形状和面积对其凋亡的影响[A];第九届全国生物力学学术会议论文汇编[C];2009年
6 顾琪;张学军;贺恒益;朱汉民;;体外培养大鼠颅骨成骨细胞生物学特性的初步研究[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
7 胡金家;王曼莹;;含药血清的制备及其对成骨细胞代谢的影响[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
8 任高宏;林昂如;裴国献;胡罢生;;高分子量聚乙烯对成骨细胞活性及新骨形成的影响[A];中国康复医学会修复重建外科专业委员会第十四次全国学术交流会论文集[C];2004年
9 张保卫;李静;张富强;商庆新;曹谊林;;体外培养人骨髓基质干细胞诱导为成骨细胞的超微结构变化[A];2004年上海市口腔医学学术年会论文汇编[C];2004年
10 赵淑贤;;外周血干细胞与组织工程骨移植修复犬牙周骨缺损区转化生长因子-B的表达[A];中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会换届选举暨第四届全国老年口腔医学学术研讨会论文汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 吕红兵;颅神经嵴细胞的培养特性及向神经细胞、成骨细胞的定向诱导分化[D];第四军医大学;2002年
2 谭晓红;成骨细胞特异性Smad4基因剔除导致小鼠早期发生骨质疏松[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
3 曹强;以藻酸钙为载体的可注射性组织工程骨研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
4 李良;力学刺激对绝经后骨质疏松大鼠成骨细胞作用的细胞分子基础[D];四川大学;2004年
5 罗晓中;组织工程骨低温保存的实验研究[D];四川大学;2005年
6 丁仲鹃;种植体表面微形态对骨形成影响的研究[D];四川大学;2004年
7 刘颖;应力刺激下成骨细胞c-fos基因表达及影响因素的实验研究[D];四川大学;2004年
8 仇丽鸿;静磁场对大鼠成骨细胞及其牙周炎组织影响的研究[D];中国医科大学;2004年
9 钟近洁;氟对成骨细胞增殖及其MCM3基因表达的影响[D];新疆医科大学;2006年
10 曾强成;谷氨酸受体在成骨细胞力学信号转导中作用的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李丽荣;脉冲电磁场治疗骨质疏松症的初步研究[D];第四军医大学;2005年
2 黄晶晶;脉冲电磁场对成骨细胞作用的研究[D];北京协和医学院;2012年
3 赵吉;脉冲电磁场对破骨细胞和成骨细胞分化和功能的影响[D];北京协和医学院;2011年
4 张娜;脉冲电磁场对成骨细胞增殖、分化功能和Osterix基因表达的影响[D];山东大学;2011年
5 毛玮;脉冲电磁场促进兔锁骨骨折愈合的实验研究[D];湖北中医药大学;2010年
6 金钫;MMPs在大鼠牙周组织改建以及体外培养成骨细胞中的表达[D];第四军医大学;2001年
7 郦光丰;骨组织力电效应及成骨细胞离体培养的数值分析[D];重庆大学;2002年
8 任高宏;成人骨髓基质干细胞体外培养及体内成骨的实验研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
9 周红星;兔活骨组织体外促同种成骨细胞与支架粘附的实验研究[D];第三军医大学;2003年
10 邬霞;成骨细胞玻璃化冷冻保护剂的研究[D];大连理工大学;2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 钱铮;日本利用人类胎盘培育出成骨细胞[N];中国劳动保障报;2006年
2 钱铮;日本利用人类胎盘培育出成骨细胞[N];医药经济报;2006年
3 杨丽佳通讯员 周宁人;骨折不愈合缘于成骨细胞“爬不动”[N];健康报;2008年
4 杨丽佳周宁人;骨折不愈合 缘于成骨细胞“爬不动”[N];大众卫生报;2008年
5 杨建辉;雌三醇对成骨细胞保护作用的研究[N];中国中医药报;2004年
6 香港麦迪信医学出版有限公司供稿;多因素影响骨代谢平衡[N];医药经济报;2003年
7 王婷 张金超 杨梦甦 肖培根;颇具潜力的抗骨质疏松症中药[N];中国医药报;2006年
8 指导专家 江苏省人民医院骨科特聘教授 殷国勇 重庆市中医骨科医院 向杰 副主任医师;小腿骨折10%“长不好”[N];医药导报;2008年
9 本报特约记者 吴远团;“林黛玉”要及早防驼背[N];健康时报;2005年
10 ;老人易患骨质疏松是何因[N];医药养生保健报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978