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白介素-17在颈动脉粥样硬化性狭窄动物模型中的表达

来超  
【摘要】:脑血管病已成为危害健康的主要疾病之一,约20%-30%缺血性脑血管病与颈动脉粥样硬化性狭窄有关。为了对颈动脉粥样硬化进行研究,必须有可靠的动物模型。研究证实猪的动脉粥样硬化发生发展,与人极其相似,小型猪又具有饲养方便、体积小、易管理的特点,故本实验应用中国小型猪作为动物模型载体,采用颈动脉球囊扩张+高脂饲养方法,制作颈动脉粥样硬化狭窄动物模型。并通过多普勒超声、血管病理观察颈动脉粥样硬化的各项指标,如动脉狭窄程度、粥样斑块的性质、病理特征、血流动力学等指标,验证该模型基本符合人体动脉粥样硬化病理过程及特点。 白介素-17(Interleukin-17, IL-17)是新近发现的一种促炎症性细胞因子,是一种155个氨基酸的糖蛋白。IL-17来源于活化的记忆性CD4+T淋巴细胞,并与特异性受体相结合,从而促进炎症反应、调节免疫应答、造血等多种功能。IL-17与数种慢性炎性和自身免疫性疾病密切相关,但是,IL-17在动脉粥样硬化各个阶段所起作用刚开始进行研究。IL-17在动脉粥样硬化损害发展过程中起的作用是非常重要并有一定争议。一些研究发现IL-17对防止动脉粥样硬化有保护作用,另一些近期研究发现IL-17可导致动脉粥样硬化。因此,IL-17的功能存在争议,有待更多的研究进一步诠释。 第一部分颈动脉粥样硬化狭窄模型的建立 目的建立小型猪颈动脉粥样硬化狭窄动物模型 方法应用小型猪7头,进行普通饲料喂养1周后,对照组1头继续普通饲料喂养;实验组6头小型猪在氯胺酮麻醉下,对其右侧颈动脉进行球囊扩张,术后给予高脂饲料喂养,分别在损伤后2周、4周、8周、12周,经前腔静脉抽血化验:血甘油三酯、胆固醇含量,并通过多普勒超声观察损伤处血管的血管狭窄程度、粥样斑块大小、性质、血流速度、内膜增厚程度,并与术前进行比较。12周后处死小型猪,解剖其颈动脉,观察损伤处血管病理改变。 结果 1、超声显示6头小型猪球囊扩张一侧(右侧)均出现动脉粥样硬化超声改变并血管狭窄。PSV、EDV均较造模前显著增高,血管管腔面积较造模前显著变小,并且可见不同类型的粥样斑块。而球囊扩张对侧颈动脉内径造模前后无明显差异性,此为比较的实验基础。 2、术后血甘油三酯、胆固醇测定结果均较术前显著增高(p0.05)。甘油三酯在2周时增高最明显。 3、病理显示:球囊扩张侧血管呈现明显的动脉粥样硬化改变,内膜广泛增厚,可见大量泡沫细胞,可见新生血管,中膜平滑肌断裂、坏死,肌层变薄,广泛炎细胞浸润。而未进行扩张侧颈动脉经过高脂饲养也可见轻度内膜增厚,其余结构未见明显异常。 结论 应用球囊损伤+高脂饲养方法可成功建立小型猪颈动脉粥样硬化狭窄的动物模型。通过超声和病理观察,证实该模型且基本符合人类颈动脉粥样硬化的各个阶段的基本特点,并有一定程度的狭窄,可用于颈动脉粥样硬化狭窄研究的可靠动物模型。 第二部分白介素-17在颈动脉粥样硬化狭窄模型中的表达 目的观察白介素-17在颈动脉各层如内膜、平滑肌、粥样斑块中的表达,并探讨其作用机制。 方法采用免疫荧光染色技术对所取标本进行染色,照片,观察IL-17在损伤侧动脉及未损伤侧动脉管壁(包括内膜、中层平滑肌、斑块、外膜)的分布情况,进行分析总结。 结果免疫荧光显示在损伤侧动脉粥样硬化明显处,IL-17抗体聚集,在粥样硬化斑块中表现明显,而内膜及中层平滑肌层IL-17表达较少;在未损伤侧颈动脉IL-17抗体聚集较少。 结论 在动脉粥样硬化过程中,IL-17作为致炎性因子,参与动脉粥样硬化形成、发展,尤其在粥样斑块形成中起重要作用,并与斑块稳定性有关。但IL-17发挥上述作用的机制仍不明确,需进一步研究阐明。 全文结论 1、应用球囊损伤+高脂饲养方法可成功建立小型猪颈动脉粥样硬化狭窄的动物模型。通过超声及病理观察,证实该模型且基本符合人类颈动脉粥样硬化的各个阶段的基本特点,并有一定程度的狭窄,可作为颈动脉粥样硬化研究可靠的动物模型。 2、进一步验证了超声在颈动脉粥样硬化检测中的优势。 3、在动脉粥样硬化过程中,IL-17作为致炎性因子,在动脉粥样硬化斑块形成过程中,发挥促进动脉粥样硬化作用,并与斑块稳定性有关,但其具体作用机制仍需进一步研究。


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