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杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性与Graves病关联性的研究

郭成  
【摘要】:背景:Graves病(Graves disease, GD)是一种伴甲状腺激素(Thyroid hormone,TH)分泌增多的器官特异性自身免疫性疾病,临床上以高代谢症候群、甲状腺弥漫性肿大、Graves (?)(?)病(Graves ophthalmopathy, GO)和胫前黏液水肿为特点。Graves病是引起甲状腺机能亢进最常见的原因,近年来发病率逐年升高,在女性患病率为2%~4%,男性约1%,并存在发病年轻化趋势,严重危害人民群众的健康。 Graves病发病机制尚未完全阐明,但目前公认,它以遗传易感性为背景,在感染、毒素、药物等启动因素的作用下,引起体内免疫功能紊乱。研究认为Ts细胞功能缺陷,减弱了对Th细胞的抑制,后者辅助特异B淋巴细胞产生异质性TSH受体抗体(Thyroid hormone receptor antibodies, TRAb)。该抗体与TSHR (Thyroid-stimulating hormone receptor)的胞外结构域结合,引起甲状腺增生,合成并释放大量甲状腺激素。其中T淋巴细胞、NK细胞及多种细胞因子作为免疫调节剂、免疫效应分子等均参与到这一过程,对疾病的发生、发展、预后起重要作用。 自然杀伤细胞(natural killer cell, NK cell)是不同于T、B细胞、具有直接杀伤靶细胞效应的一类淋巴细胞,同时具有抗肿瘤、抗感染、免疫调节等功能,并参与移植排斥反应及自身免疫性疾病的发生。NK细胞功能主要受其表面活化性和抑制性受体的调控,当这两种受体的平衡异常时,NK细胞就会表现出异常的杀伤和免疫调节活性。近年NK细胞在Graves病中的作用颇受关注,研究认为存在NK细胞数量、活性及细胞因子分泌等的异常。 杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immnoglobulin-like receptor, KIR)属于免疫球蛋白超家族(Ig-superfamily, Ig-SF),表达于NK细胞和部分T细胞表面,是继HLA后发现的具有高度多样性的免疫调节基因家族。它特异性识别靶细胞表面的MHC Ⅰ类分子,传导激活或抑制信号,参与机体先天性和获得性免疫应答。KIR根据功能分为抑制性和活化性两类受体。人KIR基因位于19染色体的白细胞受体复合体(leukocyte receptor complex, LRC)内,迄今发现14个KIR基因和2个假基因。KIR基因呈高度的多态性(high diversity),除等位基因多态性外,还包括单倍型(haplotype)组成基因的多样性,表基因型多样性,即同一个体的不同T、NK细胞克隆表达的KIR不同。KIR基因高度多态性构成了不同个体和种族间疾病易感性和免疫应答差异的遗传学基础。我们前期研究发现GD患者的KIR2DS4基因频率显著低于对照组,推测KIR2DS4基因是GD发病的保护基因。 目的:对Graves病患者免疫调节基因KIR、HLA进行分析,探讨KIR-HLA受体配体对多样性与Graves病是否存在关联性;对KIR2DS4分子在NK细胞上的表达谱进行分析,研究(?)IR2DS4在表达水平与Graves病的关联性。同时测定NK细胞数量及杀伤活性,探讨NK细胞在Graves病中的作用机制。 方法:1.选取100名Graves病患者和86名年龄、性别相配比的健康对照,应用PCR/SSP的方法,对KIR基因家族的5个KIR基因(包括KIR2DL1,KIR2DS1, KIR2DL2, KIR2DS2, KIR2DL4)进行扩增(除KIR2DL4基因外,每个基因均应用2对不同的序列特异性引物),并用PCR/SSP法测定两组KIR-HLA-Cw受体配体对与Graves病的相关性。 2.选取95名Graves病患者和83名年龄、性别相配比的健康对照,应用流式细胞检测的方法,对Graves病的保护基因KIR2DS4在NK细胞上的表达进行测定,研究KIR在表达水平与Graves病的关联性。 3.收集GD组与健康对照组外周血免疫细胞分型的临床数据,探讨T细胞亚群及NK细胞在GD中的作用机制。 4.应用流式细胞技术,采用特异性抗体,检测方法2中两组外周血单个核细胞表面分子,包括CD3, CD56和CD69,测定NK细胞比例及活性,进一步探讨NK细胞在GD中的作用机制。 结果:1.GD组与对照组HLA-Cw基因频率分布的比较:GD患者HLA-Cw01基因频率高于对照组(p0.05),HLA-Cw03与HLA-Cw06基因频率低于对照组(p0.01)。 2.GD组与对照组KIR-HLA受体配体对的比较:GD患者KIR2DL1(+)HLA-CwLys(+)(p0.05)和KIR2DS1(+)HLA-CwLys(+)(p0.05)的阳性率较对照组显著降低。 3.GD组与对照组KIR2DS4(CD158i)在NK细胞上表达的比较:GD组(76.84%)低于对照组(84.34%),但无显著性差异; 4.临床数据分析显示,GD组较对照组CD8+T细胞比例显著降低(24.430±6.332vs28.497±6.390),CD4/8比值升高(1.673±0.590vs1.393±0.480),NK细胞比例降低(10.541±9.067vs18.258±7.490),以上比较p0.05。 5.GD组与对照组NK细胞比例及活性的比较:GD患者的NK细胞百分比(p0.01)及活性(p0.01)较对照组显著降低。初步分析GD组NK细胞活性与KIR2DS4表达无相关性。 结论:1.GD患者中抑制性KIR2DL1和活化性KIR2DS1与其配体HLA-CwLys的组合频率均低于正常人群,说明KIR-HLA配对多样性与GD相关。 2.NK细胞表面KIR2DS4的表达阳性率GD患者低于正常人群,但未达到显著性差异,说明KIR2DS4在表达水平与基因水平存在差异,基因水平存在的差异在表达水平消失,影响表达的具体因素尚不明确。 3.GD患者中CD8+降低以及CD4/8升高,提示CD4+T细胞占优势,可能与TRAb产生有关。CD4/8比值升高,辅助性与抑制性T淋巴细胞失衡,导致抑制性T淋巴细胞对自身抗原特异性Th细胞和B细胞的抑制作用减弱,推测此异常是GD启动和发展的的重要条件。 4.GD患者NK细胞的百分比及活性均低于对照组,NK细胞具有抑制或杀伤活化的B细胞和其抗原呈递作用的树突细胞,抑制免疫球蛋白的合成和细胞毒T细胞生成的作用,NK细胞数量减少和或活性的降低可能起允许甲状腺内B细胞和T细胞的增殖,促进自身抗体的产生。


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12 牛丽君,郜玉珍;GRAVES病患者血清可溶性白介素2受体的探讨[J];中国误诊学杂志;2001年05期
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1 中南大学湘雅医院内分泌科教授 钟惠菊;治疗甲亢三注意[N];大众卫生报;2003年
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