收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

PI3K/Akt信号通路在TNF-α诱导的大鼠颞下颌关节滑膜炎模型中的作用研究

吴庆亭  
【摘要】:第一部分滑膜成纤维细胞的分离培养与鉴定目的:应用组织块法分离、培养大鼠颞下颌关节滑膜成纤维细胞(SFs),建立其体外培养体系。方法:无菌条件下取大鼠颞下颌关节滑膜组织,对滑膜细胞应用组织块法进行原代培养,在倒置显微镜下观察其细胞形态,对第三代滑膜细胞进行免疫荧光染色进行表面标记物的鉴定,以确定该细胞为滑膜成纤维细胞(SFs)。结果:倒置显微镜下观察可见细胞传至第3代时,细胞形态基本一致,呈梭形,胞浆丰富,核卵圆,位于细胞中央,核仁清晰。取第三代滑膜细胞进行免疫荧光染色,可以观察到所有的滑膜细胞均对波形蛋白(vimentin)表达阳性,然而细胞对CD68蛋白呈阴性表达,阳性染色部位在胞浆内,CD68染色仅观察到蓝染的细胞核,说明此细胞来源于中胚层,并且具有成纤维细胞的特征,是滑膜成纤维细胞。结论:1.应用组织块法培养出的颞下颌关节滑膜成纤维细胞具有纯度高及稳定的特点;2.传至第3代时滑膜细胞分布均匀、形态一致,可以用来进行后续实验。第二部分PI3K/Akt信号通路对TNF-α诱导滑膜成纤维细胞分泌IL-1β、COX2影响的实验研究目的:探讨PI3K/Akt信号传导通路在TNF-α诱导的颞下颌关节滑炎中的作用,并探讨其分子机制。方法:实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测SFs IL-1β、 COX2 mRNA的表达;ELISA检测各组培养上清液中IL-1β、COX2蛋白的表达;免疫组织化学检测各组SFs中PI3K、P-PI3K、Akt、P-Akt的表达。结果:RT-PCR结果表明,与TNF-α组相比较,各组IL-1β、COX2 mRNA的表达量均有统计学差异(P0.05);而LY294002组与空白对照组相比IL-1β、COX2 mRNA的表达量无统计学差异;LY294002+TNF-α组与空白对照组相比,IL-1β、COX2 mRNA的表达量也无统计学差异。ELISA结果显示,LY294002组细胞上清液中IL-1β、COX2的含量与空白对照组相比无统计学差异;LY294002+TNF-α组IL-1β、COX2的表达量与空白对照组相比也无统计学差异;与TNF-α组相比较,其他各组IL-1β和COX2的含量均有统计学差异(P0.05)。免疫细胞化学染色结果表明,TNF-α组PI3K、Akt平均光密度值与其他三组相比无统计学差异;TNF-α组P-PI3K、P-Akt平均光密度值明显高于其他三组且有统计学差异(P0.05);LY294002+TNF-α组与空白对照组相比,P-PI3K、P-Akt的表达量均无统计学差异。结论:1.TNF-α诱导SFs后可使细胞中IL-1β及COX2 mRNA表达升高,上清液中IL-1β、 COX2含量也明显增多。TNF-α诱导SFs可作为建立颞下颌关节滑膜炎细胞模型的方法。2. TNF-α诱导SFs产生炎性因子11-1β、COX2过程中存在PI3K/Akt信号通路的激活,LY294002可以阻断这一效应。3. PI3K/Akt信号通路在TNF-α诱导的SFs分泌IL-1β、COX2中发挥着重要的调节作用,此通路可能与颞下颌关节滑膜炎的发生发展密切相关。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 黄晨辉,徐小川;人体颞下颌关节盘抗力结构超微研究[J];口腔颌面修复学杂志;2000年04期
2 王学侠 ,徐宝琪;青少年正畸治疗前颞下颌关节X线表现的年龄和性别差异[J];国外医学.口腔医学分册;2000年01期
3 ;颞下颌关节外科国际研讨会及颞下颌关节外科继续教育学习班通知[J];中华口腔医学杂志;2002年03期
4 梁星峰,李祖富;调治疗颞下颌关节疼痛的临床分析[J];广东牙病防治;2004年01期
5 张雷,霍永力,孙志干,王建华;弹性枢轴垫治疗颞下颌关节不可复性盘前移位的临床效果评价[J];中国修复重建外科杂志;2005年09期
6 许跃,张志光,郑有华;突发性严重绞锁颞下颌关节的压力测量和分析[J];华西口腔医学杂志;2005年01期
7 邓末宏;龙星;李健;蔡恒星;孟庆功;房维;;手术治疗颞下颌关节盘穿孔的临床研究[J];中华口腔医学研究杂志(电子版);2008年01期
8 艾晓武;汤涛;陈璐;;颞下颌关节盘穿孔的临床研究观察[J];口腔医学研究;2008年04期
9 王鸿玉;;颞下颌关节侧向脱位的复位[J];广东牙病防治;2009年07期
10 岳亚东;李素娟;陈艳丽;;颞下颌关节盘穿孔的外科治疗分析[J];中国煤炭工业医学杂志;2010年09期
11 鲍海宏;张莹;王帅;;颞下颌关节色素沉着绒毛结节性滑膜炎1例[J];中国实用口腔科杂志;2011年02期
12 王建华;魏轶群;邓大京;陈建军;东耀峻;;颞下颌关节外侧上方脱位1例[J];口腔颌面外科杂志;2011年01期
13 刘志明;张周文;;颞下颌关节盘穿孔修复的研究进展[J];临床口腔医学杂志;2013年10期
14 林久祥;颞下颌关节的改变[J];国外医学参考资料.口腔医学分册;1975年02期
15 葛伟庆;分维在颞下颌关节音分析中的应用[J];国外医学.生物医学工程分册;1993年05期
16 程静涛;八种颞下颌关节盘置换材料的效果比较[J];现代口腔医学杂志;1994年01期
17 张志光,任材年,陈光晔,甘露;正常成人颞下颌关节腔内压测量与分析[J];中山医科大学学报;1995年03期
18 徐小川,王玉玮;颞下颌关节盘后区组织的研究进展[J];国外医学.口腔医学分册;1997年02期
19 胡凯;颞下颌关节负荷与颞下颌关节病[J];国外医学.生物医学工程分册;1998年01期
20 向喜林;颞下颌关节力学创伤的分子生物学研究[J];医用生物力学;1998年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 龙星;;颞下颌关节外科的进展[A];第八届全国颞下颌关节病学及(牙合)学大会论文汇编[C];2011年
2 刘奕;刘世森;林松杉;;主动咬合法复位颞下颌关节的临床研究[A];第八届全国颞下颌关节病学及(牙合)学大会论文汇编[C];2011年
3 胡敏;;老年颞下颌关节疾病[A];第八届全国颞下颌关节病学及(牙合)学大会论文汇编[C];2011年
4 胡敏;孙振宇;尹音;李冬霞;李传兵;田慧颖;;加速度负荷对颞下颌关节的影响[A];中华口腔医学会第二次全国会员代表大会暨第七次全国口腔医学学术会议论文汇编[C];2001年
5 张志光;;颞下颌关节缺损修复与重建的应用进展[A];第九次全国颞下颌关节病学及(牙合)学研讨会论文汇编[C];2012年
6 高全文;柳春明;宋慧锋;许明火;柴家科;刘灿;;计算机辅助技术在人工颞下颌关节置换的初步临床应用[A];第七届中国医师协会美容与整形医师大会论文集[C];2010年
7 胡敏;;颞下颌关节良性肿瘤和肿瘤样疾患[A];第八届全国颞下颌关节病学及(牙合)学大会论文汇编[C];2011年
8 傅开元;;正畸和修复治疗中对颞下颌关节问题的判断和处理[A];第八届全国颞下颌关节病学及(牙合)学大会论文汇编[C];2011年
9 马文盛;;石家庄市青少年颞下颌关节症状相关因素调查[A];第八届全国颞下颌关节病学及(牙合)学大会论文汇编[C];2011年
10 许跃;周雯燕;张志光;郑有华;;基于计算流体力学的颞下颌关节上腔流体三维运动仿真[A];第八届全国颞下颌关节病学及(牙合)学大会论文汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 林雪芬;TLR4/PI3K信号通路在大鼠颞下颌关节滑膜炎中的作用研究[D];山东大学;2015年
2 李齐宏;颞下颌关节开口运动的生物力学研究[D];第四军医大学;2014年
3 买买提吐逊·吐尔地;图像融合技术建立颞下颌关节有限元模型的生物力学分析研究[D];新疆医科大学;2014年
4 陆金标;颞下颌关节盘穿孔外科治疗的临床及影像学研究&病例报告[D];武汉大学;2014年
5 付崇建;下颌和颞下颌关节运动影像和运动轨迹的建立及临床初步应用[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年
6 许跃;下颌骨单侧前上牵引力对大鼠颞下颌关节影响的初步研究[D];四川大学;2006年
7 刘志明;人颞下颌关节滑膜间充质干细胞神经化与疼痛的相关研究[D];武汉大学;2012年
8 付崇建;下颌和颞下颌关节运动影像和运动轨迹的建立及临床初步应用[D];中国人民解放军医学院;2011年
9 张渊;量化的咬合接触与颞下颌关节应力关系的生物力学研究[D];第四军医大学;2006年
10 刘桂才;颌面部撞击伤对羊颞下颌关节间接性损伤的实验研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吴庆亭;PI3K/Akt信号通路在TNF-α诱导的大鼠颞下颌关节滑膜炎模型中的作用研究[D];山东大学;2015年
2 张永辉;健康青年人颞下颌关节结构的MRI与CBCT测量分析研究[D];昆明医科大学;2015年
3 廖云阳;放疗对兔颞下颌关节组织结构影响的研究[D];福建医科大学;2011年
4 顾卫平;利用中国可视化人体图像建立颞下颌关节的三维实体和有限元模型[D];南京医科大学;2005年
5 肖进;偏侧咀嚼对大鼠颞下颌关节影响的病理学研究[D];青岛大学;2002年
6 贾秀川;正常志愿者与颞下颌关节紊乱综合征患者颞下颌关节磁共振成像检查的初步研究[D];河北医科大学;2003年
7 朱娴;偏侧咀嚼与颞下颌关节盘前移关系的探究[D];浙江大学;2011年
8 杨凤丽;颞下颌关节弹响治疗前后的磁共振对比研究[D];青岛大学;2011年
9 齐梦怡;α-平滑肌肌动蛋白在山羊颞下颌关节盘和自组装基体中的表达[D];兰州大学;2012年
10 王丰;全颞下颌关节置换稳定性的实验研究[D];中国医科大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 上海瑞金医院神经内科 蒋天放 王刚;帕金森易误诊为颞下颌关节障碍[N];健康报;2013年
2 ;什么是颞下颌关节紊乱综合征[N];家庭医生报;2004年
3 彭礼;值得注意的六大古怪症状[N];大众卫生报;2008年
4 ;睡觉磨牙是否蛔虫作怪[N];医药导报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978