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膀胱癌树突状细胞疫苗交叉免疫性研究及联合瘤标诊断膀胱癌的价值

周春文  
【摘要】:研究目的: 1.基础部分:研究和探讨膀胱癌细胞与DC融合冲击致敏DC获得DC疫苗后,是否在体外诱导针对异株膀胱癌细胞的CTL反应、在动物实验中产生对异株膀胱癌动物模型的特异性抗肿瘤免疫效应,从而探讨同一肿瘤的不同细胞株致敏的DC疫苗是否具有交叉免疫性。 2.临床部分:探讨反映肿瘤发生发展不同阶段的尿瘤标CYFRA21-1、端粒酶、VEGF联合检测膀胱移行细胞癌(BTCC)的价值和意义。 研究方法: 1.基础部分:对膀胱癌细胞株5637和T-24传代培养;主要参照Inaba等的方法,结合粘附贴壁原理,进行小鼠骨髓DC细胞的原代培养和在小鼠重组GM-CSF、IL-4刺激下、在RPMI-1640完全培养液内的DC体外扩增;应用DC表面特异性细胞分子标志对DC进行免疫荧光鉴定和流式细胞术鉴定,并通过扫描电镜技术对DC进行表面形态鉴定;利用聚乙二醇PEG细胞融合技术,完成DC与膀胱癌细胞5637的体外细胞融合,构建递呈完全细胞性抗原的DC疫苗;利用尼龙毛柱分离法完成BALB/c小鼠脾脏反应T细胞的分离;通过DC/5637杂交瘤DC疫苗与T细胞的混合培养体外诱导特异性CTL,并以MTT法对CTL的肿瘤细胞杀伤活性进行检测;检测DC/5637杂交瘤DC疫苗诱导的CTL对膀胱癌T-24细胞是


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