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生长抑素类似物诱导肝癌细胞凋亡和bcl-2/bax表达的研究

陈军  
【摘要】:目的:原发性肝癌(Primary liver cancer,PHC)是世界上最严重的恶性肿瘤之一,每年全球约125万人为此丧生。我国是PHC的高发区。原发性肝癌在我国恶性肿瘤的发病率中占第三位,年发病率约为欧美的10倍以上。据卫生部统计,肝癌死亡率为我国男性恶性肿瘤的第2位,女性恶性肿瘤的第4位。肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)在我国占PHC的绝大多数(91.5%)。原发性肝癌具有不易发现、发展快、生存期短、病死率高、预后差的特点。临床就诊者多属中晚期,手术切除率低,常规化疗及放疗效果不佳,且副作用大,,患者常难以耐受,其他疗法如基因治疗、生物治疗等作用亦不明显。近年来,生长抑素(somatostatin,SST)及其类似物对肿瘤的抑制作用越来越受到人们的关注。临床上应用生长抑素治疗神经内分泌性肿瘤已取得了令人满意的效果。大量的研究表明,生长抑素及其类似物能够抑制消化系统的实体性肿瘤如胃癌、结肠癌、胰腺癌等的生长,并认为该抑制作用与生长抑素诱导肿瘤细胞凋亡(apoptosis)有关。但对生长抑素抑制原发性肝癌的研究较少。奥曲肽(Octreotide),商品名善宁(Sandostatin)是人工合成的生长抑素八肽衍生物,与天然的生长抑素相比,具有半衰期长、作用更强大的特点,使临床应用更加方便有效。本课题研究采用流式细胞仪、免疫组化和原位杂交方法观察奥曲肽对肝癌细胞(HepG_2)凋亡和凋亡基因的影响,探讨生长抑素对肝癌抑制作用的机理,为临床应用提供实验依据。方法:用奥曲肽(octreotide)(0.25μg/ml)分别作用人肝癌细胞(HepG_2)0h、6h、12h和24h,以0h作为样本对照组,采用DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪检测细胞凋亡;用免疫组化和原位杂交方法研究不同时相肝癌细胞(HepG_2)bcl—2/bax表达的变化。结果:奥曲肽作用HepG_2


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