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基质金属蛋白酶-2及其组织抑制剂-1在环孢素A慢性肾毒性中的作用

尹佳  
【摘要】:【目的】探讨基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1在环孢素A慢性肾毒性中的作用。 【方法】以wister大鼠为研究对象,将24只大鼠随机分为四组,每组6只。A组,正常对照组,每日每只大鼠皮下注射橄榄油1ml/kg;B组,每日每只大鼠皮下注射CsA 10mg/kg;C组,每日每只大鼠皮下注射CsA 15mg/kg;D组,每日每只大鼠皮下注射CsA 20mg/kg。无盐鼠饲料喂养,共四周,以建立环孢素A慢性肾毒性的大鼠模型。实验期间,大鼠自由摄食、饮水,自然昼夜采光,室温18~28℃,相对湿度60%~80%。于最后一次注射后24小时以1%戊巴比妥钠5ml/kg腹腔注射,麻醉大鼠后开腹,自下腔静脉取血测血肌酐以及血环孢素浓度,迅速取左肾置于液氮中保存,以异硫氰酸胍法提取组织总mRNA,通过荧光定量RT-PCR的方法,检测肾组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的mRNA表达情况研究,不同剂量环孢素A(10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg皮下注射)对大鼠肾组织中MMP-2、TIMP-1基因表达的影响情况。取右肾沿肾长轴剖开,置于中性福尔马林溶液中固定,经洗涤、脱水、透明等操作后进行蜡块包埋,切片然后制片,以HE染色在光镜下观察肾组织的病理改变。 【结果】(1)各处理组较对照组的TIMP-1mRNA的表达均增加,差异有显著性(P0.05)。且各处理组TIMP-1mRNA的表达量均随环孢素A剂量的增加而呈递增趋势(r=0.85)。(2)各处理组较对照组的MMP-2mRNA的表达均增加,差


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