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HLA-DRB1等位基因多态性和乙肝病毒基因型与慢性乙型肝炎α-干扰素抗病毒治疗应答的相关性研究

褚瑞海  
【摘要】:目的: 探讨山东省乙肝病毒基因型的分布情况及其与慢性乙型肝炎α-干扰素抗病毒治疗应答的相关性。 方法: 1.研究对象 249例慢性HBV-DNA阳性者均为我院2002年2月至2003年10月门诊和住院病人,男186例,女63例,平均年龄33.8±14.6岁,其中无症状携带者(ASC)53例,慢性肝炎(CAH)126例,肝硬化(LC)38例,重型肝炎(FHF)32例,所有病例和对照均为山东地区的华人汉族人,诊断均符合2000年全国病毒性肝炎会议制定的标准。通过适当的临床和实验室方法排除所有引起慢性肝病的其他因素,如HCV感染、自身免疫性肝炎、酒精性肝炎和代谢失调。所有病例均无抑郁症病史、免疫缺陷病毒感染、应用干扰素史、化疗或其他可影响治疗结果的试剂、甲状腺功能异常等。 α-干扰素治疗组包括126例慢性乙型肝炎患者(男性94例,女性32例,平均年龄:33.2±13.3岁)。 2.血清学检验 血清用来检测肝功能、乙肝五项病毒学指标(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBe)及HBV-DNA,剩余血清在-70℃保存备用。 3.HBV基因分型HBV-DNA应用直接煮沸法从200μL血清样本中提取,用巢式PCR扩增,引物均参考文献。第一轮PCR在一含40 μL反应缓冲液的试管中进行,包含4μL HBV-DNA,4μL 10×buffer,4μL浓度为15mM的MgCl2,4μL浓度为10mM的dNTPs,0.2μL浓度为5U/μL的Taq聚合酶,浓度为12.5μg/


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