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外周血单个核细胞的长期体外培养及丙型肝炎病毒细胞模型的建立

刘长虹  
【摘要】:背景 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是输血后非甲非乙型肝炎的主要病因,而丙型肝炎也是一种全球性的传染性肝病。急性丙型肝炎患者中,有超过50-85%的患者将发展成为慢性丙型肝炎,如果病情进一步进展还将发展为肝硬化和肝细胞肝癌。据美国疾病预防与控制中心统计,约20%至30%的慢性丙型肝炎患者最终将出现致命的临床症状和并发症。据专家预测,在今后的10-20年内,由于目前无症状或轻症患者将发展成为终末期肝病甚至肝癌,慢性丙型肝炎将成为医疗卫生保障系统的主要负担之一。1989年,人们首次应用分子生物学技术识别了丙型肝炎病毒基因组。但是,到目前为止,仍然没有建立理想的丙型肝炎病毒细胞模型。虽然,人们对丙型肝炎病毒基因结构和单独病毒蛋白的认识不断增加,但是由于缺乏这种可靠和有效的病毒培养系统,丙型肝炎病毒复制和致病机制的研究均受到了很大限制。同时,关于丙型肝炎疫苗和有效治疗方法的研究也无法进行。丙型肝炎病毒能够感染淋巴细胞源性细胞,特别是人外周血单个核细胞(human peripheral blood mononuclear cells,PBMC)。但是,PBMC属于正常的体细胞,其生存期有限,不能够用于长期的观察和研究。如果用正常PBMC来建立体外长期培养的丙型肝炎病毒细胞模型,就必须延长PBMC的生存期。 真核细胞的染色体决定了该细胞的基因型,染色体的末端结构被称为端粒。胚胎细胞具有较长的染色体,而衰老细胞的端粒则短得多。在大多数人类体细胞内,端粒随着细胞的每一次分裂而不断缩短,最终导致染色体失去其稳定性,细胞进入衰老期。在微生物和肿瘤细胞内,存在


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