外周血淋巴细胞HLA-I基因表达与移植后机体免疫状态的关系探讨

【摘要】：目的:通过建立检测HLA-A、-B非多态位点表达的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,并结合CD4/CD8比值和免疫抑制剂(FK506)血药浓度,研究外周血淋巴细胞(PBL)HLA-I作为移植后免疫状态,尤其是早期排异反应评估指标的可行性。方法:依据GenBank中人HLA-I cDNA序列,根据HLA-A基因外显子4、5中的保守序列自主设计、筛选引物,采用RT-PCR一步法扩增HLA-A mRNA。收集30例肾移植患者术前及术后3个月内的抗凝外周血(随访10例),并设立正常对照61例,提取外周血淋巴细胞,RT-PCR扩增HLA-A mRNA,琼脂糖凝胶电泳结果采用Bandscan软件分析相对灰度值,半定量HLA-A的基因表达。同时参照文献合成HLA-B特异性引物,随机选择5例随访病人与20例正常对照,RT-PCR扩增HLA-B mRNA,以观察HLA-A与HLA-B测定符合率。并采用流式细胞术、酶联免疫吸附法(ELISA)连续监测术后CD4/CD8比值及FK506 血药浓度。结果: 1.肾移植患者HLA-A mRNA阳性表达率为29%(20/70),较正常对照表达(82%,50/61)明显降低(P0.001)。10例连续监测患者中有2例在监测期间发生急性排斥反应,排斥期间患者的HLA-A表达升高。不同患者移植后同一时期HLA-A表达存在个体差异,与有无感染、排斥反应有关。 2.HLA-B mRNA在随访病例中表达明显低于正常对组(P0.05)。与相应的HLA-A表达比较,二者具有一致性(P0.05)。 3.随访移植患者的外周血T淋巴细胞亚群与正常对照间的差异具有显著性

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13	李中凌,杨锦建,宋东奎,张卫星;普乐可复对肾脏毒性的实验研究[J];河南医科大学学报;2001年06期
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15	刘训良!210029,吴宏飞!210029,徐泽宽!210029,张炜!210029,睦元庚!210029,徐正铨!210029,武正炎!210029;胰、肾一期联合移植术一例报告[J];中华器官移植杂志;2001年03期
16	田增民,刘爽,李士月,赵全军,尹丰,郝秋星,周英;人神经干细胞临床移植治疗帕金森病[J];第二军医大学学报;2003年09期
17	沈瑞雄,邵国兴,王禾,石炳毅,王强;羟基喜树碱诱导大鼠肾脏移植免疫耐受机制的探讨[J];第四军医大学学报;2003年08期
18	牛卫博,王为忠,季刚,陈会生,罗兰;小剂量FK506预处理对大鼠小肠移植缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响[J];第四军医大学学报;2003年11期
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1	秦绪珍;外周血淋巴细胞HLA-I基因表达与移植后机体免疫状态的关系探讨[D];山东大学;2005年
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6	王脚苟;急性心肌梗死后经冠脉移植骨髓基质干细胞的实验研究[D];福建医科大学;2007年
7	周志军;论沉默权[D];黑龙江大学;2006年
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2	张国清　王思海;我国发现人类白细胞抗原新等位基因[N];医药经济报;2005年
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5	记者翁淑贤　通讯员张学元徐秀章;广州首次发现人类MICA新等位基因[N];广州日报;2010年
6	记者毛磊;加拿大克隆出非典病毒基因[N];新华每日电讯;2003年
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10	记者王心见;加研制出抗艾滋病新疫苗[N];科技日报;2001年

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