BMP-2基因转染ADSCs复合CTCP成骨及修复颌骨缺损的实验研究

【摘要】：目的 1、探索SD大鼠脂肪组织来源干细胞(adipose derived stem cells，ADSCs)的体外培养方法，观察其体外增殖能力及生物学特性，对细胞表面干细胞相关标志进行鉴定，为脂肪干细胞的进一步研究奠定基础。 2、对原代及第3代ADSCs向脂肪细胞、成骨细胞、成脂肪细胞定向诱导，观察其多向分化潜能，并探讨其体外成骨能力，为ADSCs作为骨组织工程种子细胞提供理论依据。 3、扩增、纯化本实验室所构建的含重组人骨形态发生蛋白-2(human bone morphogenetic protein，hBMP-2)基因和含绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)基因的重组腺病毒表达载体(Ad-hBMP-2，Ad-GFP)，并测定其滴度；研究ADSCs经基因转染后生物学行为的变化和目的基因的表达，应用Ad-GFP转染细胞，测定腺病毒转染效率。 4、探索以Ad-BMP-2转染的ADSCs作种子细胞，并以壳聚糖—磷酸三钙(CTCP)为支架材料，构建组织工程化骨的可行性，观察在无免疫力的裸鼠体内成骨情况，和在有免疫力的SD大鼠体内修复下颌骨缺损的效果。方法 1、从3周龄SD大鼠腹股沟脂肪垫分离出脂肪组织，通过Ⅰ型胶原酶消化法获取原代ADSCs，适时传代。逐日倒置显微镜观察细胞形态及生长特征；研究其增殖过程，MTT法绘制出生长曲线；采用免疫组化、免疫荧光流式细胞术对细

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前20条

1	胡运生;范清宇;马保安;裘秀春;潘勇;;hBMP-2基因转染兔骨髓间充质干细胞的表达及生物学效应的观察[J];中国美容医学;2006年03期
2	张月东;张开刚;;脂肪干细胞在骨组织工程中的应用研究[J];社区医学杂志;2011年10期
3	张强;傅跃先;康权;甘立强;罗庆;刘燕;;腺病毒介导骨形态蛋白9基因转染兔脂肪干细胞[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年23期
4	郝伟;胡蕴玉;姜明;吕荣;王军;赵廷宝;;基于脂肪干细胞I型胶原凝胶PLGA-β-TCP支架的新型仿生骨组织工程复合体的构建及生物学性能[J];第四军医大学学报;2008年07期
5	王栋;鹿均先;熊传芝;;人脂肪干细胞分离培养鉴定及向成骨细胞诱导分化的实验研究[J];现代医学;2008年03期
6	邓敏;张楠;唐璐;鞠晓东;;腺病毒介导骨形态发生蛋白2基因转染诱导脂肪间充质干细胞向成骨细胞的定向分化[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年01期
7	孟国林;段春光;刘建;吕昌伟;杨旻;袁志;胡蕴玉;;血管生成素1和报告基因EGFP双基因共表达腺病毒的构建[J];第四军医大学学报;2008年11期
8	袁桂仪;伍卫;周淑娴;张玉玲;雷娟;;构建人HCN4基因重组腺病毒载体及其对大鼠骨髓间充质干细胞的感染效率[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年45期
9	虞卫;严煜;张裕东;;含有人热休克蛋白基因的重组腺病毒转染乳鼠心肌细胞的实验研究[J];交通医学;2009年06期
10	邱林;金先庆;罗小辑;丁幸坡;;转化生长因子β_3基因转染兔骨髓间充质干细胞的实验研究[J];中国修复重建外科杂志;2006年09期
11	蒋春华;罗勇军;黄庆愿;高钰琪;;缺氧诱导因子-1α基因转染对缺氧损伤HepG2细胞的保护作用[J];中国病理生理杂志;2010年01期
12	赵广民;李放;孙天胜;王浩;李小燕;;腺病毒介导人骨形态蛋白-7基因抑制去势大鼠骨质疏松的实验研究[J];中国矫形外科杂志;2006年01期
13	夏万尧;丁文龙;刘伟;钟梅芳;王丹茹;周广东;崔磊;曹谊林;;重组hTGF-β_1基因转染骨髓间充质干细胞及其表达[J];上海交通大学学报(医学版);2007年10期
14	邹君杰;杨宏宇;祁泓;章希炜;;大鼠VEGF腺病毒基因转染系统的构建及鉴定[J];中国普通外科杂志;2008年06期
15	张金康;孟国林;刘建;胡蕴玉;袁志;段春光;毕龙;白峰;黄鑫;禚文昆;李国臣;;携带人VEGF_(165)和ANG-1双基因的腺病毒载体的构建及目的基因的表达[J];中国矫形外科杂志;2010年04期
16	杨丽红;;VEGF转染对MSCs向神经细胞诱导分化的影响[J];中华神经外科疾病研究杂志;2010年04期
17	邓永忠;赵轶男;白峰;袁媛;刘昌胜;高文魁;董鑫;;多孔CPC材料复合转染VEGF的骨髓间充质干细胞修复大鼠颅骨缺损的实验研究[J];科学技术与工程;2011年16期
18	应希;王一;;αA晶状体蛋白重组腺病毒载体的构建和鉴定[J];眼科新进展;2011年09期
19	刘鹏;刘宇;解金红;关怀敏;王枫岭;钱其军;;心包穿刺简易装置在基因转染中的应用[J];中国实验动物学报;2007年03期
20	马凌云;李强;刘忠令;;腺病毒介导的鼠内皮抑素基因转染肺癌细胞体外抑制血管内皮细胞活性的实验研究[J];中国呼吸与危重监护杂志;2008年03期

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前10条

1	王桂兰;鲁继荣;成焕吉;马青山;张云峰;;高滴度含有目的基因IL-4RA的逆转录病毒的包装和浓缩[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年
2	易诚青;曹云;王秋根;马春辉;高堪达;周孜辉;左斌;张磊;;pAD-TGFβ1对骨组织工程种子细胞转归的转基因保护[A];第二届泛长江流域骨科新进展研讨会暨上颈椎伤病新理论新技术学习班论文汇编[C];2008年
3	王晋慧;姚明忠;顾锦法;孙兰英;郎明非;刘菁;刘新垣;;肿瘤靶向性腺病毒载体的构建[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
4	刘旭;田长富;;癌基因治疗中的腺病毒载体的开发和应用(综述Ⅱ)[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年（1993—2003）论文集[C];2003年
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7	黎军;何国祥;唐兵;;腺病毒携AT2R基因转染损伤的大鼠培养颈动脉的实验研究[A];中华医学会心血管病学分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2006年
8	陈庆永;陈道达;蒋春舫;陈剑英;;腺病毒介导野生型PTEN基因对乳腺癌MDA-MB-468细胞周期的影响[A];第四届全国灾害医学学术会议暨第二届“华森杯”灾害医学优秀学术论文评审会学术论文集[C];2007年
9	吴运谱;张晓华;乔传玲;;腺病毒载体流感疫苗研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
10	刘金娟;马翔;;小鼠HSP27基因腺病毒表达载体的构建与鉴定[A];第四届长三角妇产科学术论坛暨浙江省2009年妇产科学术年会论文汇编[C];2009年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	郑培惠;BMP-2基因转染ADSCs复合CTCP成骨及修复颌骨缺损的实验研究[D];山东大学;2006年
2	万光勇;人脂肪干细胞与部分脱钙骨支架构建组织工程骨的试验研究[D];山东大学;2009年
3	王克涛;腺病毒介导的hBMP-2基因转移修复颌骨缺损的实验研究[D];山东大学;2005年
4	刘霞;VEGF基因转染对大鼠骨髓间充质干细胞生物学功能的影响[D];吉林大学;2011年
5	李文通;腺病毒加载的RNAi逆转BCRP介导的非典型多药耐药的研究[D];山东大学;2006年
6	程雷;BMP-7局部基因治疗和组织工程化骨对脊柱融合影响的实验研究[D];山东大学;2006年
7	郝伟;基于兔脂肪干细胞+I型胶原凝胶+PLGA-β-TCP支架的新型骨组织工程复合体的构建以及修复自体桡骨缺损的相关实验研究[D];第四军医大学;2007年
8	顾海伦;hBMP-2和Ad-hBMP-2对体外培养人退变腰椎间盘细胞促合成代谢作用的研究[D];中国医科大学;2006年
9	邓文胜;鸟氨酸脱羧酶基因与乳腺癌细胞增殖侵袭关系的实验研究[D];山东大学;2008年
10	何远翔;人成肌细胞移植治疗肛门失禁的实验研究[D];第二军医大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	苏秀云;应用AdEasy腺病毒载体系统构建携带人骨形成蛋白2基因的重组腺病毒[D];第一军医大学;2005年
2	陈媛媛;hIL-12腺病毒载体的构建及在人hBMSCs中的表达[D];山西医科大学;2010年
3	宋默;携带p53基因和Flt3L配体基因的腺病毒载体的构建及鉴定[D];大连医科大学;2010年
4	韩长旭;负载BMP-7基因的脂肪间充质干细胞向成骨细胞分化的实验研究[D];中国医科大学;2008年
5	寿成珉;腺病毒介导的蛋白聚糖Ⅱ基因转染对高糖环境下大鼠系膜细胞增殖，TGF-β1及细胞外基质的作用[D];浙江大学;2006年
6	姚远;重组复制缺陷型腺病毒载体介导的VEGFcDNA基因治疗缺血皮瓣的实验研究[D];安徽医科大学;2006年
7	潘廷明;转染cxcr4基因对骨髓间充质干细胞向SDF-1趋化能力的影响[D];福建医科大学;2009年
8	宋付凯;高表达hRAMP1基因腺病毒载体的构建及其在兔MSCs中表达的实验研究[D];遵义医学院;2010年
9	林美萍;肝细胞生长因子基因转染骨髓间充质干细胞治疗心肌病心力衰竭的实验研究[D];福建医科大学;2008年
10	魏菁;腺病毒介导ChM-I基因抑制BMSCs体内构建的软骨血管化的实验研究[D];西北大学;2010年

中国重要报纸全文数据库

前10条

1	本报记者宋全政;真诚守护每一位师生的安全[N];中国教育报;2007年
2	白向忠本报记者王建梁;一路追着环保走[N];科技日报;2007年
3	本报记者李德辉通讯员王静实习生王远;在产学研的广阔海洋纵横驰骋[N];联合日报;2006年
4	记者宋全政通讯员周大白张果红;学生登台讲课师生田间调研[N];中国教育报;2008年
5	王东;桃李满天下[N];科技日报;2007年
6	本报记者赵秋丽　通讯员曹宪忠冯刚;“文史见长”创优势[N];光明日报;2010年
7	记者魏海政　宋全政;山东大学泰山学堂多次评价多次流动育英才[N];中国教育报;2010年
8	记者孙明河魏东;“不辜负人民嘱托,坚决完成任务!”[N];科技日报;2008年
9	特约记者　鲁晓懋;老山东大学：东方瑞士的人文之脉[N];中国房地产报;2006年
10	记者　赵秋丽通讯员　王秋生;山东大学：推进按大类招生,实施个性化培养[N];光明日报;2006年

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