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四种中药含药血清对大鼠结肠的促动力学作用的筛选研究

石艳婷  
【摘要】: 目的:本研究拟通过观察槟榔、蒲公英、莱菔子、生白术中药血清对大鼠离体结肠平滑肌肌条和平滑肌细胞收缩效应的影响,筛选出具有较强促结肠动力作用的中药含药血清,为进一步研究促结肠动力药物奠定基础。 方法: 1.动物分组:52只大鼠体重(230±20)g,雌雄不限,随机分为观察组:10%浓度组(4组:槟榔组、蒲公英组、莱菔子组、生白术组)、50%浓度组(4组:槟榔组、蒲公英组、莱菔子组、生白术组)、100%浓度组(4组:槟榔组、蒲公英组、莱菔子组、生白术组),生理盐水组作为对照组,共计13组。 2.含药血清的制备:13组大鼠,每组4只,采用通法,灌胃3天,每天2次,1ml/100g体重,末次灌胃后1h后,腹腔麻醉,取下腔静脉血制备药物血清,每组制得血清约7ml,-20℃冷藏备用,1个月内使用。 3.观察指标:平滑肌肌条的收缩频率和收缩幅度;平滑肌细胞的有效收缩。 4.实验方法:(1)制备离体结肠平滑肌纵肌肌条和横肌肌条(7mm×3mm),置于5ml Kerbs液中,通混合气体(95%O_2和5%CO_2),各组血清及阳性对照(1×10~(-3)mol/LACh)每次均加入50μl,加药观察15min,观察各组引起的结肠平滑肌肌条收缩效应。SMUP-PC型生理信号处理系统实时记录。(2)参考改进的Bitar方法制备大鼠游离的结肠平滑肌细胞,观察各组血清及阳性对照(ACh)组引起的结肠平滑肌细胞收缩效应。收缩效应以给药组细胞平均长度较空白血清组细胞平均长度下降百分数表示。用Trypan蓝染色检查细胞活性,要求活细胞在90%以上。 结果: 1.与空白血清组比较:10%和50%浓度槟榔含药血清对结肠纵肌肌条的收缩频率有明显促进作用(P<0.05);10%浓度蒲公英含药血清可增强横行肌条的收缩幅度(P<0.05);莱菔子含药血清100%浓度增强纵行肌条的收缩频率(P<0.05),不同浓度对纵肌肌条及横机肌条的收缩幅度均有不同程度的兴奋作用(P<0.05);50%及100%浓度血清生白术含药血清对结肠纵行肌条的收缩幅度起明显促进作用(P<0.05),各浓度血清对结肠横行肌条的收缩频率及收缩幅度均有显著促进作用(P<0.05)。 2.分离的结肠平滑肌细胞长度平均(69.8±7.2)μm,宽度平均(8.0±3.4)μm。加入1×10~(-3)mol/L ACh后长度平均(50.4±4.9)μm,宽度平均(9.0±4.7)μm,长度明显缩短(P<0.05)。4种中药含药血清对结肠平滑肌细胞的缩短作用在100%浓度范围内逐渐增强。槟榔含药血清100%浓度对细胞的收缩作用最强(P<0.05)收缩百分数为(18±2)%;蒲公英含药血清100%浓度对细胞的收缩作用最强(P<0.05),收缩百分数为(24±6%);莱菔子含药血清对结肠平滑肌细胞的缩短作用100%浓度为最强(P<0.05),收缩百分数为(24±7)%;生白术含药血清对细胞的收缩作用以100%浓度血清组最强(P<0.05),收缩百分数为(23±6)%;1×10~(-3)mol/LACh对结肠平滑肌细胞具有显著的收缩作用,其细胞收缩百分数为(28±5)%。4种中药含药血清作用最强组之间差异无统计学意义。 结论: 1.槟榔、蒲公英、莱菔子、生白术含药血清均可不同程度促进肌条收缩。对纵行肌条收缩频率和收缩幅度作用最强分别为50%浓度槟榔含药血清和50%浓度生白术含药血清。对横行肌条收缩频率和收缩幅度作用最强为10%浓度生白术含药血清。 2.不同浓度槟榔、蒲公英、莱菔子、生白术中药血清均可引起结肠平滑肌细胞有效收缩。


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