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水通道蛋白-5在机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织中的表达及相关机制的研究

刘洋  
【摘要】: 目的建立呼吸机相关性肺损伤(VILI)大鼠动物模型,研究不同潮气量机械通气对肺组织损伤的影响。 方法SPF级雄性SD大鼠60只,体重200-250g,实验前12h禁食,自由饮水。10%水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉后,颈部正中切开置入气管导管,据潮气量(VT)不同随机分成三组(n=20):正常对照组(A组)气管切开自主呼吸4h;除对照组外均接小动物呼吸机,小潮气量组(B组)VT7ml/kg,RR 40次/min,通气4h;大潮气量组(C组)VT 40ml/kg,RR 40次/min,通气4h。4h后腹主动脉放血处死动物,钳夹左侧主支气管,收集左侧肺组织,称湿重后置烤箱80℃干燥至48h恒重,测定肺湿/干重(W/D)。经气管灌入4%多聚甲醛固定右侧肺组织,行HE染色观察肺组织病理学变化。 结果(1)对照组肺组织无明显病理学变化,小潮气量组大鼠肺组织大体标本表面无出血点,光学显微镜下肺泡壁完整、稍增厚,肺泡腔无出血、充血,无明显炎细胞浸润;大潮气量组肺组织表面充血及出血明显,光镜下肺组织失去正常的结构,肺泡过度扩张,肺泡壁及肺泡腔内大量出血及炎细胞浸润。(2)与A组比较,B组W/D值无明显变化,C组W/D值升高(P0.05),差异具有统计学意义;与B组比较,C组W/D值升高(P0.05),差异具有统计学意义。 结论大潮气量机械通气导致大鼠肺组织严重损伤,肺组织水肿明显,通过肺组织病理学变化及肺组织湿/干重测定表明本实验设定大潮气量机械通气可建立呼吸机相关肺损伤大鼠动物模型(VILI)。 目的探讨不同潮气量对机械通气相关性肺损伤大鼠肺组织AQP5的基因及蛋白表达的影响。 方法SPF级雄性SD大鼠60只,体重200-250g,实验前12h禁食,自由饮水。10%水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉后,颈部正中切开置入气管导管,据潮气量(VT)不同随机分成三组(n=20):正常对照组(A组)气管切开自主呼吸4h;除对照组外均接小动物呼吸机,小潮气量组(B组)VT7ml/kg,RR 40次/min,通气4h;大潮气量组(C组)VT 40ml/kg,RR 40次/min,通气4h。4h后腹主动脉放血处死动物,立即剖胸,取大鼠肺组织保存。采用免疫组化、RT-PCR、Westernblot法测定肺组织中AQP5的基因及蛋白表达,同时进行肺组织病理学评分。 结果(1)与A组比较,B组AQP5表达无明显改变,C组AQP5表达降低(P0.05),差异具有统计学意义;与B组比较,C组AQP5表达降低(P0.05),差异具有统计学意义;(2)C组肺组织中AQP5的表达下调与大鼠肺损伤病理学变化一致。结论AQP5表达下调加重了机械通气诱发肺水肿的发生,可能为机械通气诱发肺水肿的机制之一。


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