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氨海水与5-羟色胺对栉孔扇贝解剖卵体外促熟作用的研究

邸炜鹏  
【摘要】:本文以栉孔扇贝(Chlamys farreri)为研究对象,研究了氨海水和5-羟色胺对其解剖卵的体外促熟作用。研究中探索了氨海水与5-羟色胺的最佳促熟条件,对体外促熟的受精卵进行了培育和观察,对处理液pH值条件进行了研究,并通过荧光显微技术观察了卵母细胞成熟前后核型态的变化,以期为贝类人工受精开辟一条新的途径,为贝类育种研究提供支持。 研究中,通过氨海水和5-羟色胺体外浸泡的方法处理栉孔扇贝卵母细胞使其成熟,并完成人工受精。结果表明:一定浓度的氨海水可显著促使栉孔扇贝卵母细胞生发泡破裂,但经过氨处理的卵母细胞受精率却不高,且存在大量畸形;5-羟色胺不能诱导栉孔扇贝卵母细胞生发泡破裂,但可有效地使已经发生生发泡破裂的卵母细胞进一步成熟。两种试剂混合处理效果稍好于单独处理,但表现出一定的相互抑制。而先用氨海水处理然后用5-羟色胺处理可以得到最佳诱导效果,受精率可达(40.02±2.73)%。 对幼虫孵化的研究表明:体外促熟处理的受精卵发育比诱导排卵滞后。混合处理孵化率仅为(16.98±1.66)%,且畸形率偏高(38.62±5.05)%,幼虫高和长也较小。最佳处理条件下幼虫孵化率达到(47.69±1.31)%,低于相同情况下诱导排卵孵化率(85.55±1.34)%,但畸形较少,石蜡切片观察发现幼虫器官已经开始分化。 对处理液pH值的研究表明:卵母细胞成熟需要偏碱性的环境,但是pH不是其成熟的决定因素,NH4+起到了关键的作用。 对卵母细胞成熟前后的荧光显微观察表明:诱导排卵的卵母细胞基本都处于第一次减数分裂中期,而体外促熟的卵母细胞只有部分处于第一次减数分裂中期,另一部分阻滞于前期与中期之间,这种阻滞很可能需要激活才能完成减数分裂,5-羟色胺可能正是起到这种这种作用。


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