收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

几种赤潮藻抗体的制备及酶联免疫检测方法的建立和应用

亓海刚  
【摘要】:本研究选取我国近海常见的十九种赤潮藻为研究对象,通过免疫家兔制备了它们的多克隆抗体。对这些抗体进行效价测定和特异性鉴定后,选取了特异性好的几种分别建立了相应海藻的间接竞争型酶联免疫检测方法,并在模拟天然海水样品的检测中取得了比较理想的结果。 通过用旋链角毛藻细胞免疫小鼠、产蛋鸡和家兔,结果发现三种动物均产生了抗旋链角毛藻的多克隆抗体,不同的免疫程序对抗体的产生和抗体的特异性影响不大。其中兔抗体制备的时间较短,效价高,且抗体的总量大,因此在十几种赤潮藻的多克隆抗体制备过程中,采用家兔作为接受免疫的对象。对制备的十几种赤潮藻的多克隆抗体分析后发现,所有抗体均表现高亲和力,效价最低的为6000,最高的达到69000;多数抗体特异性不好,与其他海藻显示一定的交叉反应,但有几种海藻的抗血清与其他海藻交叉反应很小或者没有;通过适当的吸附封闭法处理多克隆抗体,可以有效降低某些多克隆抗体与其他海藻的交叉反应。 本研究选取特异性较好、具有高效价的抗柔弱角毛藻抗血清、抗赤潮异弯藻抗血清、抗海洋原甲藻抗血清和抗红色裸甲藻抗血清,分别建立了相应海藻的竞争型酶联免疫检测方法。抗柔弱角毛藻抗血清对角毛藻属旋链角毛藻、柔弱角毛藻、纤细角毛藻和微型角毛藻均可以很好的识别,具有一定的属特异性,最低检测数目达到51个细胞左右。其他三种抗血清均显示种特异性,在竞争ELISA试验中,最低检测细胞数目在几十到几百个之间,其中赤潮异弯藻和海洋原甲藻的最低检测数目分别达到了77个和55个细胞左右。利用这些抗血清和ELISA方法,对几份模拟海水样品中的藻细胞进行了定量检测,和光镜直接计数的结果比较后发现,两者基本一致。此外,还对间接ELISA在浮游微藻检测中的应用作了初步探讨。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 马冬雪;孟祥晨;高学军;李艾黎;徐渐;卲红;;乳杆菌对牛乳β-乳球蛋白致敏小鼠淋巴细胞分泌Th1/Th2型细胞因子和抗体的体外影响[J];微生物学通报;2011年07期
2 蔡卓平;段璐洋;肖群;段舜山;;风浪扰动促进中肋骨条藻和球形棕囊藻增殖的模拟研究[J];海洋环境科学;2011年04期
3 马丰英;邹浩勇;何启盖;;表达猪肺炎支原体免疫原性基因的重组猪霍乱沙门氏菌对小鼠的免疫原性[J];微生物学报;2011年09期
4 郭嫣秋;;植物生物反应器制药的商品化进展及展望[J];杭州师范大学学报(自然科学版);2011年04期
5 邵旻玮;孙雪;徐年军;;龙须菜对赤潮藻的生长抑制效应及其与环境因子的关系[J];海洋学研究;2011年02期
6 ;科学家分离出中和甲型流感病毒的超级抗体[J];上海预防医学;2011年08期
7 ;澳大利亚艾滋病疫苗研究取得突破[J];中国科技信息;2011年14期
8 赵路;;病毒在传播肥胖?[J];生命世界;2006年10期
9 ;科技动态点滴[J];科技与出版;2011年07期
10 刘战;顾晓峰;于宗光;胡西多;;一种新型动态汽车电子导航系统算法[J];科技信息;2011年15期
11 唐俊;;时间窗约束下的配送车辆调度问题研究[J];计算机工程与应用;2011年21期
12 刘萌森;;细胞不死性的设想[J];大科技(科学之谜);2011年07期
13 丁爱军;傅德智;吴信生;高波;李碧春;;两种载体重组神经氨酸酶基因及其在细胞中瞬时表达差异[J];江苏农业学报;2011年03期
14 范泉水;郑颖;王双印;邱薇;张连江;尹惠琼;李丽红;;中国常见毒蛇抗蛇毒F(ab′)_2抗体制备[J];云南大学学报(自然科学版);2007年S3期
15 刘艳;傅英姿;牛卫芬;;电化学免疫传感器中生物活性物质的固定方法研究进展[J];河南师范大学学报(自然科学版);2011年04期
16 李阳阳;吴娜娜;焦李成;尚荣华;刘若辰;;基于量子免疫克隆聚类的SAR图像变化检测[J];红外与毫米波学报;2011年04期
17 艾晴;;陈丰耀:民间“抗艾”老人的大爱情怀[J];今日科苑;2011年16期
18 毕昊;陆华新;王先广;卢艳军;刘志国;;利用PMCA技术实验不同剂量MCT联合DTT对PrP~(sc)转化的抑制效应[J];中国生物化学与分子生物学报;2011年09期
19 范朝冬;张英杰;;基于海明距的改进免疫算法及其在SAT中的应用[J];系统工程学报;2011年03期
20 王迪;黄艳梅;张光谋;姚燕飞;张林;赵小红;;河南汉族大学生群体ABO血型分布[J];新乡医学院学报;2011年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 韩聪;张耀洲;;家蚕OCIAD2基因的原核表达及相关研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会论文摘要汇编[C];2009年
2 柏兆方;李萍;李卫华;刘炳玉;张学敏;杨松成;王红霞;;NanoLC-ESI MS/MS对重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白的准确鉴定[A];2008年全国有机质谱学术会议论文集[C];2008年
3 袁芳;杨仁斌;;酶联免疫吸附分析在农药残留中的应用[A];首届全国农业环境科学学术研讨会论文集[C];2005年
4 王艳华;张德林;李学瑞;李克生;才学鹏;;检测弓形虫抗体免疫胶体金快速试纸条的研制[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年
5 刘佩红;王建;沈莉萍;徐锋;赵洪进;;上海地区猪增生性肠炎的血清流行病学调查[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集[C];2006年
6 郭雷鸣;林周;王婧;冯健男;沈倍奋;黎燕;;DR5抗体诱导凋亡及抗肿瘤效应研究[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
7 陈瑾;付蓉;邵宗鸿;;免疫相关性全血细胞减少症患者骨髓补体水平测定及相关研究[A];第七届全国血液免疫学学术大会暨2008年浙江省血液病学术年会论文汇编[C];2008年
8 牛国强;;对布鲁氏菌病的调查研究[A];2009新华杯迎国庆60周年畜牧兽医科技论文集[C];2009年
9 刘霞;贾汝琳;赵金霞;栗占国;;抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体在早期类风湿关节炎中的诊断意义[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年
10 李刚;钱国良;华修德;秦娜;王玉燕;刘凤权;;吡虫啉酶联免疫吸附检测方法的建立[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 周俊平;HAI-TMIP抗体对人非小细胞肺癌血管内皮细胞作用及其机制的研究[D];第二军医大学;2008年
2 曹春晖;两种赤潮藻对锰的生理生态响应[D];中国海洋大学;2010年
3 文世勇;基于营养盐的赤潮灾害风险评估技术与应用研究[D];大连海事大学;2010年
4 王进河;两种赤潮微藻与两种轮虫相互作用对气候因子变化响应的实验生态学研究[D];中国海洋大学;2012年
5 姜大峰;单分子检测结合荧光显微术定量抗体[D];山东大学;2010年
6 周媛;指状许水蚤与赤潮微藻相互作用的实验生态学研究[D];中国海洋大学;2010年
7 张清春;东海大规模甲藻赤潮种吞噬特性及其在赤潮形成中的作用初探[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
8 雷惠;基于固有光学量的东海赤潮遥感提取算法研究[D];浙江大学;2011年
9 齐红菊;利用叶绿素荧光方法检测浮游植物营养盐限制及跟踪赤潮生消的研究[D];中国海洋大学;2012年
10 张宝玉;赤潮藻的分子标识及荧光原位杂(FISH)技术在检测赤潮藻中的应用[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘玉华;鸡恒定链基因的克隆、表达及其抗体制备[D];安徽农业大学;2004年
2 尤海芹;氰戊菊酯免疫分析化学研究[D];扬州大学;2005年
3 陈小锋;克伦特罗免疫分析化学研究[D];扬州大学;2005年
4 寿佩勤;糖萜素对小鼠细胞和体液免疫功能的影响[D];浙江大学;2005年
5 亓海刚;几种赤潮藻抗体的制备及酶联免疫检测方法的建立和应用[D];中国海洋大学;2005年
6 胡春艳;衣原体噬菌体Vp1蛋白的表达、提纯及杂交瘤细胞的培养[D];天津医科大学;2008年
7 凌珊珊;禽呼肠孤病毒σC基因的克隆表达及其免疫原性初步研究[D];四川农业大学;2008年
8 田露芳;制备人源性TNF-α单克隆抗体治疗变应性鼻炎[D];山西医科大学;2009年
9 王恒;己烯雌酚免疫分析化学研究[D];扬州大学;2006年
10 孙峰;脲类除草剂异丙隆残留酶联免疫分析方法的建立[D];南京工业大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 高维新;什么是抗体,哪些疾病可能丢失抗体?[N];农村医药报(汉);2004年
2 记者 谢开飞;检测赤潮藻仅需5分钟[N];科技日报;2009年
3 刘霞;塑料抗体首次抗病试验取得成功[N];科技日报;2010年
4 常丽君;美发现能攻入超级病菌内部的抗体[N];科技日报;2011年
5 记者 毛文波;新型抗体可阻止多种艾滋病毒感染[N];科技日报;2004年
6 樊凤辉;新型抗体有望同时治疗两种疾病[N];医药经济报;2004年
7 记者 刘海英;抗体会助长登革热病毒感染更多细胞[N];科技日报;2010年
8 ;日科学家合成新抗体能抑制癌细胞转移[N];新华每日电讯;2004年
9 张天华;“抗体工厂”建在动物身上[N];中国医药报;2003年
10 武汉同济医院 主任技师 金慰鄂;何为抗体[N];家庭医生报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978