收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

应用线粒体序列对几种海参的初步鉴定及其在海参深加工产品上的应用

梁君妮  
【摘要】: 海参在分类上属于棘皮动物门中现存的六个纲之一的海参纲。海参纲根据海参的形态特征如:触手的形状、管足和呼吸树的有无分为6个目。而在科的水平上,其分类的主要依据是埋没于外皮之下的微小的石灰质骨片,其中海参咽部的钙质骨板(石灰环)的形态在海参分类上很重要。在种的水平上,其形态上的差别较小,对海参进行种的水平上的区分没有非常精确有效的方法。对于已被加工过的海参产品则更缺乏科学的鉴定方法,需要寻找一种简便准确的方法对加工后的海参进行鉴定。 采用聚合酶链式反应(PCR)对日本刺参、大连参、日本关西参、北海道刺参、俄罗斯红参、乌枣参、红海参、白肛海地瓜、红腹海参、小梅花参、黑海参的线粒体COⅠ序列进行了扩增,电泳检测在690bp左右得到了清晰的扩增条带,PCR产物纯化后与T载体连接,进行克隆、测序,分别得到了691-692bp之间的碱基序列,这7个种类海参的COI片段的碱基组成差别都不大,GC含量分布在40.0%-44.6%之间。用MEGA软件检测到,以日本刺参为参照数据,白肛海地瓜、黑海参、红腹海参、红海参、乌枣参、小梅花参变异位点比较多,其中小梅花参变异位点最多,有124个变异位点。而日本刺参、北海道刺参、大连参、俄罗斯红参和关西参变异位点很少,在692bp中只有18个变异位点;白肛海地瓜、黑海参、红腹海参、小梅花参与其他海参的遗传距离都较大,分别约为0.196-0.212、0.197-0.225、0.196-0.243、0.179-0.213,红海参约0.095-0.229,其他海参间仅为0.003-0.012之间;通过计算不同个体间的遗传距离构建NJ树和ME树,在NJ树和ME树中,都可以看到两个分支:俄罗斯红参、日本刺参、关西参、北海道刺参、大连参、乌枣参和红海参、白肛海地瓜为一支,其他的海参为一支。 采用聚合酶链式反应(PCR)对日本刺参、大连参、日本关西参、菲律宾刺参、俄罗斯红参、乌枣参、红海参、白肛海地瓜、蛇海参、北极参、靴参的线粒体16Sr RNA序列进行了扩增,电泳检测在330bp左右得到了清晰的扩增条带,PCR产物纯化后与T载体连接,进行克隆、测序,7个种类海参的16Sr RNA片段的碱基组成差别不大,长度分布在330-334bp,只有北极参和蛇海参分别是320bp和310bp。GC含量分布在39.4%-48.1%之间,白肛海地瓜、蛇海参、北极参、菲律宾参变异位点比较多,而日本刺参、大连参、俄罗斯红参和关西参、乌枣参和靴参变异位点很少,且变异位点基本一致,关西参的变异位点相对较多,其中俄罗斯红参只有一个变异位点,大连参有四个变异位点;白肛海地瓜、北极参、蛇海参、菲律宾参与其他海参的遗传距离都较大,分别约为0.150-0.291、0.140-0.282、0.140-0.277、0.194-0.291,大连参,日本刺参,关西参和俄罗斯红参遗传距离很小;在NJ树和ME树中,都可以看到两个分支:俄罗斯红参、日本刺参、关西参、大连参、乌枣参、靴参和红海参、白肛海地瓜为一支,其他的海参为一支。 通过对COⅠ和16Sr RNA片段的分析,我们发现,COⅠ序列比16Sr RNA具有更好的特异性,因此选择COⅠ序列对海参深加工产品进行鉴定。采用异丙醇与乙酸钠沉淀的改良方法从海参营养液中提取海参的DNA,通过COⅠ引物进行PCR扩增,扩增产物纯化后与T载体进行连接,通过克隆、测序,与已测定的海参序列及Blast进行比对,确认其中所含海参为青岛刺参。 干海参及海参产品中COⅠ和16Sr RNA片段的成功扩增,再次表明了两种引物在棘皮类动物中的良好通用性,本实验对海参种类进行准确鉴定,有助于对海参种类鉴定、遗传变异及系统演化的进一步研究,对规范海参市场也有重要意义。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 吴茹怡;曾里;曾凡骏;;复合氨基酸螯合物鉴定方法的研究[J];食品科技;2006年03期
2 赵振玲;王成忠;孙春禄;;发酵香肠中葡萄球菌快速“两步一补”鉴定[J];食品科技;2007年09期
3 李艳亮;金邦荃;诸永志;;低温肉制品中腐败菌的分离鉴定[J];内蒙古农业科技;2009年03期
4 吴拥军;王嘉福;;应用16S rDNA鉴定食品中的双歧杆菌[J];食品科学;2009年18期
5 黄杰;余孔捷;杨方;陈祥明;;五种常用硬脂酸盐食品添加剂的鉴定[J];食品科学;2010年02期
6 ;机动小苗带土插秧机的试验鉴定方法[J];粮油加工与食品机械;1973年07期
7 朱胜斌;超期饮料卫生学鉴定方法的探讨[J];食品科学;1991年03期
8 田艳玲;孙妍;陈婧;索娅;;乳与乳制品中动物水解蛋白L-羟脯氨酸测定法[J];中国乳品工业;2009年06期
9 庞会利;谈重芳;蔡义民;秦广雍;;乳酸菌分类鉴定方法的研究进展[J];中国酿造;2009年06期
10 吴新霞;任贤斌;王文辉;;采石场周边民房爆破振动破坏范围的鉴定方法[J];爆破;2009年04期
11 李青青;陈启和;何国庆;朱东升;穆琳;叶雪飞;;我国传统食品中乳酸菌资源的开发[J];食品科学;2009年23期
12 张京;陈存社;张颖;呼德;任雅琳;;产共轭亚油酸乳酸菌的选育和鉴定[J];北京工商大学学报(自然科学版);2010年05期
13 阮鸿兴;;几个常见元素的简易鉴定方法[J];云南冶金;1993年11期
14 柳越!化学教研室,王玉华!化学教研室;碘离子鉴定方法的改进[J];锦州医学院学报;2000年03期
15 刘向平;吴彩娥;寇晓虹;;水果芳香物质的研究进展[J];食品工业科技;2009年07期
16 范春丽;程佑法;李建军;王岳;山广祺;丁秀云;;一种新方法处理软玉的鉴定特征[J];宝石和宝石学杂志;2010年02期
17 陈洪;王旭东;;有机食品利弊及安全性分析[J];北京工商大学学报(自然科学版);2010年05期
18 张京;陈存社;赵丽丽;武香玉;王鹏霄;;一株乳酸菌的鉴定及其在酸豆乳加工中的应用[J];中国酿造;2010年11期
19 魏国华;许新德;缪飞;胡旭芳;;黑色素的合成、鉴定及应用现状[J];中国食品添加剂;2011年03期
20 吴贻安;;锂辉石相变和鉴定方法简介[J];新疆有色金属;1982年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王广策;曾呈奎;;藻菌纲Achlya bisexualis两种不同的丙酮酸激酶基因(pyk1和pyk2)的发现以及全序列测定[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
2 郝睿;王恩多;;人类线粒体tRNA~(Leu)(CUN)中存在T-茎的滑动现象[A];第四届全国RNA进展研讨会论文集[C];2005年
3 王跃明;游雪甫;蒋建东;;以线粒体凋亡途径为靶点的新型抗肿瘤药物[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年
4 杨景华;张明方;;线粒体定位表达orf220基因介导的线粒体反向调控细胞质雄性不育发生的机制[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
5 严庆丰;;核修饰基因MTO2调控线粒体DNA PR454突变表型表达研究[A];中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编(2004-2008)[C];2008年
6 陈桃香;朱莉萍;陈凤容;罗友根;王迪浔;胡清华;;线粒体源性的过氧化氢在组胺诱导的大鼠气道平滑肌细胞胞浆钙信号中的作用[A];湖北省暨武汉市病理生理学会第十四届学术年会论文汇编[C];2008年
7 吴云霞;邢达;;由光动力学引发的线粒体所介导的细胞凋亡[A];第十次中国生物物理学术大会论文摘要集[C];2006年
8 傅宝华;吕玉民;;线粒体DNA突变及应用在辐射生物剂量估算中的可行性探讨(摘要)[A];21世纪初辐射防护论坛第五次会议论文集[C];2006年
9 易平;汪莉;孙清萍;朱英国;;红莲型细胞质雄性不育线粒体相关嵌合基因的发现[A];2007中国科协年会专题论坛“红莲型杂交水稻学术专题研讨会”论文汇编[C];2007年
10 程剑;胡宝庆;文春根;;利用线粒体COI基因序列探讨蚌螨的系统发育[A];第五届广东、湖南、江西、湖北四省动物学学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 叶中德;RFP13诱导细胞凋亡的调控[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
2 康伟民;蛛网膜下腔出血急性期脑损伤和亚低温保护作用[D];天津医科大学;2006年
3 薛宏斌;运动训练预防小鼠帕金森病的神经生物学机理研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
4 臧莹安;线粒体自由基在快大型黄羽肉鸡PHS防控中的应用[D];南京农业大学;2006年
5 贾利强;水稻侧根发育基因OsSLR1的克隆和功能研究[D];浙江大学;2008年
6 郑杰;海参自溶过程中生化变化及抗氧化活性寡肽的研究[D];江苏大学;2012年
7 董秀萍;海参、扇贝和牡蛎的加工特性及其抗氧化活性肽的研究[D];江苏大学;2010年
8 徐冬冬;褐牙鲆和夏牙鲆杂交的遗传学研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2009年
9 常耀光;海参岩藻聚糖硫酸酯及其酶解产物的制备、结构与活性研究[D];中国海洋大学;2010年
10 周俊亮;脾主运化与细胞线粒体细胞色素氧化酶相关性理论的临床与实验研究[D];广州中医药大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 梁君妮;应用线粒体序列对几种海参的初步鉴定及其在海参深加工产品上的应用[D];中国海洋大学;2008年
2 单懿;应用线粒体序列对几种海参的初步鉴定和系统分类的研究[D];中国海洋大学;2005年
3 孟庆友;大鼠骨髓血管内皮祖细胞分离、培养、诱导分化及鉴定[D];苏州大学;2007年
4 蔡青;结球甘蓝苗期耐寒性指标鉴定与筛选[D];西南大学;2009年
5 徐贵财;水貂杯状病毒分离鉴定与生物学特性研究[D];中国农业科学院;2009年
6 张雪莉;二手车鉴定评估系统研究[D];长安大学;2005年
7 薛军侠;酿酒酵母的筛选鉴定及耐受性初步研究[D];西北农林科技大学;2007年
8 于力;上海地区番茄黄化曲叶病毒病研究[D];扬州大学;2008年
9 胡国玉;大豆耐低温出苗的遗传分析与分子标记[D];南京农业大学;2005年
10 阿里·古巴提;也门二手车鉴定评估方法研究[D];长安大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 吉林大学边疆考古研究中心 蔡大伟;家马的起源[N];中国文物报;2006年
2 奇云;“线粒体夏娃”何时走出“伊甸园”[N];大众科技报;2002年
3 李天舒;原发性高血压具有母系遗传特点[N];健康报;2007年
4 记者董映璧;细菌转变成线粒体的整个过程[N];科技日报;2002年
5 李学华;探究细胞“发电厂”的秘密[N];科技日报;2008年
6 ;中国科学院生物物理研究所科学家徐建兴教授探究呼吸链的奥秘独创线粒体超氧自由基代谢理论[N];大众科技报;2006年
7 曹丽君;英国批准培育“双母亲胚胎”[N];新华每日电讯;2005年
8 曹丽君;英批准培育“两母一父”胚胎[N];医药经济报;2005年
9 杨孝文;科学家研制基因注射剂“长生不老”不再是梦[N];江苏科技报;2007年
10 通讯员 石国本 黄余红;军民开创高科技防聋产品[N];科技日报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978