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盐酸小檗碱、右旋柠檬烯对人胃癌细胞株MGC-803的体外联合作用评价

王玲  
【摘要】: 目的:体外观察盐酸小檗碱(简称小檗碱)、右旋柠檬烯(简称柠檬烯)单独与联合对人胃癌细胞株MGC-803抗癌效应,并探讨可能的机制。 方法:小檗碱和柠檬烯单独与联合作用MGC-803细胞24至48h。采用MTT法检测药物对胃癌细胞生长的抑制作用,利用Chou和Talalay法计算两种药物的合用指数(CI)以及药物减少指数(DRI);流式细胞术和激光共聚焦显微镜用于检测其对细胞周期的分布、凋亡率、胞内活性氧自由基的生成、线粒体膜电位,以及Bcl-2、Caspase-3表达等的影响。 结果: 1.小檗碱与柠檬烯对MGC-803细胞的生长均有显著的抑制作用,并且呈剂量—效应关系。两药以48 h作用的中效剂量之比即1:4进行联合,当合用剂量为0.1~1 mM作用24 h以及合用剂量为0.04~0.1 mM作用48 h时,CI<1,小檗碱的DRI为1.8~3.8,柠檬烯的DRI为2.1~5.4,药物联合具有协同作用。 2.小檗碱使MGC-803细胞阻滞于G_0/G_1期,柠檬烯单用与联合则导致细胞周期阻滞于G_0/G_1期或(和)G_2/M期。联合药物作用36 h和48 h的细胞凋亡率分别达到26%和29%,相同时间两种药物单独使用时的凋亡率相比差异明显(p<0.05),作用24 h时与柠檬烯单独作用相比差异并不显著。 3.小檗碱与柠檬烯单独或联合均能刺激MGC-803细胞内活性氧ROS的生成,线粒体膜电位ΔΨm降低,下调Bcl-2的表达,上调Caspase-3的表达,且药物联合与单独用药时相比对MGC-803细胞作用更加显著。 结论: 1.小檗碱与柠檬烯单独或联合对MGC-803细胞均有抑制作用。在一定剂量范围内,两药合用具有协同作用。 2.小檗碱与柠檬烯联合对抗MGC-803细胞时,柠檬烯也许对细胞周期的影响起主要作用。两药的联合能够诱导细胞凋亡,但需要经过一定时间的作用才能显著提高细胞凋亡率。 3.两药的联用可能通过刺激ROS的生成,使线粒体功能损伤以及调控凋亡蛋白的表达来诱导凋亡以达到抑制肿瘤生长的效果。


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