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山东省猪繁殖与呼吸综合征、猪流感流行病学调查

王艳艳  
【摘要】: 近年来,我国各地猪场不断发生以呼吸道症状为主要表现的疾病,给养猪业造成了严重的损失,这些呼吸道疾病包括蓝耳病、猪气喘病、猪圆环病毒、猪流感等,有时为两种或两种以上的混合感染。为了明确猪流感和蓝耳病在引起猪呼吸道疾病中所起的作用,我们在山东省境内对猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒进行了流行病学和血清学调查。根据GeneBank中猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)GP5、GP6基因序列和猪流感病毒(SIV)的M基因序列,设计了扩增PRRSV-GP5、GP6基因和SIV-M基因的特异性引物,对山东省部分地市送检的可疑病料进行了RT-PCR检测,同时收集了79份健康猪血清进行ELISA和HI抗体检测,以期对山东省猪繁殖与呼吸综合征和猪流感的防治工作提供参考资料。 结果表明:通过RT-PCR扩增和序列分析,建立了PRRSV-ORF5,PRRSV-ORF6基因的RT-PCR诊断方法,利用该方法证实我们采集的可疑病料PRRSV阳性率为45.4%。通过RT-PCR方法和序列分析,建立了猪流感病毒SIV-M基因的RT-PCR诊断方法,利用该方法证实我们采集的猪流感可疑病料SIV阳性率为0%。血清学试验结果:PRRSV抗体阳性率为37.9%,SIV抗体阳性率为11.4%。 本实验对山东省扩增的PRRSV(DP株)-GP5,PRRSV-GP6基因序列进行了进化树分析,结果表明该地方株GP5基因与WXA(武汉)和SDWF2(山东)最为接近, GP6基因序列与GZZB(贵州)最为接近。 对天津地区分离的两株猪流感病毒M基因进行序列分析,发现两株病毒与我国香港(HongKong1994)和广东(guangdong2002)H1N1亚型猪流感病毒属同一分支。 本实验还对天津地区2005-2006年分离的两株猪流感病毒(TJ2、TJ4)进行了NS基因克隆和DNA序列测定,利用DNA-STAR软件进行序列分析,并和GenBank中的禽、和猪的核苷酸同源性分析和氨基酸形成的进化树进行分析,结果显示:TJ2、TJ4核苷酸序列与参考毒株间的同源性在85.8%-99.7%之间,NS基因与参考毒株之间的核苷酸序列同源性在80.7%-99.2%之间。NS基因的系统发育树显示:TJ2、TJ4株与我国香港(HongKong1994)、上海(shanghai2005)和广东(guangdong2002)H1N1亚型猪流感病毒属同一分支。


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