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金针菇SF-07菌株多糖的提取、结构与抗氧化活性分析

马钊  
【摘要】:金针菇(Flammulina velutipes(Fr.)Singer),又名金钱菌,属真菌门(Eumycophyta),担子菌亚门(Basidiomycotina),层菌纲(Hymenomycetes),伞菌目(Agaricales),口磨科(Tricholomataceae),小火焰菌属(Flammulina)或金钱菌属(Collybia)。金针菇口味鲜美,营养丰富,富含多种生物活性物质,如多糖、维生素、蛋白质、多元酚、朴菇素、膳食纤维等。金针菇子实体多糖具有良好的免疫调节、抗肿瘤、抗氧化及其它生理活性,但金针菇胞内多糖(Intracellular Polysaccharides,IPS)和胞外多糖(Exopolysaccharides,EPS)的研究较少。应用Plackett-Burman(PB)和Response Surface Methodology(RSM)方法优化金针菇SF-07菌株的IPS和EPS的提取条件;对IPS和EPS进行酶水解和酸水解,并进行分离纯化;测定了各种多糖组分的单糖组成、分子量、键型和抗氧化活性。(1)金针菇多糖的提取优化PB优化试验筛选出三个主要影响因素,进一步进行响应面试验,在最优条件下,IPS和EPS的理论提取率分别为5.74%和2.78mg/m L,而验证提取率分别为5.88%和2.82mg/m L,说明试验模型拟合,可以用于试验结果分析。(2)金针菇多糖的酶解和水解IPS和EPS经酶水解后分别得到酶解胞内多糖(enzymatic hydrolysis intracellular polysaccharides,EIPS)和酶解胞外多糖(enzymatic hydrolysis exopolysaccharides,EEPS)。IPS和EPS经酸水解后分别得到酸解胞内多糖(acidic hydrolysis intracellular polysaccharides,AIPS)和酸解胞外多糖(acidic hydrolysis exopolysaccharides,AEPS)。(3)金针菇多糖的分离纯化通过DEAE-52纤维素柱的分离,IPS得组分IPS-1和IPS-2;EIPS得组分EIPS-1和EIPS-2;AIPS得组分AIPS-1;EPS得组分EPS-1和EPS-2;EEPS得组分EEPS-1和EEPS-2;AEPS得组分AEPS-1。(4)金针菇多糖的分子量高效液相色谱结果显示,IPS和EPS的数均分子量分别为5.77×104Da和4.58×103Da,其它分子量参数IPS大于EPS。(5)金针菇多糖的单糖组成气相色谱测定结果显示,金针菇多糖的单糖包括鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,各组分的单糖组成和含量存在差异。(6)金针菇多糖的键型通过红外光谱扫描结果显示,IPS-2、EPS-1和EPS-2均为呋喃型多糖,IPS-1为吡喃型多糖。(7)金针菇多糖的体外抗氧化活性结果表明IPS及其产物拥有较强的还原力和对羟基自由基、超氧自由基、DPPH的清除能力,EIPS-2表现出较强的抗氧化活性;同样EPS及其产物的抗氧化试验表明,EEPS-2具有较强的体外抗氧化活性。基于抗氧化试验和单糖组分结果分析,推断金针菇的胞内和胞外多糖的抗氧化活性可能受鼠李糖的含量影响。(8)金针菇多糖的体内抗氧化活性结果表明,IPS和EPS均具有较强的体内抗氧化活性,主要表现在能显著降低小鼠体内MDA含量,明显提高小鼠组织及血清中GSH-Px活性、SOD活性、CAT活性和T-AOC水平。


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1 马钊;金针菇SF-07菌株多糖的提取、结构与抗氧化活性分析[D];山东农业大学;2015年
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