收藏本站
收藏 | 论文排版

生姜姜黄素纯化、脂质体制备及对小鼠溃疡性结肠炎治疗的研究

蔡婧婧  
【摘要】:生姜姜黄素是从生姜中提取的一种天然活性成分,具有消炎杀菌、抗氧化、抗癌等多方面药理作用,但是姜黄素对光照,温度,酸碱等因素较为敏感,这就导致了其在消化吸收过程中极其不稳定,生物利用度低等缺点。脂质体可提高食品成分在体内的生物利用度,促进药物或食品功能成分的吸收和利用。制备姜黄素脂质体提高其稳定性并将其应用到在溃疡性结肠炎(UC)的治疗中,扩宽了姜黄素在药食领域的应用。本课题以优质云南小黄姜为原料,确定最佳姜黄素提取工艺,姜黄素的分离纯化工艺,并测得其三个单体的纯度。通过制备姜黄素脂质体,探究了姜黄素对小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用。主要结论如下:(1)以总姜黄素得率为指标,采用乙醇法、微波辅助有机溶剂提取法、超声辅助有机溶剂提取法、酶法、水杨酸钠法五种方法提取生姜中总姜黄素,最终确定超声辅助有机溶剂提取法为本试验最佳提取方法。通过单因素、正交试验优化了生姜中总姜黄素的提取工艺:料液比1:40(g/mL),乙醇体积分数90%,温度50℃,超声时间30 min。该条件下测得生姜中总姜黄素得率为379.35μg/g。(2)将超声辅助有机溶剂提取法提取的总姜黄素依次经絮凝法除杂、大孔树脂吸附法纯化,确定了较佳的纯化工艺:絮凝法除杂的最佳絮凝剂为壳聚糖,絮凝剂添加量3 mL/100 mL,温度30℃,时间2 h,该条件下5 g生姜粉中总姜黄素的保留率为97.35%,除杂量为10.65 mg/100 mL;大孔树脂吸附纯化法筛选出最佳纯化树脂为DM 301树脂,动态吸附条件为最佳上样浓度0.05 mg/mL,最佳洗脱剂为100%乙醇,最佳洗脱流速为500 r/min。(3)利用硅胶柱层析对DM 301树脂纯化后的总姜黄素进行分离纯化,梯度洗脱CHCL3:CH3OH:HCOOH=99:0.6:0.4,97:1.5:0.5,75:24.5:0.5后,得到三个组分。经HPLC分析得到总姜黄素中三个单体的占比为姜黄素:去甲氧基姜黄素:双去甲氧基姜黄素=52.11:43.04:4.85。经峰面积归一法测得姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素的纯度分别为73.8%、70.8%、73.2%。(4)以包封率、粒径和PDI值为指标,比较了薄膜分散发、乙醇注入法及逆向蒸发法制备姜黄素脂质体,最终选用乙醇注入法为最佳脂质体制备方法,通过单因素、正交试验优化脂质体制备工艺为膜材比1:3,pH 6.4,姜黄素添加量0.4 g,PBS浓度10mmol/L,PBS添加量10 mL,该条件下脂质体包封率为96.37%,平均粒径为167.3 nm,PDI%为0.087,Zeta电位为-34.1 mV,TEM显示脂质体为分布均匀,外观圆整的球形小囊泡,姜黄素脂质体制备成功。(5)建立体外释放模型,姜黄素脂质体在胃液中释放率为48%,在此后肠道的释放率累积可达85%。对比姜黄素溶液和姜黄素脂质体在肠胃道模拟消化液中残留量的差异,姜黄素脂质体可将SGF中姜黄素残留量由25%提高到79%以上,将SIF中姜黄素残留量由26%提高到73%以上。(6)采用DSS诱导法建立溃疡性结肠炎小鼠模型,探究姜黄素脂质体对溃疡性结肠炎的治疗作用。姜黄素脂质体可以显著改善溃疡性结肠炎模型小鼠脓血便症状,有效降低小鼠DAI值,缓解小鼠结肠缩短、血便、水肿、溃疡等炎症症状,显著性降低小鼠结肠MPO活性,同时减少MDA、TNF-α、IL-6的含量。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前19条
1 李吉来,于留荣;双波长薄层扫描法测定姜黄中总姜黄素类含量[J];湖南中医学院学报;1996年03期
2 陈婧;刘彩霞;朱晓薇;;总姜黄素在不同介质中的稳定性考察[J];中草药;2006年10期
3 刘红星;陈福北;黄初升;张利敏;潘珊;朱方君;;紫外分光光度法在姜黄素类化合物提取中的应用[J];广西师范学院学报(自然科学版);2008年03期
4 黄燕芬,洪行球;分光光度法测定总姜黄素的含量及方法学考察[J];浙江中医学院学报;1999年06期
5 李敏;张娜;林琪宇;俸世洪;;黄丝郁金的质量标准研究[J];成都中医药大学学报;2008年01期
6 胡伟;李慎新;谯康全;;姜黄中姜黄素的提取研究[J];化学研究与应用;2012年02期
7 高天慧;陈雯清;陈诗韵;廖婉;傅超美;;醋制蓬莪术中总姜黄素回流提取工艺的优化[J];中成药;2019年05期
8 韩光呈;;脂质体制备方法的研究进展[J];黑龙江中医药;2007年01期
9 赵海霞,郭兴奎,孔德亮,田景振;脂质体制备技术[J];山东中医杂志;2000年07期
10 李隆云;张艳;;栽培措施对姜黄产量和品质的影响[J];重庆中草药研究;1999年01期
11 薛红;;中药脂质体制备的研究进展[J];中国医药指南;2011年30期
12 牛生洋;郝峰鸽;许秋亚;;姜黄素的提取及应用研究进展[J];河南科技学院学报(自然科学版);2008年04期
13 叶玉兰,杨会全,顾月翠;姜黄、郁金挥发油及总姜黄素的动态测定[J];中药材;1989年10期
14 单敏;李锋武;;总姜黄素脂质体的包封率和体外释药测定[J];药物分析杂志;2007年10期
15 汪树玉;杜鸣;张晓凯;;磷脂脂质体制备方法比较以及药物—脂质体微结构观察[J];山东师大学报(自然科学版);1991年04期
16 陈荣义,张新申,谢君;茶多酚脂质体制备的研究[J];中草药;2005年06期
17 王文节;唐小牛;杨江华;;脂质体制备方法及相关性质的研究概况[J];现代医药卫生;2011年05期
18 张祺照;;脂质体制备方法研究概况[J];亚太传统医药;2013年12期
19 刘晓谦;王锦玉;仝燕;王智民;;脂质体制备技术及其研究进展[J];中国药学杂志;2011年14期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 朱晓薇;刘彩霞;国大亮;陈婧;;总姜黄素自微乳大鼠在体肠吸收研究[A];2009全国中药创新与研究论坛学术论文集[C];2009年
2 苏文雅;王汉杰;王生;康世胤;常津;;靶向缓释长循环型高分子脂质体的制备[A];天津市生物医学工程学会第三十一届学术年会论文集[C];2011年
3 周佳骏;李力力;;核电站废物中常见核素的分析方法概述[A];中国核科学技术进展报告(第六卷)——中国核学会2019年学术年会论文集第5册(核材料分卷、锕系物理与化学分卷、同位素分卷、核化学与放射化学分卷)[C];2019年
4 梁珊;李小凤;廖文镇;汪勇;;功能性低聚糖分离纯化研究进展[A];“健康与安全”学术研讨会暨2015年广东省食品学会年会论文集[C];2015年
5 刘宝全;石太德;王剑锋;齐小辉;赵小菁;范圣第;;脂质体对人工信号的识别与响应[A];第六届全国化学生物学学术会议论文摘要集[C];2009年
6 程冀;季宇彬;王向涛;;脂质体载药方法的研究进展[A];中药饮片质量分析与中药鉴别技术交流研讨会论文集[C];2009年
7 汤连升;贾庆文;薛云;徐孙环;;脂质体类药物非临床评价注意事项[A];2013年(第三届)中国药物毒理学年会暨药物非临床安全性评价研究论坛论文摘要[C];2013年
8 刘树森;;脂质体技术的医学应用及载药脂质体工业化生产问题[A];第七届全国生物膜学术讨论会论文摘要汇编[C];1999年
9 魏荣卿;刘晓宁;;单分散聚合物介质在生物药物分离纯化中的应用[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年
10 汪燕;;脂质体的研究进展[A];第六次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会论文汇编[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张维农;天然磷脂的置换色谱分离纯化及其脂质体色谱研究[D];武汉大学;2004年
2 严晓娟;多功能纳米聚联乙炔脂质体的制备、结构、性质及功能研究[D];华东理工大学;2014年
3 孟凡旭;辐射敏感性载药脂质体的制备及其抗肿瘤作用研究[D];吉林大学;2012年
4 杨斌;胆固醇衍生物脂质体作为药物载体的研究[D];上海交通大学;2011年
5 包艳洁;用于肝纤维化治疗的siRNA脂质体递送系统的建立及聚乙二醇在肝靶向的siRNA脂质体递送系统中的影响[D];华东师范大学;2013年
6 吴燕;盐酸表阿霉素长循环热敏脂质体与复方脂质体的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
7 刘颖;长循环靶向脂质体的制备及含药脂质体抗肿瘤药效学研究[D];武汉大学;2011年
8 索绪斌;体温敏感吲达帕胺缓释脂质体凝胶剂的研究[D];沈阳药科大学;2005年
9 唐海玲;多肽修饰的脂质体靶向肿瘤输送过程的研究[D];上海交通大学;2014年
10 李文杰;莪术醇肝靶向脂质体的制备及其抗肿瘤研究[D];广州中医药大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 蔡婧婧;生姜姜黄素纯化、脂质体制备及对小鼠溃疡性结肠炎治疗的研究[D];山东农业大学;2020年
2 范婷;基于微芯片的均一化巨型脂质体制备条件优化研究[D];重庆大学;2019年
3 李暄;发酵麸皮多糖提取、分离纯化及生物活性研究[D];内蒙古农业大学;2019年
4 李凤;大黄等中药材有效成分的分离纯化研究[D];聊城大学;2019年
5 龚曼菲;外泌体分离纯化评估方法的建立[D];厦门大学;2018年
6 秦春青;鹿茸菇子实体多糖提取分离、结构鉴定及抗氧化研究[D];浙江工业大学;2019年
7 邓佳颖;银耳子实体多糖的分离纯化、结构鉴定、溶液构象和流变学特性研究[D];浙江工业大学;2018年
8 黄洁;4株乳杆菌胞壁蛋白酶的分离纯化及鉴定[D];陕西科技大学;2019年
9 郭月玲;大孔树脂法分离纯化雷莫拉宁的研究[D];河北科技大学;2015年
10 赵月钧;星虫爱氏海葵多糖分离纯化、结构鉴定及体外活性研究[D];浙江工业大学;2015年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张树藩 肖钢;脂质体与脂质体制备技术[N];中国医药报;2001年
2 王庆;生物分离纯化:难跑的最后一棒[N];工人日报;2013年
3 记者 耿挺;脂质体“运送”药物效率有望更高[N];上海科技报;2019年
4 国家知识产权局专利局医药生物发明审查部 许磊 楼杜鹃 王晶晶 张志聪;从专利角度看医药领域脂质体的发展[N];中国知识产权报;2011年
5 本报记者  王海洋;脂质体未来值得期待[N];医药经济报;2006年
6 ;脂质体能运载哪些药物?[N];中国医药报;2001年
7 ;脂质体是什么?[N];中国医药报;2001年
8 ;中国脂质体研发路漫漫[N];中国医药报;2001年
9 朱峰;周新腾;一种新型脂质体———热敏脂质体[N];中国医药报;2002年
10 白毅;沈阳药大脂质体研究成效突出[N];中国医药报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978