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不同免疫抑制病毒感染及其共感染对鸡细胞免疫反应的影响

郭慧君  
【摘要】: 免疫抑制性病毒是一类能够引起被感染动物个体免疫功能下降,造成对某些病原易感性增强的一类病毒。在鸡群中,网状内皮增生症病毒(REV)、马立克氏病病毒(MDV)、禽白血病病毒(ALV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、禽呼肠孤病病毒(ARV)等都是常见的免疫抑制性病毒,有关它们造成的免疫抑制在一些文献都已有所报道。最近的流行病学调查表明,这些病毒往往可在鸡群形成二重感染或三重感染、甚至四重感染,但这种多重感染对鸡群免疫功能的影响,国内外的研究还较少。机体的免疫功能包括体液免疫和细胞免疫,而淋巴细胞增殖反应是反映机体细胞免疫状态的一个重要指标。检测淋巴细胞增殖反应的方法最常用的是3H-TdR掺入法,该方法稳定、灵敏和客观。本研究对影响该方法的一些因素进行优化,并利用该方法对不同剂量REV感染、REV与ALV-J、REV与MDV、REV与ARV共感染鸡后对淋巴细胞增殖反应的影响进行了检测和比较研究。 一淋巴细胞增殖试验中相关参数的优化 用3H-TdR掺入法检测外周血、脾脏、胸腺、法氏囊中淋巴细胞的增殖反应,对影响该方法的淋巴细胞浓度、丝裂原浓度(ConA或LPS)、犊牛血清(FCS)浓度等参数条件进行优化。结果表明外周血淋巴细胞增殖试验的最佳条件为细胞浓度105~106/ml,ConA的浓度为5μg/ml,FCS浓度为10%;脾脏中淋巴细胞最佳条件细胞浓度为5×106/ml,ConA的浓度为5μg/ml,FCS浓度为10%;胸腺中淋巴细胞最佳条件为细胞浓度106/ml,ConA的浓度为40μg/ml,FCS浓度为10%;法氏囊中淋巴细胞最佳条件为细胞浓度5×106/ml,LPS的浓度为40μg/ml,FCS浓度为10%。这些条件的优化为检测免疫抑制病毒感染对鸡不同免疫组织淋巴细胞增殖的反应奠定基础。 二不同剂量REV对感染鸡细胞免疫反应的影响 用不同剂量的网状内皮增生症病毒(REV)感染商品代肉鸡(高剂量为104个TCID50REV/只;低剂量为2×103个TCID50REV/只)和SPF鸡(高剂量为104个TCID50REV/只;低剂量为103个TCID50REV/只)后,,检测血液中T淋巴细胞对ConA的反应和NK细胞、细胞毒T细胞(CTL)的细胞毒性作用以及NDV、AIV疫苗抗体生成变化等,并结合体重、胸腺、法氏囊等重量变化进行统计分析。结果表明感染REV各组肉鸡外周血淋巴细胞对ConA反应均有不同程度下降,高剂量感染即REV(104个TCID50REV/只)组下降显著(P0.05),而低剂量感染即REV(2×103个TCID50REV/只)组在49日龄也显著下降(P0.05)。SPF鸡感染试验中REV高剂量(104个TCID50REV/


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