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中药材白僵蚕主要生产条件的优化及其指纹图谱的研究

王更先  
【摘要】: 白僵蚕为蚕蛾科昆虫家蚕(Bombyx mori L.)4~5龄的幼虫感染(或人工接种)白僵菌(Beauveria)而致死的干燥体,早在《神农本草经》中就有记载。白僵蚕具有熄风止痉、活血通络、化痰散结等功效。 本研究对9株白僵菌(编号为B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7、B8、B9)的生物学特性进行了调查,探讨了白僵蚕人工生产条件的相关问题,分析了白僵蚕抗士的宁惊厥有效成分的提取方法和药效,并在此基础上利用红外光谱、紫外光谱和高效液相色谱等技术对白僵蚕的指纹图谱进行了研究。结果如下: 1对分离提纯的白僵菌进行了鉴定,确定其中有2株为卵孢白僵菌,7株为球孢白僵菌。对各菌株的生物学特性进行了调查。结果表明:在PDA培养基上,不同白僵菌的菌落形态存在较大差异。B1营养生长(3.91 mm/d)最快,产孢量(5.12×10~8个/cm~2)最高。B1在PDA培养基上培养后以1×10~7个/mL的孢子浓度感染5龄起蚕,6 d内致死率达到100%,和B2并列为最高。以营养生长量、产孢量和致病力等生物学指标进行综合比较筛选,B1为生产白僵蚕的最佳接种菌株。人工生产白僵蚕白僵菌的接种浓度应在1×107个/mL孢子以上。 2以有效成分草酸铵含量为指标探讨了白僵蚕僵死后时间、接种菌种、生产蚕品种、生产季节等对人工生产白僵蚕质量的影响。结果表明:白僵蚕僵死后,初期有效成分草酸铵含量随时间的延长而增加, 5d以后其含量基本维持在10%左右。不同菌株生产的白僵蚕,其体内草酸铵含量差别很大,B1菌株生产的白僵蚕草酸铵的含量最高,达10.33%。不同蚕品种生产的白僵蚕,体内草酸铵的含量在7.01%~8.11%之间。春天生产的白僵蚕体内草酸铵的含量最少,为8.01%,晚秋生产的白僵蚕体内草酸铵的含量最高,为10.11%。 3以对士的宁所致的小鼠惊厥的药效和对小鼠体重的影响为指标,采用水提、脂提和醇提对中药材白僵蚕有效成分进行提取。结果表明:白僵蚕65%的醇提液对小鼠的抗惊厥作用最好,其次为水提液,脂提液和对照无明显差别。灌胃白僵蚕不同提取液的小鼠体重都有不同程度的减少,其中灌胃水溶性提取液的小鼠的体重减少了11.8%,灌胃脂溶性和醇溶性提


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