收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

PCV2的分离鉴定及与PRRSV混合感染仔猪的血液病理学研究

娄忠子  
【摘要】: 猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)是近几年猪群中最重要的病原之一,在猪群中的感染率越来越高。本研究通过双抗体夹心ELISA方法和PCR方法对来自山东泰安的发病猪组织病料进行PCV2检测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株(PCV2sdt)。间接免疫荧光试验(IFA)检测可见病毒接种细胞中散在特异性荧光。提取培养病毒细胞全基因组DNA为模板,进行病毒基因组1号开放式阅读框(ORF1)、2号开放式阅读框(ORF2)和全基因组序列扩增,得到长度分别为945bp、702bp和1767bp左右的产物条带。将扩增产物克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pMD18-T-ORF1、pMD18-T-ORF2和pMD18-T-PCV2。重组质粒测序结果显示,所分离病毒的ORF1、ORF2和全基因组序列长度分别为945bp、702bp和1767bp。DNAStar生物学软件分析发现,PCV2分离毒株与No.DQ218420等各参考株的全基因组同源性介于95.4%~98.8%之间,ORF1的同源性介于97.0%~98.8%,ORF2的同源性略低,介于91.9%~98.4%之间。 选取40日龄左右早期断奶仔猪人工接种PRRSV和PCV2+PRRSV,借助仪器动态检测外周血生理指标、生化指标和淋巴细胞凋亡比率。结果表明,病毒感染对外周血各种指标都有一定的影响,WBC、GPT、GOT、LDH、GLO及TBIL感染组高于对照组;RBC、HGB、PLT及ALB感染组低于对照组;而MCV及TP无明显差异。PRRSV单独感染以及与PCV2在混合感染时的变化规律基本相同,但混合感染多项指标的变化幅度更大。外周血生理生化指标的变化对特定疾病诊断缺乏特异性,通过检测生理生化指标的变化可判定病变的严重程度及相应内脏器官的损伤。两病毒接种组外周血淋巴细胞的凋亡比率显著高于对照组,攻毒后2~3天达到高峰,此后逐渐下降并趋于恢复;混合感染组的凋亡比率又高于单独感染组。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 姚龙涛;当前国内外猪的重要疾病与控制[J];养猪;2004年04期
2 许立华,芦银华,王玲,陈溥言;猪圆环病毒检测方法的研究进展[J];宁夏大学学报(农业科学版);2004年01期
3 全艳平,赵玉军,崔尚金;断乳猪多系统衰竭综合征[J];中国兽医杂志;2004年04期
4 周继勇,陈庆新,叶菊秀,朱家新,郑肖娟,商绍彬,陈亭飞,母安雄,周恩民;猪圆环病毒2型感染的血清学分析[J];中国兽医学报;2004年01期
5 彭长凌,高崧,刘秀梵;间接免疫荧光试验(IIF)检测PRRSV方法的应用[J];上海畜牧兽医通讯;2005年01期
6 V F Ohlinger ,袁森泉;与2型猪环状病毒有关的4种疾病及控制[J];中国畜牧兽医;2003年05期
7 周俐兵,樊银珍;猪圆环病毒和PRRSV在断乳仔猪群中并发感染[J];畜牧与兽医;2003年09期
8 陈庆新,周继勇,叶菊秀,申会刚,陈婷飞;猪Ⅱ型圆环病毒浙江株的分离及全基因组结构分析[J];微生物学报;2004年04期
9 李玉峰,王先炜,姜平;上海地区出现猪繁殖与呼吸综合征和2型猪圆环病毒混合感染[J];中国兽医学报;2003年05期
10 邹品扬;猪圆环病毒的致病作用与防制措施[J];湖南畜牧兽医;2003年06期
11 李凯年;用位点杂交检测细胞培养物和组织中的PRRSV[J];畜牧兽医科技信息;1997年12期
12 蒋智勇,宋长绪,王贵平,高向阳,赵亚华;猪Ⅱ型圆环病毒ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J];动物医学进展;2004年05期
13 邱昌庆;美国中西部地区PRRSV分离株的基因差异[J];畜牧兽医科技信息;1999年03期
14 吕艳丽,杨汉春;断乳猪多系统衰弱综合症与Ⅱ型猪圆环病毒感染[J];当代畜禽养殖业;2001年12期
15 余业东,梁红虎,孙彦伟,林琳,罗满林,刘镇明,戚一达;用套式PCR方法对几种猪用冻干疫苗的PCV2检测[J];中国预防兽医学报;2004年05期
16 邱昌庆;用PRRSV分离株制备抗原与抗血清反应[J];畜牧兽医科技信息;1998年02期
17 张婉华,叶向阳,祁贤,朱永军,陆鑫芳;PRRSV-S_A株在组织培养上增殖及某些生物学特性[J];上海畜牧兽医通讯;2002年05期
18 乐敏,陈焕春,邱德新,钱平;猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展[J];上海畜牧兽医通讯;2004年03期
19 邱昌庆;检测PRRSV几种血清学方法比较[J];畜牧兽医科技信息;1997年22期
20 董海亮 ,J.Segales;Ⅱ型猪圆环病毒感染:断奶后多系统消耗性综合征和其它病症[J];国外畜牧学.猪与禽;2003年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王金凤;张岭岭;王娇;赵泽坤;孙继国;袁万哲;;高致病性PRRSV河北地方株的分离鉴定及部分Nsp2基因变异分析[A];中国畜牧兽医学会食品卫生学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2010年
2 韩庆安;朱振荣;张永辉;张子佳;刘红;尹克勇;杨刚;王玉清;;2004~2008年河北省规模猪场PRRSV感染情况调查[A];2010畜牧业与低碳经济科技论文集[C];2010年
3 夏平安;李艳伍;张红英;杨霞;崔保安;卢中华;;猪繁殖与呼吸综合征和猪流感复合RT-PCR诊断方法的建立及应用[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
4 蒋文明;姜平;李玉峰;吴胜昔;许家荣;;由减毒沙门氏菌介导的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)DNA疫苗的口服免疫应答[A];第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C];2005年
5 文明;毛君婷;史开志;周碧君;王开功;;贵州省猪繁殖与呼吸综合征分子流行病学调查[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(下册)[C];2010年
6 张冲;赵钦;孔宁;黄柏成;杜永坤;张昂克;孙鹏;刘洪亮;高继明;姬鹏超;王向鹏;周恩民;;新型PRRSV细胞受体阻断蛋白在猪体内阻断作用初探[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
7 韩先杰;王金宝;王宏伟;;猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)TCID_(50)的测定[A];猪的重要传染病防治研究新成果——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第五届理事会第二次全体会议暨防检疫专业委员会第7次学术交流会论文集[C];2002年
8 陈义平;刘秀梵;;PRRSV的免疫生物学特性[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
9 张祯涛;王金宝;周顺;李俊;宋玉才;刘长龙;徐文;倪娇;;检测猪繁殖与呼吸综合征病毒中和抗体的重组GP5-ELISA的研究[A];第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C];2005年
10 马玉萍;王向鹏;赵钦;王承宝;周恩民;;PRRSV细胞受体CD163的真核表达及鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 周庆雨;连云港及周边地区猪高热病病例中常见病毒混合感染情况的调查及PRRSV疫苗免疫、PCV2感染对猪瘟疫苗免疫的影响研究[D];扬州大学;2010年
2 蔡锦顺;PRRSV GP5与M蛋白重组犬2型腺病毒的构建及其免疫特性研究[D];吉林大学;2010年
3 邢凤;猪抗PRRSV相关基因的鉴定及功能分析[D];山东农业大学;2011年
4 沈国顺;PRRSV、PCV2基因工程疫苗的构建及实验免疫研究[D];吉林大学;2007年
5 周铁忠;辽宁省猪繁殖与呼吸综合征分子流行病学调查及免疫防制研究[D];吉林大学;2010年
6 张磊;感染PRRSV GD株强弱毒株Marc145细胞的差异表达基因筛选及调控研究[D];西北农林科技大学;2011年
7 韩松;PRRSV、PCV2二联基因工程疫苗的构建及实验免疫研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2009年
8 刘永宏;高致病性猪繁殖与呼吸综合征病理学研究及其病毒的序列分析[D];内蒙古农业大学;2010年
9 李广明;靶向PRRSV及其PAM细胞病毒受体基因shRNA重组腺病毒的构建与抑制PRRSV复制研究[D];南京农业大学;2009年
10 李红;CD163及其它蛋白在PRRSV感染细胞过程中的相互作用[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 荣福龙;高致病性PRRSV在仔猪体内动态分布和体外增殖特性的研究[D];东北农业大学;2010年
2 宫大庆;高致病性PRRSV HuN4株感染仔猪过程中淋巴结蛋白质组学研究[D];黑龙江八一农垦大学;2011年
3 王美君;临床健康猪群中PRRSV的分离与鉴定[D];山东农业大学;2010年
4 姚雪静;PRRSV安徽株的分离鉴定及感染仔猪病理学的研究[D];安徽农业大学;2010年
5 曹永芝;高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的气溶胶传播机制[D];山东农业大学;2010年
6 李珈莹;PRRSV GP4、GP5基因的克隆及原核表达[D];延边大学;2010年
7 张冲;野猪源PRRSV Shaanxi-2株分离鉴定、全基因测序及遗传进化分析[D];西北农林科技大学;2010年
8 赵泽坤;高致病性PRRSV的RT-PCR鉴别诊断方法的建立及应用[D];河北农业大学;2010年
9 廖立珊;PRRSV N基因真核表达、ELISA应用及单克隆抗体的制备[D];湖南农业大学;2010年
10 王娇;两株PRRSV结构蛋白基因变异分析及M基因的表达[D];河北农业大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 中牧;PRRSV活疫苗的使用[N];农民日报;2005年
2 农业部动物疫病诊断与流行病学中心主任 崔尚金博士;猪呼吸与繁殖综合征流行特点、危害状况及防制策略[N];中国畜牧兽医报;2005年
3 余木;PRDC和疫苗的效果[N];中国畜牧报;2005年
4 瑞普(保定)生物药业有限公司 李建丽;猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的特点及免疫机制[N];中国畜牧兽医报;2009年
5 北京华都种猪繁育有限责任公司 姚亮;现代养猪场的疾病控制方案[N];中国畜牧报;2004年
6 丁壮 万遂如;我国主要猪传染病防治研究进展[N];中国畜牧报;2002年
7 马利;猪繁殖与呼吸综合症的防治[N];中国畜牧水产报;2001年
8 王锡祯 王泽华 俞燕君 关同应;猪呼吸道疾病的现场诊断和防治[N];中国畜牧报;2002年
9 农业部动物疫病诊断与流行病学中心主任 崔尚金 博士;猪呼吸与繁殖综合征流行特点、危害状况及防制策略[N];中国畜牧兽医报;2005年
10 瑞普(天津)生物药业有限公司 李刚 谢雪松;控制商品子猪综合征有效办法初探[N];中国畜牧兽医报;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978