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赤藓糖醇高产菌株的选育及发酵条件的研究

叶娴  
【摘要】: 赤藓糖醇是一种食用安全的填充性甜味剂,味类似于蔗糖,具有热量低、稳定性高、甜味协调、无吸湿性、无致龋齿性、耐受性高等优点,可作为低热量功能性保健食品配料,应用前景十分广泛。本文从产赤藓糖醇菌株的筛选开始,对菌株的选育以及赤藓糖醇发酵工艺条件进行了系统的研究,主要研究内容如下: 1.由泰山养蜂场上采集的蜂蜜、花粉、蜂巢里采样、富集培养后进行平板涂布分离,然后分别进行摇瓶初筛及复筛,筛选出7株赤藓糖醇产量高于20g/L菌株。其中菌株K-23在含20%葡萄糖,1%酵母膏,0.1%尿素的发酵培养基中培养132h后赤藓糖醇的浓度达46.8g/L。 2.建立了一种简便、高效的薄层层析法检测发酵液中的赤藓糖醇,即以正丁醇:乙酸:水=4:1:5为展层剂,以高碘酸钠-联苯胺溶液为显色剂,通过标准样品的梯度定量点样,制作出一张标准薄层板,在试验中样品只需将薄层板层析结果与标准板对照,就可以对样品中的赤藓糖醇进行初步定性、定量分析。这样极大方便了选育菌株时高产赤藓糖醇菌株的检出。 3.以K-23作为出发菌株,对其进行紫外线和光复活交替诱变处理,得到一支性能稳定的高产赤藓糖醇突变株ERY237,传接十代赤藓糖醇产量保持在70g/L以上,表明该菌株是一支比较理想的、具有开发应用前景的赤藓糖醇发酵生产菌株。 4.通过单因素试验和正交试验对菌株ERY237的产赤藓糖醇培养基组分、发酵工艺条件进行了研究,确定了菌株ERY237发酵产赤藓糖醇的最佳培养基(g/L):葡萄糖300,玉米浆8,CuSO4·5H2O 0.5,MnSO4·4H2O 5;最佳培养条件:接种量9%,初始pH值6.0,温度32℃,装液量55mL/250mL,转速200r/min,在此条件下培养120h赤藓糖醇产量达91.7g/L。


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