中晚期宫颈癌动脉介入栓塞化疗前后病变组织中VEGF、Caspase-3的变化及意义

【摘要】：目的 1.探讨子宫动脉介入化疗栓塞术对中晚期宫颈癌治疗的近期临床疗效,进一步评价其在宫颈癌根治术前的临床应用价值; 2.检测子宫动脉介入栓塞化疗治疗前后宫颈癌病变组织中VEGF和Caspase-3表达的意义; 3.探讨VEGF、Caspase-3在宫颈癌病灶组织中表达的相关性及与宫颈癌发生、转归的关系。 材料和方法 1.病例资料选择符合以下条件的患者作为本研究对象:①经宫颈活组织病理检查结果为宫颈癌;②经资深副主任医师及以上的妇科肿瘤医师进行妇科检查,按照国际妇产科联盟(FIGO-2000)的分期标准诊断为Ⅱb期及Ⅲa期的宫颈癌患者;③于我院就诊前未接受任何规范化抗癌治疗的患者;④肝肾功能、血常规、心电图等检查无异常,无明显介入化疗禁忌证;⑤年龄70岁;⑥已签署动脉介入栓塞化疗同意书。 收集2002年1月至2010年10月在我院行PEF化疗方案,采用选择性双侧子宫动脉介入栓塞化疗术符合上述标准的中晚期宫颈癌患者25例,平均年龄43岁,按FIGO-2000临床分期,Ⅱa期5例,Ⅱb期15例,Ⅲa期5例,其中鳞癌18例,腺癌5例,腺鳞癌2例。根据患者对介入化疗的反应给予1～2个疗程的动脉介入栓塞化疗,具有手术指征者于末次化疗结束后3周左右行广泛子宫切除+盆腔淋巴结清扫手术。留取介入化疗前后宫颈癌组织蜡块标本,采用S-P免疫组织化学方法检测介入前宫颈癌病灶组织中VEGF与Caspase-3的表达情况。 2.观察方法 所有入选患者入院前后均由副主任及以上有经验医师行妇科检查,结合妇科B超和阴道镜检查,记录数据并以此判定肿瘤消退情况。采用WHO的实体瘤疗效标准评价标准:①完全缓解(CR):肉眼见局部肿块完全消失;②部分缓解(PR):肿瘤病灶最大直径及其最大垂直横径的乘积缩小50%以上;③无变化(SD):肿瘤病灶的两径乘积缩小不足50%,或增大不超过25%;④进展(PD):病灶增大25%以上或出现新病灶。其中完全缓解(CR)+部分缓解(PR)为有效组,无变化(SD)+进展(PD)无效组。 观察介入栓塞化疗后患者的阴道流血情况、疼痛情况、宫旁肿瘤浸润消退情况等。每周复查肝肾功能及血细胞分析以了解化疗的毒副反应。 3.免疫组化结果的判 VEGF与Caspase-3阳性判断标准均以癌细胞细胞质或细胞膜呈棕黄色颗粒沉着为准。判断标准采用Fromowitz阳性细胞半定量分级法:阳性细胞百分数:高倍镜(×400)下随机选取10个视野,每个视野计数100细胞,共计数1000个细胞。取平均值作为阳性细胞百分数,阳性细胞数﹤5%为阴性(-),5%～25%为弱阳性(+),26%～50%为阳性(++),﹥50%为强阳性(+++)。 4.统计方法 数据分析用SPSS16.0统计软件进行处理,定量资料数据以Χ±SD表示,两组间比较用行×列表的χ2检验,两变量间相关性用Spearman等级资料相关分析,以P0.05为明显著性差异。 结果 1.近期临床疗效分析的结果 25例患者中入院时18例存在不同情况的阴道流血、流液情况,其中6例因阴道大量流血急诊入院。入院后及时给予PEF方案(顺铂、表阿霉素、5-Fu)动脉介入化疗加明胶海绵碎粒栓塞子宫动脉,术后2小时阴道流血即明显减少,5天后大多数患者阴道流血情况明显改善。介入治疗后2周行妇科检查见宫旁及阴道壁浸润状况明显改善,改善率85%,宫旁明显变软,病灶活动度增加。介入治疗3周时25例患者中有5例完全缓解(20%),17例部分缓解(68%),3例病情无变化(12%),无1例病情进展;总缓解率91.38%。 介入栓塞化疗后3周对患者的临床分期按FIGO-2000进行重新判定,以评定是否可给予手术治疗。25例患者临床分期逆转者21例,逆转率84%,其中20例患者成功实施宫颈癌根治术,手术切除率80%,根据患者具体情况保留一侧或双侧卵巢。 术后病理检查中3例宫颈组织未见肿瘤细胞残留,宫旁无浸润,病理结果为:宫颈急慢性炎及坏死。未手术者2例放疗治疗,3例转院治疗。 2.免疫组化实验的结果 介入栓塞化疗前后宫颈癌组织中VEGF、Caspase-3的阳性表达率均有差异。介入化疗前宫颈癌组织中VEGF的阳性表达率为80%,以阳性和弱阳性表达为主(14/20),介入化疗后VEGF的阳性表达率为55%,以阴性和弱阳性为主(16/20)。VEGF的阳性表达率在动脉介入栓塞化疗前后行四格表资料的χ2检验,χ2=3.946,p0.05,两者之间差异有显著性,认为介入化疗后VEGF的表达明显降低。 化疗前Caspase-3的阳性表达率为35%(7/20),化疗后阳性表达率上升为70%(14/20);表达强度由化疗前(-)13例、(+)3例、(++)3例、(+++)1例,增加至化疗后(-)6例、(+)5例、(++)6例、(+++)3例。Caspase-3的阳性表达率在化疗前后行四格表资料的χ2检验,χ2=4.912,p0.05,差异有显著性,认为介入化疗后Caspase-3的表达升高。 介入栓塞化疗前后宫颈癌组织高、中、低分化组VEGF与Caspase-3阳性表达率统计分析无差异(p﹥0.05),认为VEGF、Caspase-3的表达与组织学分级无关。20例宫颈癌组织中VEGF与Caspase-3介入化疗前后阳性表达分别进行Spearman相关性分析,化疗前VEGF与Caspase-3的相关性系数r=-0.681, p=0.001,说明宫颈癌组织中VEGF与Caspase-3的表达负相关。介入化疗后VEGF与Caspase-3的相关性系数r=0.355,p=0.355,说明介入化疗后宫颈癌组织中VEGF与Caspase-3的表达呈低度相关。 结论 1.动脉介入栓塞化疗术可以缩小中晚期宫颈癌病灶体积,使宫旁间隙增大,降低临床分期,增加中晚期宫颈癌患者的手术机会。 2.动脉介入栓塞化疗后宫颈癌组织中VEGF蛋白表达下降,从血管生成方面进一步阐明VEGF在宫颈癌的发生及发展中起重要促进作用。 3.动脉介入栓塞化疗后宫颈癌组织中Caspase-3蛋白表达上升,说明介入化疗通过促进宫颈癌细胞凋亡从而抑制癌细胞的生长。 4.介入栓塞化疗前后宫颈肿瘤组织中VEGF、Caspase-3的表达情况可以在一定程度上预测肿瘤组织对动脉介入化疗的敏感性及疗效,这将有助于指导动脉介入栓塞化疗在临床上的应用。