ROCK2在大鼠脊髓损伤后的表达及法舒地尔的干预研究

【摘要】：第一部分 目的:观察脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后不同时间段ROCK2在损伤局部的表达,探索ROCK2在脊髓损伤局部的表达规律,为Rho激酶抑制剂治疗脊髓损伤提供理论指导。方法:清洁级健康雌性成年SD大鼠随机分为假手术组和SCI模型组,每组30只。假手术组(sham group):大鼠只行椎板切除术,不进行脊髓损伤;SCI模型组(SCI model group):选取大鼠脊髓T10节段为损伤节段,剪断脊髓的后3/4深度损伤。于术前及术后3d、1w、2w、4w、6w采用BBB运动功能评分法对大鼠进行后肢运动功能评价,大鼠于损伤后8h、3d、1w、2w、4w、6w评分结束后用免疫组化法检测ROCK2在大鼠脊髓损伤局部的表达水平。结果:假手术组大鼠术后双后肢活动正常,BBB评分21分;术后3d-1w内脊髓损伤模型组大鼠BBB评分均为0分,1w后BBB评分逐渐上升,至伤后4w可达9-10分左右,6w时评分无明显改变。SCI组大鼠双后肢BBB评分于术后各时间点均较假手术组明显降低。SCI组于损伤3d后ROCK2的表达开始增加,1w达到高峰,且持续高表达4w,4w后表达开始下降,6w时恢复至低水平表达。在损伤后3d-4w的各时间点SCI组ROCK2的表达均较假手术组明显增加,6w时ROCK2的表达与假手术组比较无显著性差异。结论:脊髓损伤后ROCK2可持续高表达4w,4w后ROCK2的表达恢复至假手术组水平,而运动功能不能再继续恢复。 第二部分 目的:研究Rho激酶抑制剂Fasudil对大鼠脊髓急性损伤后神经功能恢复的治疗作用。方法:用健康成年雌性SD大鼠40只建立脊髓损伤模型,造模成功后将大鼠随机分为Fasudil治疗组及模型对照组,每组20只。Fasudil治疗组于脊髓损伤后立即给予腹腔注射Fasudil(5mg/kg),每日注射1次,连续注射4周;对照组腹腔注射同等剂量生理盐水。术后1w、2w及4w运用BBB功能评分进行后肢运动功能评价;于损伤后4w应用免疫组化法检测ROCK2在脊髓损伤局部的表达。结果:与模型对照组比较, Fasudil治疗组大鼠BBB评分在术后1w、2w及4w的各时间点均明显增高,差异有统计学意义(P0.05);术后4w Fasudil治疗组损伤局部脊髓组织内ROCK2的表达明显减少,与对照组比较有统计学意义(P0.05)。结论:Rho激酶抑制剂Fasudil能够减少脊髓损伤局部ROCK2表达,改善大鼠的运动功能。