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中药复方血糖宁有效部位的研究

魏英勤  
【摘要】: 中药复方(又称方剂)是中医遣方用药的主要形式,中药复方化学的研究又是制约中药复方研究的“瓶颈”所在,弄清中药复方产生疗效的物质基础,对于新药的研制开发,中医理论方剂配伍内涵的科学阐明,对于生命科学的深层次认识,以及中医药现代化都具有重要意义。本文在中药复方研究的基础上,结合实践体会,认为有效部位是中药复方研究的核心问题,提出了“有效成分组是采用现代各种分离手段获得的能够保持原中药复方临床疗效的不可继续分割的分子集合体”的观点,并且认为有效部位的深入细致的研究,将为最终实现中医药理论从药味配伍向化学成分配伍的质的飞跃奠定基石。本课题选用主要由黄连、黄柏等药材组成的经临床验证疗效确切的中药复方血糖宁为研究对象,以降血糖效果为评价指标分离分析了血糖宁的有效部位。主要工作及成果如下: 建立了同时测定血糖宁复方原料药材、原方提取物中四种生物碱含量的RP-HPLC方法,并以四种生物碱、总碱和浸膏得率为指标采用正交设计优化了血糖宁的提取工艺。采用HPCE法比较了喷雾干燥法和烘干法对血糖宁原方提取物有效成分和性质的影响。 以大孔树脂洗脱液中生物碱的含量作指标,选择洗脱液乙醇浓度、洗脱液用量、洗脱液盐酸浓度三个因素,用L_9(3~4)正交表优化了黄连提取液的大孔树脂洗脱条件。并以洗脱液中生物碱的含量作指标,考察了上样体积、上样量、上样流速、清洗溶剂对于黄连提取液吸附效率的影响。分离了血糖宁的大孔树脂洗脱部位并进一步进行了分离纯化与含量测定。 通过控制剂量、禁食时间等因素,使制作的四氧嘧啶糖尿病小鼠模型造模成功率可达100%,死亡率为0,糖尿病小鼠30日之内稳定。通过药理实验确认了中药复方血糖宁的有效部位,进行了血糖宁部位Ⅲ_2的主要药效学实验的研究,考察了影响血糖测定的因素,并测定了血糖宁部位Ⅲ_2的LD_(50)。 进行了血糖宁的质量标准研究,采用TLC对方中主要组成药味及制剂进行了定性鉴别,利用TLCS和HPLC对方中主要组成药味及制剂中的生物碱进行了含量测定,并并考察了其初步稳定性。 建立了血糖宁原料药材黄连、部位Ⅲ和部位Ⅲ_2的HPCE指纹图谱,并将其用 于质量控制和评价。建立了血糖宁及其缺味药部位*的Bayes法识别模型,该模 型对血糖宁及其缺味药部位*正确识别率为100%。进行了药动学方面的初步研究, 建立了灌胃黄连煎剂的大鼠尿样中成分的eCE指纹图谱,发现黄连生物碱主要 以原型药物排出,与文献结论一致。 本文分离并明确了中药复方血糖宁的有效部位,并对其进行了含量测定、药 效、质量控制、指纹图谱等方面的研究,研究结果表明生物碱是中药复方血糖宁 降血糖作用的主要物质基础。实验结果将形成中药新药的有关资料,从而产生较 大的社会效益和可观的经济效益,同时也将为血糖宁有效成分组的全面揭示、为 中医用药组方机理和规律的深层次认识提供素材和实验依据。


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