兔骨髓基质细胞的培养及向成骨细胞分化的实验研究

【摘要】：目的：研究兔骨髓基质细胞在体外培养条件下的成骨能力及生物学特性，探讨简 便易行的成骨细胞体外培养方法，为组织工程选择理想的种子细胞来源。方法： 取 新西兰白兔骨髓液经离心后得骨髓单个核细胞，以1 × 106／ml的细胞浓度进行培养， 经传代培养，选择条件培养液培养(1640完全培养液中加入地塞米松10-8Smol／l，β- 甘油磷酸钠10mmol／l，VitC 50μg／ml)作为骨髓基质细胞增殖和成骨的调节因子， 通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜、碱磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)测定、 Ⅰ型胶原免疫组化染色和四环素荧光钙染色等手段对获得的细胞进行生物学特性研 究。结果：采用本法在体外培养的兔成骨细胞生长良好，生化指标稳定，表现出与典 型的成骨细胞相似的形态特征和生物学特性。结论：本实验方法取材方便，条件培养 液培养(1640完全培养液中加入地塞米松10-08mol／l，β-甘油磷酸钠10mmol／l，VitC 50μg／ml)可促进骨髓基质细胞的增殖，并保持骨髓基质细胞成骨的特性。所培养的 细胞具有成骨细胞的特性，可作为骨组织工程种子细胞培养的常规方法。