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中药猫爪草抗肿瘤有效部位的研究

王爱武  
【摘要】:目的:确定猫爪草抗肿瘤的有效部位、有效成分,研究其抗肿瘤机理。方法:采用系统溶剂提取法对猫爪草化学成分进行提取分离,采用MTT和SRB两种方法,选用人肺癌细胞株A-549、人白血病细胞株HL-60及人宫颈癌细胞株Hela三种瘤株,建立S_(180)及H_(22)两种荷瘤小鼠动物模型,对各部位进行多指标的体内外抗肿瘤药理作用研究。利用硅胶、大孔树脂、反相硅胶、葡聚糖凝胶(LH-20)等多种层析分离技术对有效部位进行分离纯化,利用GC-MS、EI-MS、~1HNMR、~(13)CNMR等多种现代分析鉴定技术对单体化合物进行鉴定。建立有效部位、有效成分的提取、分离工艺,并进行血清药化学、药代动力学及抗肿瘤机理的分子生物学研究。成果:进行了多模型多指标的体内外抗肿瘤药理作用的实验研究,确定了猫爪草抗肿瘤的有效部位、有效成分及其提取、分离纯化工艺。从乙酸乙酯部位鉴定了二十八烷酸(Ⅰ)、二十烷酸(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、十六烷酸(Ⅳ)、β-棕榈酸甘油酯(Ⅴ)、β-硬脂酸甘油酯(Ⅵ)、邻苯二甲酸正丁酯(Ⅶ)、3,4-二羟基-苯丙氨酸乙酯(Ⅷ)、5-羟甲基糠醛(Ⅸ)、5-羟甲基糠酸(Ⅹ)等10种化合物,从正丁醇部位鉴定了4-氧代-5-(-0-β-D-葡萄糖基)-戊酸-正丁基酯(Ⅺ)、(R)-3-[3-羟基-4-(-0-B-D-葡萄糖基)-苯基-]-2-羟基丙酸-正丁基酯(Ⅻ)和豆甾醇-3-0-葡萄糖苷(ⅩⅢ)等3种化合物。其中Ⅺ、Ⅻ为新化合物,Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ等七种化合物系首次从毛茛属植物中得到,ⅩⅢ为首次从猫爪草中得到。确定了多糖有效部位的分子量分布范围为小于1000的低聚糖,并证实具有明显的体内外诱生肿瘤坏死因子的作用,完成了有效成分十六烷酸血清药化学、药代动力学及抗肿瘤分子生物学机理的研究。结论:猫爪草抗肿瘤的有效部位包括乙酸乙酯、正丁醇及多糖等三个部位,抗肿瘤机理有所不同。分离鉴定了13种化合物,其中有两个为新化合物。活性多糖分子量分布范围小于1000。十六烷酸是其抗肿瘤的主要活性成分,可用CO_2超临界萃取技术提取。血清药化学、药代动力学及抗肿瘤分子生物学机理的研究资料为开发十六烷酸抗肿瘤新药提供了科学依据。


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