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钩藤总碱抗高血压血管重塑、抑制血管平滑肌细胞增殖的研究

岳桂华  
【摘要】: 目的:钩藤总碱抗高血压血管重塑、抑制血管平滑肌细胞增殖的作用及其机制。 方法:①在体实验观察钩藤提取物钩藤总碱对SHR尾动脉血压的影响,观察三级动脉血管光镜和体视学变化,检测SHR胸主动脉血管紧张素Ⅱ,胸主动脉平滑肌细胞内Ca~(2+)变化,以研究钩藤总碱的降压、改善血管重塑及可能的机制②建立培养以血管紧张素Ⅱ诱导增殖的VSMC模型。检测指标及方法:MTT反映细胞DNA合成水平,平滑肌细胞生长曲线观察钩藤总碱对细胞生长的抑制作用,流式细胞仪观察VSMC周期、培养细胞内钙的浓度、c-myc基因表达。 结果:钩藤总碱可以降低SHR尾动脉血压,与模型组相比有非常明显差异(P﹤0.01),模型组大鼠胸主动脉、肾动脉和肠系膜动脉的管壁内膜、中膜和外膜均存在不同程度的增厚现象;胸主动脉、肾动脉和肠系膜动脉中膜厚度/管腔直径的比值明显升高,与正常对照组相比存在非常显著的差异(P﹤0.01)。与模型组比较,钩藤总碱组大鼠胸主动脉、肾动脉和肠系膜动脉中膜厚度/管腔直径的比值均明显降低(P﹤0.05)。同时钩藤总碱降低了SHR血管AngⅡ及平滑肌细胞内Ca~(2+)含量,与模型组有显著差异及非常显著性差异(P﹤0.05、P﹤0.01)。离体培养VSMC AngⅡ诱导增殖组具有明显促进VSMC增殖作用;药物组在12h、24h均可抑制VSMC增殖,与模型组比较差异有显著性、非常显著性(P0.05、P﹤0.01)。各组进行了VSMC生长曲线的描记,经含药物的培养基干预后,细胞生长曲线下移,钩藤总碱组抑制作用较卡托普利组明显。细胞周期研究发现钩藤总碱组与诱导增殖组相比,G1期增高(P﹤0.05), S期明显降低(P﹤0.01),可见钩藤总碱可以阻断细胞由G0/G1期向DNA合成的S期转化,从而抑制培养VSMC增殖的作用。与AngⅡ诱导增殖组相比,钩藤总碱组VSMC Ca~(2+)表达水平显著降低(P0.01),与AngⅡ诱导增殖组相比,钩藤总碱组VSMCc-myc蛋白表达水平显著降低(P0.01),说明钩藤总碱抑制VSMC增殖的作用可能与降低细胞内钙水平及调控病理状态下c-myc基因过度表达有关。 结论:钩藤总碱具有降压和改善血管重塑作用,其降压机制与降低血管局局部AngⅡ和VSMC Ca~(2+)有关;改善血管重塑可能与降压和抑制VSMC增殖有关;抑制VSMC增殖的作用与其降低细胞内钙水平及调控病理状态下c-myc基因过度表达有关。


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