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天麻提取物(天麻素)抗惊厥及神经保护作用的研究

张涛  
【摘要】: 第一部分天麻素抗惊厥作用及对致痫小鼠行为影响的实验观察 目的本研究观察不同剂量天麻素与VPA比较对PTZ模型小鼠的抗惊厥作用,同时,通过水迷宫观察天麻素对致痫鼠学习和记忆能力的影响,评价天麻素在癫痫治疗中的药用价值。 方法50只健康成年雄性昆明SPF级小鼠,随机分为:对照组,PTZ组,VPA组,Gs组和Gb组。经水迷宫训练后分别于VPA和天麻素治疗前,治疗后,PTZ致痫后记录动物行程出错次数和逃避潜伏期;同时记录惊厥发作潜伏期、发作持续时间和发作强度。进行统计学分析。 结果药物治疗后VPA组逃避潜伏期显著延长(P0.05);致痫后PTZ组、VPA组逃避潜伏期和行程出错数与其他各组比较差异显著,而天麻素组与对照组比较差异无统计学意义。致痫后VPA组与PTZ组、Gs组、Gb组比较惊厥发作潜伏期显著延长,惊厥持续时间明显缩短(P0.05);与PTZ组比较Gb和Gs组惊厥持续时间显著缩短(P0.05)。各组惊厥强度(P=0.796)差异不显著。 结论天麻素在一定程度上能缩短惊厥发作持续时间,但抗惊厥作用弱于VPA。VPA显著降低小鼠的学习和记忆能力;天麻素能抑制由惊厥发作引起的学习和记忆能力的下降,具有一定程度的神经保护作用。 第二部分天麻素对戊四氮模型大鼠脑保护作用的实验研究目的应用天麻素对PTZ致痫大鼠治疗,观察大脑海马神经元、胶质细胞和血管内皮细胞的组织学改变,凋亡相关基因Caspase-3的表达,GFAP的表达,以及mmp-9的表达,探讨天麻素对神经元、星形胶质细胞和血管内皮的保护作用及可能的机制。方法健康成年雄性SPF级Wistar大鼠102只,随机分为对照组,PTZ组,VPA组,Gs组和Gb组。致痫后分别给予VPA、天麻素治疗,并分别于12h,48h,5d和7d后处死取材。进行HE染色,TUNEL、Caspase-3、GFAP和MMP-9免疫组化染色。观察海马CA1、CA3和齿状回门区组织学改变和分析比较各组、各时间点IOD值。结果致痫后海马HE染色,PTZ组CA1和CA3区神经元变性及坏死显著,齿,状回门区也有少量坏死神经元,并随时间的延长神经元丢失越严重;VPA组和天麻素组上述损害程度较轻。免疫组化结果显示PTZ组TUNEL、Caspase-3染色在CA1、CA3区、齿状回门区和血管有高表达,5d达高峰。与VPA组、Gs组和Gb组比较IOD有显著性差异。PTZ组GFAP和MMP-9在上述区域也有较高表达,5d~7d表达更显著,与VPA组、Gs组和Gb组比较IOD有显著性差异。 结论PTZ诱导的癫痫模型能导致明确的海马区神经元、星形胶质细胞和脑内血管的损伤。大、小剂量天麻素和VPA都能减轻海马区神经元和血管内皮细胞的凋亡和坏死,两种药物疗效相当。天麻素能够从神经、胶质细胞和血管内皮多个层面保护脑组织免受由癫痫导致的损伤。其神经保护的机制可能还涉及抑制促凋亡基因Caspase-3的表达;抑制GFAP的过度表达;抑制由MMP-9高表达诱导的促炎反应。


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