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复健片保护缺血性卒中血脑屏障的作用研究

郭春莉  
【摘要】: 目的:探讨滋补肝肾中药复健片对缺血性卒中后血脑屏障的保护机制。方法:基于“肾生髓”的中医理论,以大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠为实验对象,通过观察复健片调控血脑屏障通透性和结构的研究,初步探索滋补肝肾中药保护血脑屏障的机制。利用渗出血管外的依文氏蓝(EB)染色法,以依文氏蓝含量为指标,观察复健片对血脑屏障通透性的影响;以脑组织含水量为指标,观察复健片对脑水肿的影响;利用酶联免疫法,以组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)为指标,观察复健片对血脑屏障基膜损伤的纤溶酶系统的影响;利用酶联免疫法,以基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)为指标,观察复健片对血脑屏障基膜损伤的明胶酶系统的影响;利用原位杂交法,以内皮细胞内ET-1 mRNA、ecNOS mRNA和P-gp mRNA为指标,观察复健片对内皮细胞功能活性的影响;利用放免法,以环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)为指标,观察复健片对星形胶质细胞活性的影响;利用酶联免疫法,以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素10(IL-10)为指标,观察复健片对炎性细胞因子的影响。结果:复健片可显著降低血脑屏障的通透性,减轻脑水肿;抑制t-PA、MMP-2和MMP-9的表达,防止血脑屏障的基膜损伤;抑制血管内皮细胞内病理性上调的ET-1 mRNA表达,增强ecNOS mRNA、P-gp mRNA表达以保护内皮细胞;降低cGMP表达、提高cAMP,有促使星形胶质细胞协同诱导维持血-脑屏障特性的作用;降低TNF-α含量,提高IL-10含量,降低炎症反应对脑毛细血管内皮、基底膜和星形胶质细胞的损害,使血脑屏障的通透性降低。结论:以滋补肝肾立法组方的复健片可在体调控MCAO大鼠血脑屏障的基膜-星形胶质细胞-内皮细胞功能,从而有利于保护血脑屏障的功能,防止脑水肿的发生。


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