收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

KLK6在乳腺癌组织与细胞中的表达与功能研究

闻新棉  
【摘要】:Kallikrein 是一类编码具有丝氨酸蛋白酶活性的基因家族,KLK6 是该家族成员之一。最近报道KLK6 基因在卵巢癌中可能具有疾病诊断与预后判定的潜在价值,还可能是有用的治疗靶点。本论文是想通过检测乳腺癌组织与正常组织及细胞中KLK6 的表达量的变化来探讨该基因在乳腺癌中的功能。 目的:建立检测KLK6mRNA 表达的实时荧光定量PCR 的方法。分析KLK6mRNA的表达与乳腺癌有无转移、雌激素受体、孕激素受体、乳腺癌相关基因CerbB-2等临床病理特征的关系,探讨其临床意义。另外探讨乳腺癌细胞株MCF-7 中KLK6基因和蛋白质表达被干涉后细胞形态、细胞周期及细胞凋亡的变化。 方法:采用实时荧光定量PCR 的方法,以SYBR Green I 为荧光染料、管家基因GAPDH 作为内对照、梯度稀释的重组质粒为模板制作标准曲线,绝对定量出33 例乳腺癌切除的组织中KLK6 基因mRNA 的表达量,分析KLK6mRNA 的表达量与ER、PR 及肿瘤转移的相关性。以体外化学合成的siRNA 干扰乳腺癌细胞株MCF-7 中KLK6 基因,分别用实时定量PCR 和流式细胞仪检测KLK6 基因mRNA 和蛋白质的干扰效果,结合细胞周期,细胞凋亡及细胞形态分析KLK6 在MCF-7 中的功能。 结果:建立了KLK6 mRNA 实时荧光定量检测方法,该方法灵敏、特异,KLK6的批内变异系数为2.0%,批间变异系数为3.2%,扩增效率接近100%。KLK6 mRNA在癌组织中的表达水平(0.4327±0.2348)比正常组织(0.2194±0.1154)明显升高,两者差异非常显著(P0.001);有淋巴结转移病人癌组织中的表达水平(0.3096±0.1192)比未转移的(0.5527±0.2615)明显降低,两者差异显著(P0.01);ER(+)组(0.2811±0.1164)明显低于ER(-)组(0.5097±0.2521),两者有显著性差异(P=0.005,P0.01);PR(+)中表达低(0.3673±0.2185),PR(-)组表达高(0.4939±0.3425),但两者的差异不明显(P0.05);与乳腺癌相关基因CerbB-2 的表达无相关性(P0.05)。MCF-7 细胞中KLK6 基因表达沉默后,S 期细胞增加11.13%,细胞凋亡无明显变化。 结论:KLK6 基因在早期乳腺癌病人高表达,在肿瘤进程中KLK6 的表达量下降并伴随肿瘤转移;在细胞株MCF-7 中KLK6 表达被干涉后,细胞的分裂增殖能力增


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 宋洁;卜晓波;徐春艳;;R-ras基因在乳腺癌组织中的表达及其临床意义[J];临床肿瘤学杂志;2010年08期
2 弓晋灵;许文林;李娟;杨靖;吴晓君;陈巧云;;一种新CD44变异体(CD44v17)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义[J];江苏大学学报(医学版);2010年03期
3 王科;王晓雄;石炳毅;;实时荧光定量PCR在细胞因子mRNA检测研究中的应用[J];北京生物医学工程;2006年02期
4 刘炜;马俊;;FQ-PCR检测沙眼衣原体及解脲支原体[J];中国现代医生;2008年06期
5 宣姚吉;周祥山;张元兴;;实时荧光定量PCR检测毕赤酵母基因组中外源基因拷贝数[J];中国生物制品学杂志;2009年12期
6 彭国丽;吕治;苏建荣;;荧光定量PCR比较不同季节妇女阴道主要乳酸杆菌的差异[J];中国实验诊断学;2010年02期
7 黄亚强;钟惟德;毕学成;张阳德;;HER-2 mRNA值在前列腺癌中的表达和意义[J];中国现代医学杂志;2010年03期
8 潘军航;金大智;梅玲玲;朱敏;罗芸;占利;;实时荧光定量PCR快速检测创伤弧菌的研究[J];中国卫生检验杂志;2010年06期
9 程鹏飞;蒋晓迪;曹轩;赵友云;王业富;江小明;杨永;;实时荧光定量PCR检测新生隐球菌DNA方法的建立[J];武汉大学学报(理学版);2010年03期
10 姬文灿;丁凯阳;朱薇波;汪健;张磊;吴竞生;;骨髓增生异常综合征患者c/ebpα基因表达水平及其临床意义[J];中国实验血液学杂志;2011年01期
11 曹惠芳,满晓波,蒋虹,徐志飞,唐亮,邱秀华,谈冶雄,吴孟超,王红阳;spp1基因在肺癌组织中表达的定量检测及其意义[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2003年02期
12 李海军,张林西,范婕,白美玲,金春亭;环氧化酶-2基因在乳腺癌组织中的表达[J];河北北方学院学报(医学版);2005年04期
13 李艳萍;史福军;汪艳丽;;主要组织相容性复合体在人乳腺癌组织的表达[J];解剖科学进展;2005年04期
14 周晟;许三鹏;李娜萍;;乳腺癌组织中DNA依赖蛋白激酶的表达变化[J];华中科技大学学报(医学版);2005年06期
15 梁颜笑;杜洪;李雯;许进;;FHIT在乳腺癌中的表达及意义[J];现代医院;2006年07期
16 籍敏;王全红;;bcl-2在乳腺癌中的表达及意义[J];山西医科大学学报;2007年04期
17 张韵红;;实时荧光定量PCR技术运用于肝癌患者基因检测[J];中国血液流变学杂志;2007年01期
18 段智;李代强;;MCM_5和E_2F-2在乳腺癌组织中的表达及意义[J];中国现代医药杂志;2007年04期
19 李春蕊;刘文励;孙汉英;周剑峰;;瘦素mRNA和瘦素受体mRNA在乳腺癌合并肥胖症患者乳腺癌组织中的表达及其与临床病理的关系[J];中国现代医学杂志;2007年13期
20 王忠发;王建跃;卢亦愚;何伟贤;王学海;;实时荧光定量PCR快速检测对虾IHHNV载量方法的建立和应用[J];中国卫生检验杂志;2007年09期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王英丽;朱丽娜;刘力华;;原癌基因HER-2超表达可能是老年性乳腺癌的重要病因学因素[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2011年
2 高岩;郑敏;;Id mRNA在乳腺癌中的表达与彩色多普勒超声表现的相关性[A];中国超声医学工程学会第三次全国浅表器官及外周血管超声医学学术会议(高峰论坛)论文汇编[C];2011年
3 陈英剑;孙晓明;胡成进;闻新棉;;乳腺癌组织KLK5 mRNA的表达水平及其与临床病理特征的关系[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
4 丁春艳;桑梅香;单保恩;;MAGE-A4在乳腺癌组织和细胞系中的表达及对乳腺癌细胞凋亡的影响[A];河北省免疫学会第六次免疫学大会资料汇编[C];2010年
5 吴鸿雁;余慧萍;樊祥山;孟凡青;周强;;乳腺癌组织中DNA-PKcs表达及其与临床病理特征关系的研究[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
6 黄超;赖建华;杨慧;李琳;余敏;谭德勇;;ARD1基因在乳腺癌中的表达研究[A];中国遗传学会七届一次青年研讨会暨上海高校模式生物E——研究院第一届模式生物学术研讨会论文汇编[C];2005年
7 杨开颜;俞康;李剑敏;黄卡特;周韧;;乳腺癌组织中P51基因的表达及其意义[A];2005年浙江省肿瘤外科学术会议论文汇编[C];2005年
8 赵缜;刘维燕;陈前;谢蕴;浦文;;Rab4和Rab22在乳腺癌中的表达及意义[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
9 郑春梅;王薇;卢晓潇;李丹;;乳腺癌47例血管密度与TF相关性分析[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
10 黄晓曦;陈依期;许东坡;高凌云;王镛;;金属蛋白酶组织抑制因子在乳腺癌中的表达及其应用意义[A];2001'全国肿瘤外科学术会议论文汇编[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王杰;Duffy抗原趋化因子受体(DARC)抑制人乳腺癌细胞的生长和肺转移[D];复旦大学;2006年
2 何英;抗骨桥蛋白抗体治疗乳腺癌骨转移的实验研究[D];中南大学;2007年
3 刘国辉;错配修复基因、抑癌基因及微卫星不稳定性与乳腺癌相关性研究[D];吉林大学;2008年
4 毕晓峰;乳腺癌相关蛋白表达分析及与临床预后关系的研究[D];中国协和医科大学;2008年
5 孔令泉;无意义mRNA降解系统在人乳腺癌中的作用研究[D];重庆医科大学;2007年
6 郑一琼;FHL1在乳腺癌紫杉联合蒽环类药物新辅助化疗中的预测价值[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
7 吕丽琼;乳腺癌微卫星不稳定性和DNA错配修复基因突变的研究[D];广西医科大学;2009年
8 路璐;糖皮质激素的代谢酶及受体在乳腺癌组织中的表达及临床意义研究[D];吉林大学;2012年
9 董华英;化疗后乳腺癌组织中的癌干细胞微球体分离培养与鉴定[D];重庆医科大学;2011年
10 令亚琴;甲状腺素受体B1基因在乳腺癌组织中的表达调控研究[D];甘肃农业大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 闻新棉;KLK6在乳腺癌组织与细胞中的表达与功能研究[D];山东师范大学;2005年
2 于晶;KLK4 mRNA实时荧光定量检测方法学建立及初步临床应用[D];山东大学;2005年
3 龙飞;PRL-3、MVD与乳腺癌临床病理特征关系研究[D];中国医科大学;2005年
4 王崇杰;乳腺癌高危型人乳头状瘤病毒感染的临床研究[D];山东大学;2009年
5 黄任贵;生长激素受体和生长抑素受体2、3、5在人乳腺癌组织中表达及相关性研究[D];广西医科大学;2005年
6 廖代祥;乳腺癌中LRP16基因的表达及功能研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2005年
7 郭莉;抑癌基因TSG101及其剪接变异体在乳腺癌中表达的研究[D];暨南大学;2005年
8 韩艳春;p38MAPK信号分子与uPA在乳腺癌中表达的相关性研究[D];中国医科大学;2006年
9 郭艳丽;应用8号人染色体α-卫星探针和FISH技术检测乳腺肿瘤中的超二倍体细胞[D];华南热带农业大学;2006年
10 李文金;乳腺癌芳香化酶表达与临床病理因素的关系[D];苏州大学;2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张中桥;bag-1及bcl-2可为乳腺癌早诊标记[N];中国医药报;2004年
2 张中桥;VEGF对乳腺癌的生长起重要作用[N];中国医药报;2002年
3 战忠利;VEGF表达增高与乳腺癌转移相关[N];中国医药报;2003年
4 记者 毛磊;乳腺癌干细胞被美专家发现[N];新华每日电讯;2003年
5 王群;倾向性COX-2抑制剂的临床研究[N];中国医药报;2002年
6 徐述湘;领异标新看今朝[N];中国医药报;2004年
7 ;国内外同类技术综合比较[N];中国质量报;2003年
8 樊小业;诊断试剂市场硝烟乍起[N];医药经济报;2003年
9 费 菲;芳香化酶抑制剂治疗乳腺癌成热点[N];中国中医药报;2003年
10 王源;光学芯片检测乳腺癌[N];科技日报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978