桔梗总皂甙的制备及其降血脂作用
【摘要】:i桔梗不仅是一种传统中药材,而且是一种风味和营养价值均很高的食品原料,随着人们对桔梗药用和食用价值认识的不断提高,桔梗的种植和栽培及其市场在不断升温。因而对人工种植桔梗的活性成分及其生物学活性进行深入研究有重要意义。本文即以淄博市博山区池上镇种植的桔梗为研究对象,对桔梗的主要活性成分桔梗总皂甙的制备方法以及桔梗总皂甙对高脂血大鼠的降血脂作用等进行了研究。
本文对超声-水提-有机溶剂纯化(SWO)制备桔梗总皂甙和超临界CO2萃取(SCF)桔梗总皂甙两种方法进行了研究,超声-水提-有机溶剂纯化法制备桔梗总皂甙的研究表明,以10倍于生药桔梗粉末的水量将其浸泡,超声30分钟,同法提取二次,合并溶剂,挥干,以甲醇溶解,乙醚沉淀,即得到总皂甙。该方法表明,比传统的回流加热的方法要节约大量时间,而利用水作为溶剂提取的方法比传统使用的有机溶剂提取,安全性高,该法制备桔梗总皂甙的得率为6.6%。
超临界CO2萃取(SCF)桔梗总皂甙研究表明,萃取的工艺条件为:萃取压力为30Mpa,50℃;分离釡I压力为10Mpa,温度40℃;分离釡II压力为6Mpa,温度35℃。萃取时间1.5小时,夹带剂为乙醇,用量为生药桔梗粉末的30%。利用此法制备桔梗总皂甙不仅时间大大缩短了,而且基本无污染,药食两用的安全性大大提高,同时相对超声-水提-有机溶剂纯化制备桔梗总皂甙的方法,节省了大量试剂,成本较小,不失为一种较好的制备方法,该法制备桔梗总皂甙的得率为2.2%。
利用显色反应,确定提取物为三萜皂甙类物质。利用电喷雾质谱一级激发图,结合文献资料,对比分子量,确定提取物中含有的可能的皂甙单体约有23种。利用紫外分光光度法对总皂甙进行定量,超声-水提-有机溶剂纯化法制备的桔梗总皂甙的纯度为86.2%,而CO2超临界萃取的桔梗总皂甙的纯度为92.8%。利用HPLC定量总皂甙中的桔梗皂甙D,其含量分别为61.5%和64.0%。
利用高脂饲料饲喂Wistar大鼠,成功建立了高脂血大鼠模型,分别以5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml三个溶度的桔梗皂甙溶液进行灌胃处理,每只大鼠每次2ml,每天1次,连续5天后。禁食过夜(12h),断尾采血测定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、