束缚—浸水应激（RWIS）不同时间段对大鼠脊髓和脑干中c-Fos表达的影响

【摘要】： 大鼠束缚-浸水应激(restraint water-immersion stress,RWIS)模型被广泛用来研究应激性胃粘膜损伤的发生机制及其临床治疗药物的筛选等。众多实验结果表明:束缚-浸水应激(RWIS)状态下胃运动机能亢进、胃酸分泌增多主要是由于支配胃的副交感神经活动加强所致。这与其它多种类型的应激所致“下丘脑-腺垂体-肾上腺皮质轴”和“交感神经-肾上腺髓质系统”活动加强的现象相反;在束缚-浸水应激模型中却是副交感神经的活动加强,而这些副交感神经来自延髓的迷走背核和疑核。 迷走神经背核(DMV)、疑核(NA)、孤束核(NTS)作为副交感神经的初级中枢对胃运动均具有调控作用,但是兴奋作用还是抑制作用,文献报道颇不一致。为了搞清楚这三个核团对胃运动到底起什么样的调控作用,本实验室前面的工作分别电刺激或化学刺激这三个核团,结果发现这三个核团受刺激后对胃运动均起抑制作用。那么,大鼠束缚-浸水应激状态下这些核团是兴奋还是抑制?脊髓灰质后角、前角、侧角的神经元是兴奋还是抑制?本文用即刻早期基因c-fos表达的Fos蛋白来作为神经元激活的标志,研究了束缚-浸水应激不同时间段的大鼠脊髓和脑干中各个神经核团的神经元的兴奋情况,联系大鼠的胃溃疡程度,进一步探讨脊髓与脑干各核团的兴奋与RWIS之间的关系。 实验分为2部分。实验研究I:我们将实验大鼠随机分为五组,各组大鼠束缚-浸水应激时间分别为0 min、30 min、60 min、120 min、180 min,第一组作为对照组。取出后过量戊巴比妥钠麻醉,心脏灌流,取脊髓和脑干,后固定过夜,冰冻切片,片厚25μm。切片做Fos免疫组化。结果发现在脊髓前、后角和脑干多个核团(NTS, DMV, AP, SubP, LC, PBN, CGO, LRt-PC,等)中,Fos样免疫反应阳性细胞都有极显著的表达,但其表达的个数与强度不完全相同,且随着RWIS时间的延长,Fos表达呈现一定的规律。总体来说,应激60 min时大鼠脑干和脊髓中Fos表达达到顶峰,但具体到每个核团,又稍有差别。以后随时间延长,动物产生适应,Fos表达减少。 实验研究Ⅱ:切断大鼠膈肌下迷走神经后RWIS 180 min。发现切断膈肌下迷走神经后再RWIS,大鼠脑干各核团中Fos表达明显减少,而脊髓的表达有所增强。胃粘膜部几乎没有溃疡点。 本研究的结果表明:RWIS不同时间段大鼠脊髓前角、后角和脑干许多核团都有不同程度的Fos表达;RWIS 30-60 min时脊髓前角、后角和脑干大部分核团的Fos表达达到高峰。以后逐渐下降;发现切断膈肌下迷走神经后再RWIS 180 min,大鼠脑干各核团中Fos表达明显减少,而脊髓的表达有所增强。