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HSCCC分离纯化秦皮、乌药等药材中有效成分的研究

孙清华  
【摘要】:高速逆流色谱(High-Speed Counter-Current Chromatography, HSCCC)是利用螺旋管方向性与高速行星式运动相结合产生的一种独特的流体动力学现象,使样品中的各组分在相对移动的互不相溶的两相(一相为固定相,另一相由恒流泵连续输入,为流动相)中实现高效的接触、混合、分配和传递,并按照分配系数的不同依次洗脱而获得分离的一种液-液色谱技术[1]。它消除了由于使用载体而带来的样品吸附、污染、峰形变形等不良情况,此外,它还具有高效、快速、进样量大和回收率高等优点,已渐渐从最初的分析型色谱技术发展到具有较大容量的制备型色谱技术,特别适合天然药物中有效成分的分离制备[2],成为在中药有效成分的分离纯化领域最有优势的分离方法之一。 中药化学成分较为复杂,所以想研究和应用其中的有效成分,必须将它们从中药中提取出来并进一步加以分离和精制,得到有效单体。由于中药所含成分种类繁多,含量有高有低,所以中药有效成分的提取、分离和精制是一项十分艰巨而细致的工作。而HSCCC非常适合天然药物中有效成分的分离制备。目前,应用HSCCC法在提取分离天然药物中的黄酮、生物碱、香豆素、皂甙和蒽醌类衍生物等有效成分方面已获得满意结果[3]。 本文对HSCCC在中草药有效成分的制备性分离纯化方面的应用进行了研究,建立了分离纯化秦皮、乌药、知母、木蝴蝶和槐果皮中的有效成分的新方法,并利用紫外光谱(UV)、高效液相色谱(HPLC)、核磁共振波谱(NMR)等对目标产物的纯度和化学结构进行了分析和鉴定。 1. HSCCC分离纯化秦皮中的香豆素类化合物 建立了HSCCC一次性分离、纯化秦皮中多种香豆素类化合物的新方法。溶剂体系为正丁醇-甲醇-0.5%醋酸(5:1:5,v/v)。从150 mg秦皮粗提物中一步分离纯化出14.3 mg秦皮苷(fraxin),26.5 mg七叶苷(aesculin),5.8 mg秦皮素(fraxetin),32.4 mg七叶素(aesculetin);纯度分别为97.6%,99.5%, 97.2%和98.7%。化合物结构由其1H-NMR和13C-NMR数据来确定。 2. HSCCC分离纯化乌药中的倍半萜类化合物 应用制备型HSCCC分离、纯化乌药中的倍半萜类化合物,所用溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(5:5:6:4,v/v)。从450 mg乌药粗提物中一步分离纯化得到40.2 mg乌


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