TGF-β1,Smad4在急性白血病中的表达及相关性

【摘要】： 背景与目的： 急性白血病(acute leukemia, AL)是造血系统最常见的恶性肿瘤,是一类造血干细胞恶性增殖的克隆性疾病,大量白血病细胞在骨髓中异常增殖从而抑制骨髓正常造血。肿瘤的发生发展是长期,多因素,多阶段和多基因改变共同作用的结果,其中原癌基因的激活及肿瘤抑制基因的失活与肿瘤形成密切相关。转化生长因子β(transforming growth factor-β, TGF-β)是一种对人类造血干/祖细胞的静息、增殖和分化发挥重要调控作用的生长因子。目前国内外已有TGF-β1在急性白血病中表达的报道,但结论尚存在争议。胰腺癌缺失基因(deleted in pancreatic cancer locus4,DPC4)是一种抑癌基因,其蛋白产物Smad4属于转化生长因子超家族的成员。它作为TGF-β1的唯一底物,是TGF-β信号转导途径中的重要伙伴分子,在信号转导过程中起中心介导作用。已有文献报道Smad4在胃癌、大肠癌、甲状腺癌、肝癌等实体瘤中呈低表达或者缺失状态,在胃癌、大肠癌、甲状腺癌等肿瘤中TGF-β1与Smad4呈负相关,在肝癌中二者无明显相关性。目前关于Smad4在白血病中的研究相对较少。为探讨TGF-β1,Smad4与急性白血病发生和髓外浸润的相关性,本实验采用免疫细胞化学法检测TGF-β1蛋白和Smad4蛋白在急性白血病患者骨髓单个核细胞(mononuclear cell,MNC)中的表达,分析TGF-β1的表达与Smad4表达的相关性,初步探讨TGF-β/Smad信号转导通路在急性白血病发生中的可能作用,从而探索治疗急性白血病的新方法。 材料与方法： 1.病例资料：所有标本均取自2009年2月至2009年8月郑州大学第一附属医院血液科经细胞形态学、免疫学、细胞遗传学和(或)分子生物学确诊的AL患者共55例,分为3组：①初治急性白血病组共55例,男36例,女19例,中位年龄41(16～74)岁,其中急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)36例,急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia, ALL)19例。②急性白血病完全缓解组(AL-CR组)共21例。③正常对照组(Control组)共16例。 2.标本处理：采集骨髓,经淋巴细胞分离液分离单个核细胞(mononuclear cell,MNC)后制备细胞滴片,采用免疫细胞化学染色方法检测TGF-β1, Smad4蛋白在各组骨髓细胞中的表达。 3.统计学处理：所得结果运用SPSS17.0软件进行统计学处理,以α=0.05为检验标准。 结果： 1. TGF-β1在急性白血病中的表达 TGF-β1在初治AML组、初治ALL组、AL-CR组和正常对照组的阳性率分别为80.56%、78.95%、66.67%和68.75%；TGF-β1在初治AML组、ALL组的阳性表达率高于AL-CR组与正常对照组,但差异无统计学意义(P0.05)；AML和ALL组间的差异亦无统计学意义(P0.05)。 2. Smad4在急性白血病中的表达 Smad4在初治AML组、初治ALL组、AL-CR组、正常对照组中的阳性表达率分别为30.56%、68.42%、71.43%和75%；Smad4在初治AML组的阳性率显著低于初治ALL组,AL-CR组与正常对照组,差异有统计学差异(P0.05)；初治ALL组阳性率低于AL-CR组与正常对照组,但差异无统计学意义(P0.05)。 3. TGF-β1和Smad4在急性白血病中表达的相关性 TGF-β1和Smad4在急性白血病患者骨髓细胞中的表达无显著相关性(rs=0.076,P0.05)。 4. TGF-β1和Smad4与急性白血病临床特征的关系 TGF-β1和Smad4表达水平与患者的年龄、性别等临床特征无明显相关性(P0.05), Smad4与髓外浸润密切相关(P0.05),TGF-β1与髓外浸润无明显相关性(P0.05)。 结论： 1. TGF-β1在初治AL患者骨髓细胞中的表达水平与缓解组及正常对照组比较无显著性差异,提示急性白血病细胞TGF-β1的表达能力基本正常。 2. Smad4在初治AML患者骨髓细胞中的表达水平与对照组比较有显著性差异,在ALL患者中的表达与对照组比较无显著性差异,提示Smad4的改变可能参与人类AML的发生。