收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

LY294002对bFGF诱导的兔眼晶状体上皮细胞增殖的影响

冯希敏  
【摘要】: 目的 随着白内障手术的不断完善,以往的白内障手术并发症,如:玻璃体前界膜破裂致玻璃体脱出、角膜失代偿、虹膜睫状体炎、眼内炎、青光眼、人工晶状体脱位及半脱位等已明显减少,而晶状体后囊膜混浊(Posterier Capsuler Opacification, PCO)已成为现代白内障手术(囊外摘除及人工晶体植入)术后的主要并发症之一。 多年来预防后发障发生的研究主要集中在抑制残留的晶体上皮细胞继续增殖和迁移。其中包括非药物性和药物性两个方面。因非药物性抑制晶体上皮细胞生长繁殖的研究没能得出满意的结果,目前的研究则主要集中在药物抑制晶状体上皮细胞增殖。而近些年研究的一些药物,如:抗代谢药物,天然草药,组织纤溶酶原激活剂,抗炎药,免疫毒素及细胞毒素等均因其毒副作用较强而未应用于临床。近几年的研究则侧重于通过不同途径影响bFGF的促增殖作用而抑制晶状体上皮细胞的增殖和迁移。 LY294002为磷酸肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)通道抑制剂,PI3K是许多生命活动中关键的信号分子,参与调节细胞的分裂、分化、凋亡等活动,并已报道其也参与LECs的增殖。丝氨酸/苏氨酸激酶AKT(serine/theonine kinase AKT,又称为PKB)是PI3K下游直接的靶蛋白,AKT是一种多功能调节因子,参与细胞生存和凋亡的调控。 多种生长因子都能通过生长因子受体上酪氨酸(Y740/Y751)位点磷酸化后产生与PI3K的p85亚基结合的高亲和位点,诱导PKB的激活,此激活过程能被PI3K特异抑制齐刂wortmannin及LY294002所阻断。主要机制为wortmannin及LY294002与PI3K的p110亚基呈非竞争性不可逆性结合,从而阻断下游AKT的激活,起到抑制细胞增殖和迁移的作用。磷酸肌醇3激酶(PI3K)通道抑制剂的毒副作用较小有望成为预防PCO的理想药物。 本实验将不同浓度的LY294002加入体外培养的兔晶状体上皮细胞干预其增殖。通过MTT检测细胞抑制率及流式细胞仪分析细胞周期。观察LY294002对兔眼晶状体上皮细胞的抑制程度及对bFGF促进增殖作用的影响。 材料与方法 体外培养的兔晶状体上皮细胞分为实验组和对照组,其中对照组包括空白对照和bFGF对照组,实验组包括单独用LY294002和联合用bFGF组,空白对照组为不含血清的DMEM培养液,bFGF对照组为空白对照这组+bFGF (10ng/mL),药物处理组分为两组:①5个单独用药组(10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L、10-4mol/L);②5个联合用药组(10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L、10-4mol/L)+bFGF (10ng/mL)。取生长良好的第3代兔LEC细胞传代于培养板及培养瓶中,常规培养后,按上述分组加入不同浓度药物,培养48小时后MTT检测抑制率及流式细胞仪检测细胞周期。 结果 1.MTT检测LY294002对LEC增殖的抑制作用 在单独应用LY294002组内,各LY294002组与空白对照组相比显示:10-8mol/L作用48h后对兔LECs无明显抑制作用(P0.01),10-4、10-5、10-6、10-7mol/L浓度作用48h后均对兔LECs有明显的抑制作用(P0.01);各联合用药组与阳性对照组相比,10-8 mol/L作用48 h后对兔LECs有轻微抑制作用(P=0.008),10-4、10-5、10-6、10-7mol/L作用48 h后均对兔LECs有明显的抑制作用(P0.01);空白对照组与阳性对照组相比差异有统计学意义(P0.01)。 2.LY294002对兔LEC的细胞周期的影响 兔LEC经LY294002作用48h后,实验组与对照组相比,G0/G1期细胞增多,而S期和G2/M期细胞减少。细胞G0/G1期分析示:LY294002组,10-8mol/L浓度作用48 h后,与空白对照组相比对兔LECs无明显抑制作用(P0.01); 10-4、10-5、10-6、10-7mol/L作用48h后,与空白对照组相比对兔LECs均有明显的抑制作用(P0.01);联合用药组内,10-8 mol/L浓度作用48h后,与阳性对照组相比对兔LECs无明显抑制作用(P0.01),10-4、10-5、10-6、10-7mol/L浓度作用48h后,与阳性对照组相比对兔LECs均有明显的抑制作用(P0.01);空白对照组与阳性对照组相比差异有统计学意义(P0.01),S期及G2/M期分析结果大致同G0/G1期。 结论 1.LY294002能抑制兔眼晶状体上皮细胞的增殖。 2.bFGF能促进兔眼晶状体上皮细胞的增殖,并作用后处于增殖期的兔眼晶状体上皮细胞明显增多。 3.高浓度LY294002能将bFGF的促细胞增殖作用阻断,并作用后处于增殖期的兔眼晶状体上皮细胞明显减少而静止期细胞明显增多。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 冯希敏;张凤妍;祁颖;;LY294002对bFGF诱导的兔晶状体上皮细胞增生的影响[J];眼科研究;2010年05期
2 陈迎迎;梁皓;李霞;谭少健;姬翔;;去整合素Kistrin对兔眼LECs增殖的抑制[J];中国老年学杂志;2011年06期
3 刘新昌,王銮弟;丝裂霉素C防治兔后发性白内障的实验观察[J];潍坊医学院学报;2005年03期
4 刘导涪 ,楼苏生;微波辐射及其对眼的影响(第一部分)[J];眼外伤职业眼病杂志(附眼科手术);1984年02期
5 戴南平,姚克;兔眼IOL术后基质金属蛋白酶抑制因子在虹膜、晶状体上皮细胞的表达[J];眼科研究;2004年03期
6 牛嗣云,高福禄,潘林洁,王春燕,王玉平,庞小静;TGF-β_1、EGF在人胎儿晶状体上皮细胞的表达[J];承德医学院学报;2000年03期
7 翁景宁,张惠蓉;PCNA反义寡脱氧核苷酸对牛晶状体上皮细胞体外增殖活性的影响[J];眼科研究;2001年03期
8 李立!400010,汤永强!400010;阿霉素防治兔后囊混浊的实验与临床研究[J];眼科新进展;2001年05期
9 刘宝海,谭少健,韦敏怡,梁皓,李霞,蒋林志;γ干扰素对兔晶状体上皮细胞增殖细胞核抗原表达的影响[J];眼科;2004年05期
10 谭健,姚克,王凯军,徐雯,申屠形超;环孢素A对兔晶状体上皮细胞增殖的影响[J];眼科研究;2005年02期
11 孔珺,吴晓芝,张劲松;染料木黄酮对实验性后发性白内障形成的影响[J];眼科新进展;2005年04期
12 谭浅,罗栋强,蒋剑;骨桥蛋白在白内障晶状体上皮细胞中的表达[J];国际眼科杂志;2005年04期
13 张雪岩,张劲松,孔玮;人晶状体上皮细胞内热休克蛋白mRNA的表达[J];眼科新进展;2005年05期
14 崔璟琳;高维奇;刘平;关立南;于莉;;晶状体上皮细胞DNA损伤的SCGE测定法[J];哈尔滨医科大学学报;2006年05期
15 屈思萌;张伟;安莹;宋旭东;;NADPH氧化酶参与人晶状体上皮细胞增殖及其表达[J];眼科;2009年02期
16 周健,惠延年,李燕,林英华,焦西英,蔡翔;老年性白内障晶状体上皮细胞的形态学变化[J];第四军医大学学报;2000年12期
17 范芳,葛正龙,李长福,曾小平,李海祥;c-myc ASODN对半乳糖诱导的晶状体上皮细胞中cMyc蛋白表达及细胞周期的影响[J];第四军医大学学报;2004年11期
18 饶惠英,姚克,汤霞靖,徐雯;Quercetin对晶状体上皮细胞HSP70、HSP27表达的调节作用[J];眼科研究;2005年02期
19 洪伟;刘庆淮;谢平;;年龄相关性白内障晶状体上皮细胞的超微结构观察[J];解剖学研究;2006年02期
20 杨丽英;黄秀榕;祁明信;胡俊;;晶状体蛋白质与蛋白质组学的研究进展[J];广州医学院学报;2006年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 黄秀榕;祁明信;李坤鹏;陈义;;尾加压素Ⅱ体外促进晶状体上皮细胞增殖的细胞信号转导机制[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
2 詹敏;李志英;;内障丸加减方对氧化损伤晶状体上皮细胞作用的透射电镜观察[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年
3 张海燕;杨金玲;张苏炯;夏园玲;屠云松;于燕妮;;多聚赖氨酸与EDTA的交联物防治兔眼后囊膜混浊的实验研究[A];2007年贵州省医学会眼科学分会第五届第三次学术年会论文汇编[C];2007年
4 徐国兴;崔丽金;;石决明对体外培养晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用的研究[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年
5 谢伟英;徐国兴;庄华;;CTGF及其反义寡核苷酸对体外培养的人晶状体上皮细胞表达COL-Ⅰ、MMP-2、TIMP-2的影响研究[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年
6 俞一波;姚克;吴炜;;急性手机微波辐射对人眼晶状体上皮细胞热休克蛋白表达的影响[A];2007年浙江省眼科学术会议论文集[C];2007年
7 严京;祁明信;黄秀榕;;阿魏酸钠防护晶状体上皮细胞氧化损伤及其蛋白质组学研究[A];中医药中青年科技创新与成果展示论坛论文集[C];2009年
8 严京;祁明信;黄秀榕;;阿魏酸钠防护晶状体上皮细胞氧化损伤及其蛋白质组学研究[A];自主创新与持续增长第十一届中国科协年会论文集(3)[C];2009年
9 詹敏;李志英;;内障丸加减方对氧化损伤晶状体上皮细胞作用的透射电镜观察[A];第十二届广东省视光学学术会议专题讲座、论文汇编[C];2009年
10 詹敏;李志英;代秋楠;;内障丸加减方对氧化损伤晶状体上皮细胞凋亡及相关基因的影响[A];第十二届广东省视光学学术会议专题讲座、论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张一栋;1.8GHz微波辐射对人晶状体上皮细胞蛋白质表达影响的研究[D];浙江大学;2012年
2 张志勇;小窝蛋白-1在高糖诱导的人晶状体上皮细胞凋亡调控中的作用[D];浙江大学;2009年
3 邢星;组织型转谷氨酰胺酶在后囊膜混浊中的作用研究[D];华中科技大学;2010年
4 包秀丽;Wnt信号诱导人晶状体上皮细胞上皮间充质转化和增殖的研究[D];天津医科大学;2012年
5 柳珑;GEFT调节晶状体上皮细胞分化的机制研究[D];湖南师范大学;2011年
6 谭少健;正常及糖尿病兔后囊膜混浊发生过程中Kistrin调控晶状体上皮细胞胶原代谢的分子机制[D];广西医科大学;2010年
7 刘燕;年龄相关性白内障与正常晶状体上皮细胞中差异表达基因的筛选[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
8 黎蕾;Visudyne光动力疗法预防晶状体后囊膜混浊的实验研究[D];复旦大学;2008年
9 安小玲;肝细胞生长因子对人晶状体上皮细胞影响的实验研究[D];中国医科大学;2006年
10 刘芳;抗Ⅳ型胶原抗体偶联金雀异黄素抑制后发障的研究[D];中国医科大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 冯希敏;LY294002对bFGF诱导的兔眼晶状体上皮细胞增殖的影响[D];郑州大学;2010年
2 李丹;PI3K抑制剂LY294002对人晶状体上皮细胞增殖的影响[D];中国医科大学;2010年
3 金海鹰;晶状体上皮细胞端粒酶活性及衰老、凋亡的实验研究[D];暨南大学;2003年
4 姬翔;去整合素Kistrin抑制兔眼晶状体上皮细胞增殖的实验研究[D];广西医科大学;2010年
5 李凤至;激活素A抑制人晶状体上皮细胞增殖的实验研究[D];吉林大学;2011年
6 李姗姗;七叶皂苷钠体外对大鼠紫外线所致晶状体上皮细胞NF-κB表达的影响[D];兰州大学;2011年
7 刘亚会;人晶状体上皮细胞中bax的表达与白内障形成的相关性研究[D];大连医科大学;2010年
8 郭莹;后发性白内障兔眼囊膜中Brdu的表达及AG490对其表达的对抗作用[D];河北医科大学;2006年
9 刘瑜;谷氨酰胺体外对大鼠晶状体上皮细胞HSP70和NF-κB表达的影响[D];兰州大学;2011年
10 张琛;兔眼晶状体前囊及囊袋在同体另眼前房内培养的研究[D];郑州大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张中桥;白内障与晶状体上皮细胞改变有关[N];中国医药报;2002年
2 王振岭;消化分离法培养人晶状体上皮细胞[N];中国医药报;2002年
3 仇逸 陈祖亮;我国成功复制“活性”兔眼角膜[N];医药经济报;2005年
4 任旺;眼开眼闭也有病[N];人民政协报;2002年
5 余宁宁 李水根;后发性白内障发生机理探明[N];健康报;2003年
6 秦京;看脸色测健康[N];人民政协报;2001年
7 本报编辑部;氮酮为何药?[N];民族医药报;2006年
8 余宁宁;低强度微波辐射引发白内障[N];健康报;2004年
9 ;新型人工晶状体研究获进展[N];中国医药报;2003年
10 赵和云;降眼压药物的研究近况[N];中国医药报;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978