趋化因子CXCL12及受体CXCR4在喉鳞癌中的表达及意义

【摘要】： 喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma, LSCC)是来源于喉粘膜上皮组织的恶性肿瘤,多见于中老年男性。其发生与吸烟、酗酒、长期吸入有害物质及乳头状瘤病毒感染等因素有关。在耳鼻喉科领域中仅次于鼻咽癌和鼻腔,鼻窦癌,居第三位,是耳鼻咽喉科常见的恶性肿瘤。发病率约占全身肿瘤的1-5%,好发年龄为45～75岁。男性发病率约是女性的10倍,城市明显高于农村。近年来其发病有逐渐升高及年轻化的趋势。对于单纯的喉癌病人,可以通过手术切除的方式取得较好的疗效,术后5年生存率可达到80%。而对于伴有颈部淋巴结转移的病人,即使通过颈部淋巴结清扫及术后放疗,5年生存率仅为46%,死亡率明显上升。肿瘤细胞的转移是一个非常复杂的过程。 而趋化因子及受体与肿瘤细胞的恶性表现密切相关。趋化因子与肿瘤的关系具有两面性：一方面趋化因子能通过以自分泌或旁分泌的方式调节细胞因子的分泌,调节机体的免疫系统,逃避宿主抗肿瘤反应、趋化肿瘤细胞、促进肿瘤相关血管生成、消化细胞外基质、刺激肿瘤细胞生长等直接和间接作用促进肿瘤的增殖和转移；另一方面,趋化因子又可抑制血管生长,趋化免疫活性细胞浸润至肿瘤,激活宿主对肿瘤的特异性免疫应答来抑制肿瘤的增殖和转移,但其主要作用可能还是加速了肿瘤的生长和转移。尤其是CXCL12/CXCR4相互作用所构成的反应轴,在多种肿瘤的发生、生长增殖、浸润转移中发挥着重要的作用。趋化因子调控白细胞对肿瘤的浸润、引起机体免疫反应杀伤肿瘤细胞,促进肿瘤相关血管生成、以自分泌或旁分泌的方式刺激肿瘤细胞增殖、使肿瘤细胞突破基底膜发生侵袭,同时促使癌细胞的运动和远处转移,从而产生趋化运动和侵袭反应。肿瘤细胞高表达特异的趋化因子受体,而一些器官高表达其相应的趋化因子配体,肿瘤细胞就借助趋化因子与其受体的特异性结合力,向这些器官特异性的转移。在许多肿瘤中均发现CXCL12/CXCR4参与肿瘤的局部侵袭和器官特异性转移。 目的 通过观察趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在喉鳞状细胞癌中的表达,探讨CXCL12-CXCR4生物轴与喉鳞癌的临床病理特征、肿瘤大小、侵袭转移行为和预后的关系,为临床治疗提供理论依据。 材料与方法 1、材料 选取郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉科2008年8月～2009年12月年手术切除标本77例,术后经病理检查确诊为喉鳞状细胞癌,病理分级：T分期：T1-T2期30人,T3-T4期47人；淋巴结：转移23人,无转移54人(TNM分类标准按国际抗癌协会UICC2002年方案)；分化程度：高分化41人,中、低分化36人(按病历资料病理报告分级)；其中另选取癌旁切缘5mm癌旁正常黏膜组织18例。所有病例术前均未行放疗、化疗及其他相关治疗,临床病理资料完整。 2、方法 采用免疫组化SP法分析CXCL12、CXCR4在喉癌组织及癌旁正常组织中的阳性表达。操作步骤按试剂盒上说明进行。评分标准参照文献,根据组织切片中阳性细胞百分数和着色强度进行半定量分级评分。阳性细胞百分数≤10%为0分,11%～25%为1分,26%～50%为2分,51%～75%为3分,≥76%为4分。着色强度：0分,不着色；1分,浅黄色；2分,黄色；3分,棕黄色。取上述两项分值的乘积作为总积分：0分为阴性(-),1-4分为弱阳性(+),6-8分为阳性(++),9～12分为强阳性(+++)。 3、统计学处理 采用SPSS13.0统计软件包进行数据分析,X2检验及Spearman等级相关分析。P0.05说明有统计学意义。 结果 1、CXCR4在喉癌组织和正常组织中的表达 77例喉癌组织中有49例CXCR4阳性表达,阳性表达率63.64%(49/77),CXCR4阳性显色为棕黄色至棕褐色颗粒,主要表达于喉癌组织细胞的胞质。正常对照组几乎无阳性表达。二者阳性率比较差异有统计学意义(X2=12.991, P0.05),且两组阳性表达强度差异有统计学意义(X2=13.778,P0.05)。喉鳞癌组织中的CXCR4阳性表达率与患者淋巴结转移有关,在喉鳞癌淋巴结转移阳性组中CXCR4阳性表达率为91.30%(21/23)明显高于淋巴结阴性组的51.85%(28/54),差异有统计学意义(P0.05)；喉鳞癌组织中CXCR4阳性表达率与患者T分期有关,在T3、T4期患者组喉鳞癌组织中CXCR4阳性表达率为74.47%(35/47)明显高于TI、T：期患者组的46.67%(14/30),差异有统计学意义(P0.05)。 2、CXCL12在喉癌组织与正常组织中表达 77例喉癌组织中有43例CXCL12阳性表达,34例阴性表达,阳性表达率55.84%(43/77),CXCL12阳性显色为棕黄色颗粒,表达于喉癌组织细胞的胞质和胞核,但以胞质表达为主。正常组织中CXCL12表达8例,阳性表达率44.44%(8/18)。两组阳性表达率没有统计学差异(X2=0.763,P0.05),且两组阳性表达强度差异没有统计学意义(X2=5.861,P0.05)。喉鳞癌组织中的CXCL12阳性表达率与患者淋巴结转移有关,在喉鳞癌淋巴结转移阳性组中CXCL12阳性表达率为73.91%(17/23)明显高于淋巴结阴性组的48.15%(26/54),差异有统计学意义(P0.05)。 3、喉鳞癌组织中CXCR4、CXCL12表达的相关性分析 喉鳞癌组织中CXCR4表达与CXCL12表达经Spearman等级相关分析,二者呈正相关,即随CXCR4表达的增加,CXCL12高表达所占比例升高(r=0.252,p0.05)。 结论 1、CXCR4可能与喉癌的发病相关,参与了肿瘤的发展和转移,能促进肿瘤细胞恶性分化和淋巴结转移。 2、CXCL12可由组织的间质细胞分泌,CXCL12在癌旁淋巴结有高表达,是吸引表达CXCR4的肿瘤细胞逆浓度梯度,向特异淋巴结转移的重要因素。 3、CXCL12/CXCR4在喉癌组织中的表达呈正相关(P0.05),符合其配体-受体的特性。通过两者结合激活下游信号传导通路,促进细胞的生存和增殖,同时参与血管形成,促进肿瘤的侵袭和转移。