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转染4.1N基因对肺癌A549细胞生物学行为的影响

武娟  
【摘要】:研究背景 肺癌是当今世界最常见的对人类健康和生命危害最为严重的恶性肿瘤之一,近年来,肺癌的发病率和死亡率均呈持续上升趋势,侵袭和转移是肺癌的恶性标志和特征,也是影响生存率和病死率的主要因索。据统计,近90%的肺癌患者死于肿瘤转移及其并发症,即使原发癌灶经手术完全切除后,肿瘤转移仍然是影响肺癌患者5年存活率的重要因素。虽然目前放化疗手段已广泛应用于无法手术的转移性肺癌,但其疗效却令人不甚满意。因此寻找新的肺癌转移相关基因和蛋白标志物,明确肺癌侵袭转移发生的分子机制,靶向控制肺癌转移是提高肺癌疗效的希望所在。 蛋白4.1N,由EPB41L1基因编码,定位于人类20号染色体20q11.2-q12,最初是在神经系统中发现的。同4.1B,4.1G及4.1R一样都是蛋白4.1基因超家族的一员,该基因家族各个成员都含有三个保守的结构域:SABD结构域(spectrin-actin-binding domain)、FERM结构域(4.1-Ezrin-Radixin-Moesin)或膜结合结构域((membrane binding domain, MBD)、及CTD结构域(C-terminal domain)。 近年来研究发现,在乳腺癌、脑膜瘤、肺癌、结直肠癌等多种肿瘤中,4.1蛋白的表达缺失或减少,并且越来越多的实验数据表明4.1蛋白基因家族成员可作为一种负调节因子参与肿瘤的发生发展。此外,蛋白4.1作为细胞骨架成分也很有可能参与细胞与细胞及细胞与基质间的相互粘附,在肿瘤转移过程中发挥作用。已证实蛋白4.1B与前列腺癌和肉瘤细胞系的转移有关;蛋白4.1N与乳腺癌的转移相关。前期研究发现4.1N蛋白在肺癌中表达减少,并与分化程度相关,但其是否具有抑制生长的抑癌基因功能尚未见报道。本研究初步探讨4.1N在肺癌A549细胞中的表达以及转染前后细胞在增殖,侵袭,迁移等一系列与肿瘤转移有密切相关的指标上的变化。 研究目的 检测蛋白4.1N在人肺癌A549细胞中的表达,及转染4.1N基因对体外培养A549细胞增殖、侵袭及转移能力的影响,并初步探讨4.1N对细胞周期的影响,为进一步研究其作用机制奠定基础。 研究方法 脂质体介导真核表达载体pEGFP-4.1N转染到体外培养的人肺腺癌细胞A549中,同时设空载体组、空白组为对照组,于转染后24小时荧光显微镜观察转染效率;48小时后用半定量RT-PCR和Western blot方法检测各组细胞4.1NmRNA和蛋白的表达水平;通过MTT法测定各组细胞增殖能力;划痕、粘附实验及Tran swell小室模型检测各组细胞体外侵袭转移能力;流式细胞技术检测质粒转染24h、48h后对肺癌细胞周期的影响。 结果 1, pEGFP-4.1N质粒成功转染人肺腺癌A549细胞,转染效率达50%,且融合蛋白EGFP-4.1N在肺癌细胞A549中定位于细胞质,细胞核中不表达。 2,转染48小时后,pEGFP-4.1N转染组4.1N的mRNA及蛋白质表达水平均显著增强(p0.05)、(p0.05);细胞增殖活性显著降低(p0.05);细胞的体外粘附能力、迁移能力、侵袭能力明显减弱(p0.05)。 3,流式细胞术检测结果显示,转染4.1N后G1期的细胞数量较未转染组明显增多,S、G2期相应减少。 结论 1,4.1N基因转染能显著上调人高转移肺腺癌A549细胞株中4.1N基因mRNA和蛋白的表达水平。 2,体外细胞行为学研究发现4.1N可以抑制A549细胞的增殖、粘附、侵袭和迁移,在肺癌转移中起重要作用,且可以将细胞阻滞在G1期,有可能成为肺癌转移的分子标志物。


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6 刘芳蕾;肺癌PLK1基因多态性及siRNA干预的研究[D];浙江大学;2011年
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1 王俊;抗击现代幽灵——肺癌(下)[N];中国经营报;2010年
2 保健时报记者 吴正友 熊江雪;我国每年将有100万人死于肺癌[N];保健时报;2010年
3 陈良栋;华西医院完成一例高难度肺癌手术[N];中国医药报;2003年
4 广东省肺癌研究所所长 吴一龙;肺癌个体化治疗 现实还是梦想[N];健康报;2010年
5 日汶;基因检测可预测肺癌手术后存活率[N];医药经济报;2003年
6 何德功;日专家通过基因预测肺癌手术后存活率[N];中国中医药报;2003年
7 郑颖璠;突破肺癌局部复发关口[N];健康报;2006年
8 伍新华;肺癌治疗呼唤科学规范[N];卫生与生活报;2006年
9 ;宣武医院:47名肺癌患者8成是烟民[N];新华每日电讯;2008年
10 北京大学人民医院胸外科 刘彦国;胸腔镜治早期肺癌大有可为[N];健康报;2008年
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