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基于罗丹明B的新型人工核酸酶的设计合成及性能表征

王敏  
【摘要】:荧光分子探针具有能够实现开关操作、高灵敏度、快速、安全、可利用光纤维远距离检测及原位检测等优点,已经广泛的应用在金属离子检测、DNA序列检测、细胞检测及免疫检测等方面。罗丹明类荧光染料具有摩尔消光系数高、荧光量子产率高及光稳定性好等优异的光物理化学性质,因而广泛的应用于制备阳离子荧光探针。 本文合成了包括中间体在内的15个罗丹明B衍生物,所有的目标化合物(L1-L6)的结构均经HRMS、IR、1HNMR、13C NMR的确证。 利用紫外吸收光谱和荧光光谱对目标化合物(L1-L6)识别检测金属阳离子的性质进行了一系列的研究,探讨了检测金属阳离子的最佳条件。由于Hg2+有强的嗜硫性,硫代的罗丹明衍生物L1和L2对Hg2+有良好的识别作用。罗丹明酰肼类衍生物L3和L4均对Cu2+有良好的选择性,且识别过程都是基于荧光增强机理,与文献报道的此类衍生物的性质一致。化合物L5和L6对Fe3+有识别作用。此外,本文还对目标化合物(L1-L6)识别相关金属离子的配位比、阳离子竞争实验及最低检测限等光谱性质进行了研究。 利用凝胶电泳实验分析了目标化合物(L1-L6)对pUC19质粒DNA的切割活性,从缓冲溶液、pH值、配合物浓度及反应时间等方面进行考察,筛选出配体(L1-L6)与金属离子配合后切割DNA的最优条件,并对其切割机理进行了初步探讨。


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