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灵芝酸A对急性酒精性肝损伤小鼠的保护作用及机制研究

马丙钧  
【摘要】:目的探讨灵芝酸A对急性酒精性肝损伤小鼠的保护作用及作用机制。方法将60只小鼠随机分为正常对照组、模型组、灵芝酸A低剂量组(20 mg/kg)、灵芝酸A高剂量组(40 mg/kg)和水飞蓟素(50 mg/kg)阳性对照组,12只/组。预给药干预14天后,各组小鼠均通过灌胃法给予30%乙醇溶液(12 ml/kg)造模,每天1次,连续3天。采用HE染色法观察肝脏组织病理学变化,检测肝脏指数、血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST);检测总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High Density Lipoprotein Cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)水平;检测肝脏组织活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)水平、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性以及谷胱甘肽(Glutathione,GSH)水平;检测血清和肝脏组织白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)水平;检测肝脏组织中Toll受体信号通路、NF-κB信号通路和凋亡信号通路相关蛋白表达。结果1模型组小鼠的肝脏指数明显高于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠的肝脏指数均明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。2模型组小鼠的血清AST和ALT水平明显高于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠的血清AST和ALT水平均明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。3模型组小鼠肝细胞排列紊乱,细胞核染色加深;水飞蓟素阳性组小鼠肝脏组织切片显示小鼠肝脏病理程度减轻,趋于正常;而灵芝酸A高剂量组和灵芝酸A低剂量组小鼠肝脏组织切片显示两组小鼠肝脏病理程度均有不同程度减轻。4模型组小鼠的血清TC、TG和LDL-C水平明显高于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠的血清TC、TG和LDL-C水平均明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01);模型组小鼠的血清HDL-C水平明显低于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠的血清HDL-C水平均明显高于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。5模型组小鼠肝组织中的ROS水平和MDA含量明显高于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠肝组织中ROS水平和MDA含量均明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01);模型组小鼠肝组织中SOD活性和GSH水平明显低于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠肝组织中SOD活性和GSH水平明显高于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。6模型组小鼠的血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显高于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠的血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平均明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01);模型组小鼠肝组织中的IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显高于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠肝组织中的IL-1β、IL-6和TNF-α水平均明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。7模型组小鼠肝组织中的TLR4、TLR2、MyD88、NF-κBp65表达明显高于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠肝组织中的TLR4、TLR2、MyD88、NF-κBp65表达明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01);模型组小鼠肝组织中的IκBα表达明显低于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠肝组织中的IκBα表达明显高于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。8模型组小鼠肝组织中的Bax、Caspase-3、Caspase-9表达明显高于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠肝组织中的Bax、Caspase-3、Caspase-9表达明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01);模型组小鼠肝组织中的Bcl-2表达明显低于正常对照组,灵芝酸A低剂量组、灵芝酸A高剂量组和水飞蓟素阳性组小鼠肝组织中的Bcl-2表达明显高于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。结论灵芝酸A对乙醇诱导的小鼠急性酒精性肝损伤具有保护作用,其作用机制可能与调控脂代谢、抑制氧化应激、减轻炎症反应、抑制Toll/NF-κB信号通路和凋亡信号通路相关蛋白表达有关。


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