非小细胞肺癌中肝素酶基因与VEGF的表达及其临床病理学意义的研究

【摘要】： 肺癌作为我国发病率、死亡率增长最快，对人类健康和生命威胁最大，预后最差的肿瘤之一，侵袭转移是导致其治疗失败和死亡的主要原因。肿瘤侵袭转移的两个必备条件为：(1)肿瘤细胞侵犯基底膜(basement membrane，BM)与细胞外基质(extracellular matrix，ECM)；(2)肿瘤血管生成。硫酸肝素蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycan，HSPG)是BM与ECM中重要成分，其作用酶为肝素酶。肝素酶主要作用机制为直接破坏BM与ECM，水解硫酸肝素(heparan sulfate，HS)侧链，释放并激活血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)等生物活性分子，促进血管的生长。VEGF被认为是诱导肿瘤血管生成作用较强，特异性较高的生长因子，而且还具有增加微血管通透性作用，提 划人MR学伉沦义O002） 非小绷胞帅拟小以十峋u卜】＊E＊F的汞达及几临床病理学意义的研九 供血管形成前肿瘤的营养。现有研究表明，人类多种肿瘤均有较 高水平VEGF的表达，且与肿瘤的转移与复发关系密切。关于肝 素酶在匀小细胞月癌（no－small cell lung cancer，NSCL）中的表达 及其与VEGF相关性的研究国内外尚未见报道。本课题运用逆转 录聚合酶链反应（reverse transcription pdymenze4c［am reaction， RTPCR）及兔疫组织化学技术联合检测肝素酶基因与VEGF在 ＊SC卜C中的表达，研究肝素酶基囚与＊＊＊F表达与非小细胞肺 癌临床病理特征的关系，探讨肝素酶与＊＊＊F在肺癌侵袭转移中 的作用及二者相关性。 资料与方法：选用河南省胸科医院 2000年 5月至 200年 10 月的肺部手术标本。所有标本分成两份，一份无菌条件下采集迅 速保存于液氮中，一份经 10％的中性福尔马林固定，常规石蜡包 埋，连续切片3张，2张用于免疫组化，一张行HE染色。所有 病例术前均未接受放化疗，术后均经组织病理学确诊。（）肺癌 组：65例，男性45例，女性20例；年龄32－76岁，平均年龄52．3t7．9 岁；鳞癌 44例，腺癌 ZI例；低分化癌门例，中分化癌 29例， 高分化癌 19例；P1NM分期（国际 UICC 997分期标准人 la 期 6例，fo期 7例，11a期门 例，IIb期 13 例，Illa期 10 例， 1fib期 6例，IV期 12例；淋巳结转移 34例。门）肺良仕病变组： 20例，男性14例，女性6例，年龄28～72岁，平均年龄48．5t9．2 岁；支气管肺囊肿4例，支气管扩张3例，肺结核9例，炎性假 2 郑上硕十学位论义（2002）非小细胞肺癌中肝素酶基囚b VEGF的表达及其临床病理学意义的研究 瘤2例，肺脓肿1例，错构瘤1例。肝素酶mRNA检测，采用逆 转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction，RTICR）技术，VEGF检测采用免疫组化LSAB法 （labeled streptavidln biotin method）。统计学万法采用 Fisher精确概 率计算法与／检验，所有数据均经SPSS 10．0统计软件进行统计 学处理，显著性水准为0刀5。 结果：l、肝素酶基因在良性病变肺组织中无表达，在NSCLC 组织中表达率为35．4％。二组比较差异具有显著性（Pwto刀1人 2、肝素酶基因在有淋巴结转移组表达率显著高于无淋巴结 转移组吓＜0刀1＼ 在远处转移组显著高于无远处转移组（P＜ 0刀1人HI期十w期组高于1期十11期组o＜0．01人 低分化组高 于高中分化组（＊t 0刀1＼ 腺癌组高于鳞癌组（＊t 0刀5人 肿瘤 最大径35cm组高于最大径ndscm组（P＜0．05人 肝素酶基因表 达率在不同性别、不同年龄组比较，差异无显著性（Pwt 0刀5人 3、NSCLC组VEGF表达率显著高于肺良性病变组o．of） 组。 4、VEGF表达率在有淋巳结转移组高于无淋巴结转移组o no刀5）；有远处转移组高于无远处转移组o．05）；Ill期＋ IV期 组高于 I期＋ 11期组（P＜0刀5卜 VEGF表达率在不同性别、不同 年龄、不同肿瘤大小、不同分化程度、不同组织学类型间比较， 差异均无显著性（P＞0刀5人 3 郑人灿卜学竹论义（2002）非小细胞肺忆中以系陋从卜刁＊E口F的辰达及其临床病理学怠义的研大 5、相关分析表明＊S＊＊C中肝素酶基因表达与＊＊＊F表达 尤相关性（P＞．05）。 结论：l、肝素酶基因异常表达可能在NSCLC的生长、发展 过程中起重要作用。 2、肝素酶参与了NSCLC 的侵袭转移过程，可作为判断 NSCLC转移潜力及恶性程度的分于指标。 3、VEGF异常表达可能参与了NSCLC的生长、发展过程。 4、VEGF参与了NSCLC的侵装转移过程。 5、肝素酶与VEGF通过互小依赖的机制促进肺癌的侵袭与 转移，二者联合检测将有利于提高判断肺癌转移潜力的敏感性及 特异性。