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人骨肉瘤中P27kip1、CyclinE和ki-67的表达研究

张岩  
【摘要】: 骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是骨组织的一种最常见的原发性恶性肿瘤,好发于青少年,常早期出现血行转移,五年生存率低,严重危害着患者的生命和健康。目前骨肉瘤的病因和发病机制仍不清楚。研究细胞周期调控,确立调控进程分子机制,很可能会阐明致癌机制,开辟新的治疗途径。P27kiP1是新发现的一个重要的CKI(cyclin-dependent kinase inhibitor,CKI)分子,它通过对CDK(cyclin-dependent kinase)活性的抑制,从而对细胞周期进行负调控。cyclinE属于G_1期的正调节因子,结合并激活CDK,启动DNA合成,从而实现G_1/S期转化。肿瘤细胞的增殖率是决定肿瘤生物学行为的一个重要参数,ki-67是研究细胞增殖状态的较好指标。目前关于P27kiP1、cyclinE和ki-67基因在人骨肉瘤中联合表达的研究,国内外还尚未见报道。本研究选取30例人骨肉瘤标本,按刘昌茂分级法分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级,其中Ⅰ级7例,Ⅱ级14例,Ⅲ级9例。10例骨软骨瘤作为对照。采用免疫组化S-P法,探讨了P27kip1、cyclinE及ki-67基因在人骨肉瘤中表达的生物学意义和相互关系。 结果显示: 1.P27蛋白表达:(1)骨软骨瘤组的阳性表达率为80%(8/10),其中弱阳性2例,中度阳性3例,强阳性3例;骨肉瘤组的阳性表达率为33.33%(10/30),其中弱阳性7例,中度阳性2例,强阳性1例。比较两组的染色阳性率和染色强度,差异均有显著性(P<0.05)。(2)骨肉瘤Ⅰ级组阳性表达率为71.43%(5/7),其中弱阳性3例,中度阳性1例,强阳性1例;骨肉瘤Ⅱ、Ⅲ级组的阳性表达率为21.74%(5/23),其中弱阳性4例,中度阳性1例。比较骨肉瘤Ⅰ级组与Ⅱ、Ⅲ 郑州大学2003届硕士学位论文 人骨肉瘤中P27kiPI、eyelinE和ki一67的表达研究 级组染色阳性率和染色强度,差异均有显著性(P0.05)。(3)骨母细胞型(I 型)组染色阳性例数为5例,阴性例数9例;软骨母细胞型(2型)组染色阳性 例数为2例,阴性例数为3例;纤维母细胞型(3型)组染色阳性例数为2例, 阴性例数为6例;混合型(4型)组染色阳性例数为1例,阴性例数为2例。比 较骨肉瘤各病理亚型的染色结果,差异无显著性护0.05)。 2.CyclinE蛋白表达:(l)骨软骨瘤组的阳性表达率为30%( 3/10),其中 弱阳性2例,中度阳性1例;骨肉瘤组的阳性表达率为93.33%(28/30),其中 弱阳性6例,中度阳性16例,强阳性6例。比较两组的染色阳性率和染色强度, 差异均有高度显著性(P0.01)。(2)骨肉瘤I级组阳性表达率为85.71%(6/7), 其中弱阳性4例,中度阳性1例,强阳性l例;骨肉瘤n、nl级组的阳性表达率 为95.65%(22/23),其中弱阳性2例,中度阳性15例,强阳性5例。比较骨肉瘤 I级和n、nl级组染色阳性率,差异无显著性(P0.05)。比较骨肉瘤组I级和 11、111级组染色强度,差异有显著性印叱0.05)。(3)骨母细胞型组染色阳性例 数为13例,阴性例数为1例;软骨母细胞型组染色阳性例数为4例,阴性例数 为1例;纤维母细胞型染色阳性例数为8例,无阴性染色;混合型组染色阳性例 数为3例,无阴性染色。比较骨肉瘤各病理类型的染色结果,差异无显著性 (尸0 .05)。 3.幻一67蛋白表达:(1)骨软骨瘤组的阳性表达率为10%(1/10),该例为 低表达;骨肉瘤组的阳性表达率为66.67%(20/30),其中低表达8例,高表达 12例。比较两组的染色阳性和染色强度,差异均有高度显著性(P0.01二;(2) 骨肉瘤I级组阳性表达率为28.57%(2/7),其中低表达1例,高表达1例;骨 肉瘤11、111级组的阳性表达率为7色26%(18/23),其中低表达7例,高表达n 例。比较骨肉瘤I级与11、m级组染色阳性率和染色强度,差异均有显著性 (P0.05)。(3)骨母细胞型染色阳性例数为10例,阴性例数为4例;软骨母细 胞型组染色阳性例数为3例,阴性例数为2例;纤维母细胞型组染色阳性例数为 6例,阴性例数为2例;混合型组染色阳性例数为1例,阴性例数为2例。比较 骨肉瘤各病理类型的染色结果,差异无显著性护0.05)。 4.骨肉瘤中P27,cychnE与ki一67三者蛋白表达强度之间用spe~皿等级 相关分析显示,P27蛋白表达强度与cyclinE蛋白表达强度之间呈显著负相关(rs= 郑州大学2003届硕士学位论文 人骨肉瘤中p27kipl、卿clinE和ki一67的表达研究 一0.432,P0.05);P27蛋白表达强度与ki一67表达强度之间相关无显著性(rs二一 0.34,P0.05);cyclinE蛋白表达强度与ki一67蛋白表达强度之间呈显著正相关 (rs=0 .641,P0.ol)。 小结:1.骨肉瘤组比骨软骨瘤组中P27蛋白阳性表达率及强度均降低 (尸0.05),且P27蛋白的阳性表达强度与骨肉瘤的恶性程度相关联,恶性程度 越高,表达越弱,提示P27蛋白与骨肉瘤的发生发展密切相关,可以作为判断骨 肉瘤分级的指标。 2.骨肉瘤组比骨软骨瘤组cydinE蛋白阳性表达率显著增高(尸0.05),提 示骨肉瘤的发生与cycllnE蛋白过表达有关。 3.骨肉瘤的恶性程度与ki一67的阳性表达率和表达强度相关联,恶性程度 越高,增殖活性越强,表明ki一67的阳性表达率和表达程度是判断骨肉瘤恶性程 度的一个指标。 4.骨肉瘤中P27蛋白和cyclinE蛋白表达强度呈显著负相关(rs=一 0.4


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