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异基因造血干细胞移植中巨细胞病毒的检测及临床意义

周健  
【摘要】:背景与目的:异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)成为近年来治疗恶性血液病、再生障碍性贫血、自身免疫性疾病、某些遗传性疾病及实体肿瘤的一种重要的有效手段。人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,hCMV)感染是造血干细胞移植患者早期的主要感染并发症及死亡原因,既往因CMV感染导致的间质性肺炎死亡率高达80%以上。CMV属于人类疱疹病毒乙组DNA病毒,在人群中感染非常普遍(80%~100%),正常人感染CMV后,由于机体免疫功能正常,CMV在感染细胞内复制水平低下,以一种潜伏整合状态存在,通常无临床症状。当机体免疫功能尤其是细胞免疫功能受到抑制,潜伏的CMV可被重新激活,从而持续高水平的复制,引起CMV活动性感染,产生有严重临床症状的CMV感染性疾病。移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植的主要障碍,CMV感染可以诱导GVHD出现:CMV感染还可影响造血干细胞的植入,使造血重建延迟;引起间质性肺炎;是继发曲霉菌感染的高危因素,易并发细菌、真菌、原虫等混合感染,从而造成移植失败。近年来,随着大量新型免疫抑制剂的出现及多种免疫抑制剂联合应用,非亲缘关系造血干细胞移植、单倍体造血干细胞移植、非清髓造血干细胞移植广泛开展,造血干细胞移植得到快速发展。同时巨细胞病毒感染率也不断增高,已引起医学界高度重视,CMV感染引起严重疾病再次成为医学领域的研究热点。虽然目前更昔洛韦的使用使CMV疾病的治疗有较大转机,但取得抗CMV显著疗效的切入点还在于早期诊断和及时治疗。在CMV病发生之前,及时应用抗病毒治疗,可以预防和减少CMV病的发生, 郑州大学2004届硕士研究生毕业论文 异基因造血干细胞移植中巨细胞病毒的检测及临床意义 降低移植受者的死亡率。巨细胞病毒活动性感染早期所致疾病临床表现多为非特 异性的,早期诊断主要依靠实验室检测。尽管目前诊断CMV手段日臻完善,但 诊断方法多种多样,哪种方法更能简便快捷、灵敏可靠地早期诊断,从而进行早 期干预性治疗争议很大。本研究分别应用ELISA、流式细胞仪、荧光定量PCR 检测巨细胞病毒IgG、lgM抗体、pp65抗原、DNA负荷定量,旨在探讨HcMv 的早期有效诊断方法。 材料与方法:本研究分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清巨细胞病 毒抗体IgG、IgM;流式细胞仪检测巨细胞病毒抗原pp65;荧光聚合酶链反应 (FQ一PCR)核酸扩增技术检测血浆巨细胞病毒DNA负荷量。选择造血干细胞 移植术受者(移植组)预处理前常规检测lgG、IgM抗体,排除IgM抗体阳性移 植患者。于回输当天、回输后每10天左右;正常造血干细胞移植健康供者(正 常组),于粒细胞集落刺激因子(G一CSF)动员之前;长期化疗的白血病患者(化 疗组)于化疗后白细胞升至2.0xl夕/L时,同时检测巨细胞病毒血清IgG、IgM 抗体、粒细胞pp65抗原、血浆DNA负荷量。ELISA采用间接法,待测抗原包 被微孔、洗板、加抗原一酶结合复合物、孵育后洗板,加底物液后置室温暗处显 色,用酶联免疫检测仪(波长45Onln)测定OD值。流式细胞仪检测采用单色间 标法,取标本分离单个核细胞、固定、破膜、分别加入pp“抗体和小鼠IgGI 抗原(对照),再加FITC标记的兔抗鼠IgGI抗体(二抗),用流式细胞仪检测 阳性细胞数比例。荧光定量PCR检测采用外标法,用DNA提取液提取血浆DNA 后和阴、阳性对照一起加入荧光引物、Taq酶等反应液,置于荧光PCR扩增仪 测定DNA含量。统计学分析:所有资料采用SPSS 10.0软件处理,a=0.05为显 著性检验水准。 结果: (l)巨细胞病毒IgG抗体阳性检出率在正常组、化疗组、移植组之间分别 为82.24%,81 .48%和86.91%,三者之间的差别无统计学意义(尸0.05)。 (2)在化疗组中IgM抗体、pp65抗原、DNA定量三者阳性检出率差别无 统计学意义(P0.05)o (3)正常组中巨细胞病毒lgM抗体和DNA荧光定量、pp65抗原流式细胞 仪检测结果基本相同。 郑州大学2004届硕士研究生毕业论文 异基因造血干细胞移植中巨细胞病毒的检测及临床意义 (4)移植组中巨细胞病毒IgM抗体阳性检测率明显低于DNA荧光定量和 pp65抗原流式细胞仪检出率,其差别有统计学意义(p0.05)。两种检测方法 有关系,但关系不密切。 (5)无论在移植组还是化疗组中巨细胞病毒DNA荧光定量检测与pp65抗 原流式细胞仪阳性检出率的差别都无统计学意义(尸0.05),两种检测方法有明 显的相关性。 (6)lgM抗体、I〕NA荧光定量和pp65抗原流式细胞仪检测阳性率各自在 化疗组和移植组之间的差异具有显著性(P0.05)。 (7)移植组治疗中应用免疫抑制剂三种及三种以上与三种以下在DNA荧 光定量和pp65抗原流式细胞仪检测阳性率的差异有统计学意义(尸0.05)。 结论: (1) ELIsA法检测血清cMV IgG和IgM抗体相结合可以用于造血干细胞 移植术供者的选择。IgM抗体不适用于移植术后早期诊断CMV激活感染,但可 用于化疗后CMV活动性感染的诊断,还可以用于筛选阳性受者及时采取措施。 (2)流式细胞仪检测CMV PP65抗原快捷、客观、易于定量,适用于造血 干细胞移植术后造血恢复以后CMV感染的诊断。 (3)荧光定量PCR检测血浆CMV DNA病毒方法简单快速、


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1 谭健;;治疗巨细胞病毒疾病的新药[J];国外医学情报;1987年24期
2 邹承淑;臧云娟;强新;邵济钧;李玉香;刘福奎;;巨细胞病毒对人胚肺二倍体细胞染色体的影响[J];青岛大学医学院学报;1989年02期
3 王衍庆,郑翠屏,栾丽英;新生儿先天性感染病毒病原的血清学研究[J];哈尔滨医科大学学报;1990年03期
4 张婷;CMV主要包膜糖蛋白gB的研究进展[J];国外医学.儿科学分册;1996年05期
5 曹玉兰,李爱斌;巨细胞病毒感染与可溶性白细胞介素2受体的关系[J];中华实验和临床病毒学杂志;1997年03期
6 范昌华,施凯,陈淑珍,夏忠弟;用PCR检测消化道巨细胞病毒感染[J];湖南医科大学学报;1998年03期
7 李莲花,刘粤梅,刘凤鸾;PCR技术诊断巨细胞病毒宫内感染的临床价值[J];山东医药;1998年07期
8 林敏,林光,车敏,郑云忠,刘琼珊,黄以兰;巨细胞病毒与不良孕产史关系的调查[J];海峡预防医学杂志;1999年02期
9 黄从新,李庚山,李建军,许家利,江洪;巨细胞病毒感染与冠心病的关系探讨[J];心肺血管病杂志;1999年04期
10 孟祥春,黄素芳,牟凤云,郑冬凌,胡孟瑛;小儿巨细胞病毒感染65例临床分析[J];哈尔滨医科大学学报;2002年05期
11 严银芳,陈晓,阎远芳,董长恒;PCR-微孔板杂交-ELISA法检测巨细胞病毒感染[J];中国病毒学;2003年02期
12 杨美芳;输血和人巨细胞病毒感染[J];国外医学.输血及血液学分册;2003年06期
13 黎承杨,邓耀良;器官移植与巨细胞病毒感染相关并发症[J];国外医学.移植与血液净化分册;2004年05期
14 王平贤,王安静,黄秀英,黄赤兵,范明齐,张艮甫;肾移植早期巨细胞病毒感染与慢性移植肾肾病关系的临床研究[J];第三军医大学学报;2005年06期
15 耿荣娟,刘小华,陈筱津;肾移植术后巨细胞病毒肺炎的中西医治疗[J];中国中西医结合急救杂志;2005年03期
16 曾文彤,叶青,罗光华,董选,何小舟;动态检测血浆CMV DNA载量在预测肾移植术后并发巨细胞病毒肺炎中的意义[J];中华泌尿外科杂志;2005年08期
17 杨启英;荧光定量聚合酶链反应在患儿巨细胞病毒感染检测中的应用[J];青海医药杂志;2005年09期
18 易红,李卓荣;抗病毒药物西多福韦[J];食品与药品;2005年10期
19 杨琬芳;;复方黄芪汤干预预防巨细胞病毒感染的实验研究[J];山西中医学院学报;2005年04期
20 王建梅;;小儿巨细胞病毒肺炎15例临床分析[J];中国初级卫生保健;2005年11期
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1 张玉红;孙凤秀;白道香;彭德爱;;60例自然流产患者感染衣原体、支原体、弓形体和巨细胞病毒情况[A];第五届全国优生科学大会论文汇编[C];2000年
2 汪辉;闻良珍;凌霞珍;;体外感染后巨细胞病毒晚期mRNA表达与细胞病变[A];第五届全国优生科学大会论文汇编[C];2000年
3 陈素华;闻良珍;熊锦文;;中药金叶败毒防治巨细胞病毒宫内感染的动物试验和临床研究[A];中国优生科学协会2004年优生科学学术交流大会论文集[C];2004年
4 王昕荣;陈素华;刘海智;张心红;乔福元;王雁林;;共聚焦显微镜检测小鼠巨细胞病毒对未成熟卵母细胞超微结构的影响(摘要)[A];中国优生科学协会2004年优生科学学术交流大会论文集[C];2004年
5 阮林松;;巨细胞病毒的感染及检测[A];2004年浙江省检验医学学术会议论文汇编[C];2004年
6 范骏;马伟杭;周琳;杨美芳;薛寒;高海女;;实时荧光测定肝移植患者外周血中巨细胞病毒DNA载量及临床意义[A];中华医学会全国第九次感染病学学术会议论文汇编[C];2006年
7 范骏;杨美芳;马伟杭;郑树森;;肝移植受者HLA分子特异性和术后巨细胞病毒感染相关性[A];第十二次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2003年
8 范骏;孟雪芹;杨美芳;高海女;马伟杭;郑树森;;肝移植受者HLA分子特异性与术后巨细胞病毒感染相关性[A];浙江省免疫学会第五次学术研讨会论文汇编[C];2004年
9 王石麟;张中益;潘利;李颖;;引起婴幼儿病毒性肺炎的腺病毒和巨细胞病毒的电镜观察[A];第四次全国电子显微学会议论文摘要集[C];1986年
10 包洪;刘爱忠;金玉芬;肖霞;于庭;宁振全;张小刚;;巨细胞病毒gp52蛋白表达及其ELISA方法的建立[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年
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1 顾长国;抗巨细胞病毒人源化抗体的研究[D];第三军医大学;2005年
2 王海涛;HCMV感染神经瘤细胞对其神经生长因子和受体表达影响的研究[D];青岛大学;2009年
3 李林;1.肝移植术后巨细胞病毒感染的研究 2.肝移植术后一年多因素回顾性分析[D];中国协和医科大学;2005年
4 张岩;多引物PCR检测供体角膜疱疹病毒及角膜移植术后病毒传播途径的研究[D];吉林大学;2007年
5 罗丹;MCMV感染对神经干细胞分化和细胞周期进程的影响及其机制研究[D];华中科技大学;2008年
6 蒋燕灵;抗B7分子单克隆抗体与免疫抑制剂联用对感染人巨细胞病毒的T淋巴细胞增殖影响及机理初探[D];浙江大学;2007年
7 郭红梅;婴儿巨细胞病毒肝炎的临床研究[D];复旦大学;2004年
8 高良辉;巨细胞病毒感染对大鼠肝移植慢性排斥反应致病的初步研究[D];浙江大学;2005年
9 王平贤;肾移植受者巨细胞病毒感染及其对移植肾影响的临床研究[D];第三军医大学;2004年
10 周玉峰;先天性巨细胞病毒感染致脑发育异常及其机制研究[D];华中科技大学;2006年
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1 郭丽丽;重庆地区2008年儿童巨细胞病毒血清流行病学调查与巨细胞病毒性肝炎临床分析[D];重庆医科大学;2010年
2 李雪丹;新生儿巨细胞病毒感染gB基因型分析[D];中国医科大学;2005年
3 李晓丽;笼养猕猴巨细胞病毒的流行病学调查及组织分布研究[D];四川农业大学;2012年
4 宋晓露;异基因造血干细胞移植后间质性肺炎的临床分析[D];浙江大学;2008年
5 王列样;异基因造血干细胞移植患者CMV感染的早期检测及防治[D];山西医科大学;2005年
6 杨美芳;HCMV pp65抗原和IgM抗体检测对造血干细胞移植后HCMV活动性感染诊断价值比较[D];浙江大学;2005年
7 黄韬;异基因造血干细胞移植患者CMV特异性CTL的检测研究[D];第一军医大学;2005年
8 邢美园;巨细胞病毒感染与冠心病关系的Meta分析[D];浙江大学;2002年
9 刘培贤;冠心病感染因素的研究[D];山西医科大学;2002年
10 朱见文;巨细胞病毒活动性感染与进展型缺血性卒中相关性研究[D];河北医科大学;2006年
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1 金慰鄂;孕前查查巨细胞病毒[N];大众卫生报;2009年
2 省三优中心副主任医师 高健;孕妇:“躲”着点儿巨细胞病毒[N];河北科技报(农村版);2000年
3 张红真;孕妇巨细胞病毒抗体阳性要紧吗[N];家庭医生报;2007年
4 杨舟子;巨细胞病毒引发心血管病[N];医药养生保健报;2008年
5 张钊;从免疫力角度,专家解析接吻行为[N];新华每日电讯;2009年
6 湖南省儿童医院教授 李梨平;警惕婴幼儿巨细胞病毒感染[N];大众卫生报;2006年
7 祝兴元;当心新生儿感染巨细胞病毒[N];大众卫生报;2009年
8 雷志勇;生个健康宝宝 孕期检查不能少[N];健康报;2006年
9 姚继霞;三病毒致畸[N];福建科技报;2001年
10 ;更昔洛韦预防性治疗巨细胞病毒可减少菌血症[N];医药导报;2004年
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