Survivin 在结直肠腺瘤癌变过程中的表达及其与p53、Ki-67表达的关系

【摘要】：背景与目的： Survivin是凋亡抑制蛋白(inhibitors of apoptosis protein，IAP)家族的最新成员，是一种是具有抑制细胞凋亡和调节细胞有丝分裂的双功能蛋白。X线晶体衍射证实全长的Survivin有2.7A°，呈蝶形领结状的广泛二聚体化排列，构象提示它能通过α-螺旋发挥接头蛋白功能。Survivin主要作用于各个凋亡途径的汇集点，直接抑制终末效应蛋白caspase3和caspase7，因而若Survivin高表达就可能使细胞抵御住多种生理或病理凋亡信号而存活。Survivin的另一重要特性是它能在G_2／M期与纺锤体微管结合，从而对有丝分裂进程进行调节。因此，Survivin是将细胞周期、有丝分裂和细胞凋亡联系在一起的关键分子。研究表明，Survivin在人胚胎组织中高度表达并参与胚胎发育过程中的组织分化和器官形成，而在终末分化的成人组织中基本不表达，却又广泛表达于人类几乎所有恶性肿瘤组织中。Survivin的过度表达使异常细胞能够克服凋亡检查点而发生异常增殖，与其他基因一起共同参与肿瘤的发生、发展。本实验采用免疫组织化学方法研究了凋亡抑制基因Survivin在结直肠腺瘤癌变过程中的表达，并以核抗原Ki-67蛋白的表达作为癌变过程中肿瘤细胞增殖程度的标记指示(labeling index，LI)，探讨Survivin在结直肠癌发生中的作用以及与p53基因突变和细胞异常增殖之间的相互关系，并寻求判断腺瘤癌变早期诊断的分子生物学指标。 郑州大学2004年硕士学位论文 占扮乃如初痊;级厦扬雳核琅吏逻理功必麦送安弃与尹”、KI-‘夕，麦之功光歹 材料与方法: 本实验收集了1996年1月至2002年12月郑州大学第一附属医院手术切除 或纤维结肠镜活检的结直肠腺瘤癌变组织存档蜡块61例，所有标本均同时伴有 111级和I、n级不典型增生，实验中将不典型增生分为重度(m级)和轻度(I 级或n级)不典型增生两大类。另选10例正常结直肠粘膜组织作为对照。采用 链霉菌抗生物素蛋白一过氧化酶(streptavldin-peroxidase，SP)连接免疫组织化学方 法检测survivin、 p53蛋白和儿一67核抗原的表达情况。 结果: 1.survivin、P53蛋白及‘一67阳性表达的定位: 镜下Survivin主要定位于肿瘤细胞的胞浆，为淡黄色到棕黄色颗粒，呈异质 性染色，少数细胞染色较强，呈深棕黄色;p53蛋白阳性染色位于肿瘤细胞核内， 为黄色到深棕黄色颗粒;儿一67阳性染色也位于细胞核内，为棕黄色到深棕黄色 颗粒，部分染色较深，呈棕褐色。作为对照，10例正常结直肠粘膜Survivin、p53 蛋白无一阳性，幻一67仅在腺体增生区可见少量阳性表达，表面分化成熟的上皮 细胞则无阳性表达。 2.Survivin在结直肠腺瘤癌变过程中表达的变化情况: Survivin的阳性表达率随着腺瘤上皮不典型增生程度的加重而增高。在腺瘤 的轻度不典型增生区、重度不典型增生区及癌变区的表达率分别为26.2%、52.5% 和62.3%。从腺瘤上皮的轻度不典型增生到腺瘤上皮的重度不典型增生，Survivin 的表达显著增高(P0.05)，而腺瘤重度不典型增生区和癌变区的soivin表达无 显著性差异(P0.05)。 3.P53蛋白在结直肠腺瘤癌变过程中表达的变化情况: 与survivin表达的变化情况相似，p53蛋白在结直肠腺瘤癌变过程中的表达也 随着腺瘤上皮不典型增生程度的加重而增高，在腺瘤的轻度不典型增生区、重度 不典型增生区和癌变区的表达率分别为19.7%、57.4%和67.2%。从腺瘤上皮的轻 度不典型增生到重度不典型增生，p53蛋白的表达显著增高(P0.05)，而腺瘤重 度不典型增生区与癌变区的p53蛋白表达无显著性差异(P0.05)。 4.丸一67增殖指数(丸一67u)在结直肠腺瘤癌变过程中的变化情况: Ki一67LI在腺瘤的轻度不典型增生区、重度不典型增生区和癌变区分别为 郑州大学2004年硕士学位论文su月吐树湘 窟沪时表送友真与，p”、Ki-‘7表巡‘时关索 19.3%、35.1%和36.2%。后二者均属高增殖指数(u)25%)，其间差异无统计学 意义(P0.05);而轻度不典型增生区为低增殖指数(LI25%)，分别与重度不典 型增生区和癌变区相比，差异均有显著性意义(P0.05)。 5.结直肠腺瘤癌变过程中survivin的表达与p53蛋白表达及兀一67u之间的关系: 在腺瘤的轻度不典型增生区，survivin在p53蛋白阳性组和p53蛋白阴性组中 的阳性表达分别为4例(4/12，33.3%)和12例(12/49，24.5%)，两者间差异无显著性意 义(P0.05);Survivin阳性组的Ki一67LI和Survivin阴性组的兀一67LI分别为20.8% 和19.6%，两者间的差异也无显著性意义(P0.05)。但在重度不典型增生区和癌 变区，P53蛋白阳性组的Survivin表达却明显高于P53蛋白阴性组的Survivin表达且 差异均有显著性意义(P0.05);Survivin阳性组的儿一67LI也明显高于SurvMn阴 性组的Ki一67u，差异也均有显著性意义(P0.05)。 结论: 1.Survivin的异常表达与结直肠腺瘤癌变密切相关，在结直肠癌的发生中可能 与p53起一定的协同作用。 2.Survivin表达与p53基因的突变均是结直肠癌发生的早期事件。 3.Survivin在增殖与凋亡的失衡导致肿瘤发生的机制中起了重要的作用。 4.重度不典型增生是一类具有明显癌变倾向的病变。