survivin和hTERT在大肠粘膜癌变中表达及其与c-mye关系

【摘要】：背景与目的：大肠癌是消化道常见的恶性肿瘤之一，在我国近20年，由于环境与饮食结构的改变，其发病率呈逐年上升的趋势。大肠粘膜上皮细胞不断地凋亡脱落、增殖更新，凋亡是一种基因调控下细胞程序性死亡的过程，在生理状态下，凋亡途径可清除体内衰老和异常的细胞，细胞凋亡和细胞增殖的动态平衡是维持机体内环境稳态的重要生理方式，二者失衡将导致肿瘤生成。 Survivin属于凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein，IAP)家族新成员，表达于胚胎组织和多种肿瘤细胞中，survivin可抑制凋亡通路末端的效应因子caspase-3和caspase-7，从而阻断各种刺激诱导的细胞凋亡；survivin还高表达于细胞周期的G_2／M期，并在细胞有丝分裂中与微管结合，具有抑制细胞凋亡和促进分裂增殖的双重作用。 端粒酶，是一种逆转录核糖核酸酶，可合成端粒DNA加到染色体末端，阻止因细胞分裂而造成的端粒缩短，从而延长细胞寿命，该酶的激活与细胞永生化、基因突变、肿瘤生成有关。端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase，hTERT)的表达与端粒酶的活性一致，hTERT在正常体细胞表达受抑制，而在肿瘤细胞中重新被激活。hTERT抗体的成功制备可应用免疫组化结合细胞形态分析其表达特点。 原癌基因c-myc具有促增殖和抑凋亡的双重作用。细胞系研究示survivin转化细胞作用依赖于c-myc，c-myc可诱导hTERT表达，但三者之间的关系及调控仍不清楚，且联合检测三者在大肠癌病变过程中的表达尚未见报道，为进一步阐明大肠癌变的机制，寻求大肠癌生物学标志物，并为大肠癌的诊断和治疗提供理论依据。本研究采用免疫组化检测了survivin、hTERT和c-myc在大肠癌中的表 郑州大学2004届硕士学位论文 survivin和h几RT在大肠粘膜癌变中表达及其与c一myc的关系 达，并探讨它们与各种临床病理因素之间关系。 材料和方法:(1)选取49例大肠癌根治术标本、25例大肠腺瘤切除标本、 12例距肿瘤边缘大于scm的正常粘膜标本，经10%福尔马林固定，常规脱水后 石蜡包埋。(2)应用免疫组织化学Sp法(streptavidin一peroxidase，sP)检测survivin、 h花RT和c一myc在正常粘膜、大肠腺瘤及大肠癌中的表达情况。(3)统计学处 理应用sPss10.o版软件，采用了检验和:pearman等级相关分析，以a=0。05作 为检验水准。 结果:(1)survivin在正常粘膜中阳性率为O%;在大肠腺瘤中阳性率为32刀% 与正常组比较，差异有显著性伊0.05);大肠癌中survivin着色位于胞浆，异质 性明显，阳性率65.3%，分别与正常组和腺瘤组比较，差异均有显著性(尸0.05)。 hTERT在正常粘膜基底腺上皮有弱表达，阳性率为8.3%;在腺瘤中阳性率为 36.0%;在大肠癌胞浆、胞核中强着色，分布均匀，阳性率为85.7%;腺瘤组与 正常组比较无显著性差异(尸0.05)，腺瘤组与大肠癌组比较有显著差异性 (尸0.05)。c一myc在正常组、腺瘤组、大肠癌组中表达逐渐升高，阳性率分别 为0%、20.0%、53.1%，三组间两两比较均有显著性差异(尸0 .05)。 (2)根据组织分化程度，将大肠癌组分为高分化组和中低分化组，Survivin 在两组间阳性率分别为53%和72.0%，组间比较无显著性差异(P0.OS)。hTERT 阳性率为79.1%和92.0%，随分化程度而呈增高趋势，组间比较亦无显著性差异 (尸0.05)。c一myc在两组间阳性率为37.5%和68.0%，有显著性差异(尸0.05)。 (3)根据癌细胞浸润深度，将大肠癌组分为浸润未达外膜层组、达到或超 过外膜层组，survivin在此两组中阳性率分别为57.6%和73.9%，两组间比较差 异无显著性(尸0.05)。hTEFJ，在两组间阳性率为76.9%和 95.6%，差异无显著 性(尸0.05)。e一mye阳性率为30.7%和70.2%，有显著性差异(P0.05)。 (4)根据有无淋巴结转移，将大肠癌组分为无淋巴转移组和有淋巴转移组。 Su*vivin在此两组中阳性表达率分别为51.8%和81.8%，两组间比较有显著差异 性(P0 .05)，hTERT在两组中阳性率分别为81.4%和90.9%，无显著差异性 (尸0 .05);c一myc阳性率分别为37.0%和72.7%，差异有显著性(p0 .05)。 (5)根据Dukes’分期，将大肠癌组分为AB组和CD组，Survivin在两组 中的阳性率分别为47.6%和78.5%，组间差异有显著性(尸0.05);hTERT阳性 率为80.9%和89.2%，无显著差异性(尸.05);c一myc阳性率为33.3%和67.8%， 郑州大学2004届硕士学位论文 survivin和hTERT在大肠粘膜癌变中表达及其与c一myc的关系 两组间比较差异有显著性(p0.05)。 (6)survivin、hTERT和c一myc表达在大肠癌细胞中分布有二致性，survivin 与hTERT阳性表达呈正相关，hTERT与c一myc也呈正相关，survivin与c一myc亦 呈正相关(p0.05)。 结论:1 Survivin蛋白在正常组织中不表达，而表达于大肠腺瘤中且高表达 于大肠癌中，并与大肠癌的淋巴结转移和Dukes’分期有关，提示survivin与大肠 癌的发生发展有一定关系。 2 hTERT在正常组织中低表达，其阳性表达率从正常大肠粘膜组一大肠腺 瘤组~大肠癌组不断增加，提示端粒酶活性现在癌变发生之前并持续到肿瘤发展 全过程。 化程度、 标。 c一myc在大肠癌组中的表达?