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低能N~+注入Nisin产生菌诱变选育的初步研究

张国只  
【摘要】:本文通过对乳链菌肽产生菌Lactococcus lactis AS1.2030进行N~+离子注入和紫外线诱变,筛选出诱变菌株J7,乳链菌肽效价由原来968.38IU/ml提高到1655.99IU/ml,高于出发菌株71.01%。遗传稳定性试验结果表明,连续传5代,J7菌株产乳链菌肽效价变化范围在在94%~102%,具有良好的遗传稳定性。LTB、LB、LBP、M.R.S、CM和M17六种培养基对菌株J7进行培养,结果表明LTB为J7最适培养基。经过对LTB组分进行正交试验优化,得出最佳培养基条件为葡萄糖0.5%,NaC10.7%,Na_2HPO_4-12H_2O 0.2%,酵母膏1.0%,牛肉膏1.5%,胰蛋白胨1.5%,起始pH 6.4,使得J7菌株效价达到1732.45IU/ml。 同时,对琼脂扩散法测定乳链菌肽效价进行了优化,结果表明,效价检测培养基琼脂浓度0.75%、添加0.5%Tween20以及30℃培养条件,可提高乳链菌肽效价测定的灵敏度和精确性;4℃预培养有利于乳链菌肽在琼脂中的扩散。


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