收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

神经生长因子对豚鼠形觉剥夺性近视凋亡作用的探讨

王应飞  
【摘要】: 近视眼是目前全球发生率最高的屈光不正,其发病年龄不断提前,发生率不断增加,且发生后呈进展趋势,已经成为严重的公共卫生问题,世界卫生组织(WHO)已将近视眼的防治列为全球防盲计划之一。 自从1977年Wiesel和Raviola首次建立形觉剥夺动物模型以来,人们对近视的发生机制有了一定的认识,即形觉剥夺主要通过局部视网膜机制来调控邻近巩膜的生长,视网膜含有多种神经递质,形觉剥夺可以导致神经递质水平发生改变,参与调控FDM的形成。形觉剥夺性实验动物模型的建立是近视眼的研究中一次重大突破,通过这种研究方法,我们已对实验性近视眼有了初步的认识,为近视眼的理论探讨提供了极有价值的信息和思路。病理性近视眼是常见的致盲眼病,在其发展过程中视网膜感光细胞不断减少,凋亡可能是其感光细胞死亡的机制之一,细胞凋亡是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一被动的过程,而是一主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用;它并不是病理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。 研究认为细胞凋亡是细胞在各种死亡信号刺激后发生的一系列瀑布式激活的主动性细胞死亡过程。越来越多的实验证实天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶(Caspases)在细胞凋亡调节过程中起关键作用。在凋亡的执行阶段,Caspase-3酶原因其Asp-28-ser-29和Asp-175-ser-176两个酶切位点受切割被激活,降解成分子质量为17ku和12ku的两个活性亚单位。活化的Caspase-3特异地切割DNA,使参与DNA损伤修复过程的聚ADP核糖聚合酶,以及DNA依赖的蛋白激酶等失活,促使染色质浓缩和核酸酶激活,导致细胞凋亡。 神经生长因子是一种蛋白质,广泛存在于动物体内,不仅能够维持感觉神经元存活和神经纤维生长,还有在个体发育期间增加分枝及保护分化后神经元的特殊功能,能够增加感觉神经肽基因的表达,鉴于此,我们设计了利用形觉剥夺性近视动物模型,运用玻璃体腔注射神经生长因子的方法干预近视形成过程,从而了解神经生长因子对形觉剥夺性近视的作用,为近视的防治提供新的思路。 目的 通过运用半透明眼罩遮盖豚鼠眼睛以形成形觉剥夺性近视,并在形觉剥夺性近视形成过程中形觉剥夺眼玻璃体内注射神经生长因子进行干预,观察其对形觉剥夺性近视的影响,从而探讨神经生长因子对形觉剥夺性近视的影响,为近视的防治提供新的实验依据。 方法 50只1周龄健康三色豚鼠随机分为三组,第1组10只,第2组和第3组各20只,每只豚鼠均用半透明眼罩遮盖右眼,各组豚鼠室内分笼饲养,自由饮食,室内日光灯照明,每日照明与黑暗时间均为12小时,第一组实验动物不进行其它干预,右眼遮盖第12周麻醉下微量进样器分别向第2和第3组遮盖眼玻璃体内注射神经生长因子5μg(1μg/μl)和生理盐水5μl,隔日1次,共3次,每组豚鼠在形觉剥夺12周后由同一验光经验丰富的验光师在暗室内带状检影验光,散光按等效球镜计算,验光前一小时用复方托品咔胺点眼散瞳4次。氯胺酮麻醉后做A型超声测量眼球前后径(自角膜顶点到玻璃体与视网膜交界处后极点距离,每眼测量5次,取平均值),水合氯醛过量麻醉致死后立即取出眼球,除去筋膜,固定,包埋,切片后运用SP免疫组化检测视网膜中Caspase-3的表达,运用TUNEL技术检测视网膜凋亡细胞,操作步骤均严格按说明书进行。 结果 1.三组实验动物形觉剥夺眼与自身对照眼相比视网膜内核层与外核层细胞减少,细胞排列稀疏,由于视网膜神经节细胞单层排列,并且稀疏,所以在光镜下观察差异不明显。第3组实验动物遮盖眼视网膜与第2组比较显示内核层与外核层细胞减少,细胞排列稀疏。 2.三组实验动物形觉剥夺眼与自身对照眼相比均形成相对性近视;形觉剥夺眼眼轴均有所延长,第1组形觉剥夺眼眼轴最长,为10.02±1.16mm,第2组形觉剥夺眼眼轴最短,为9.84±1.17mm,第3组形觉剥夺眼眼轴长度为9.86±1.11mm。 3.三组实验动物形觉剥夺眼与自身对照眼相比眼轴长度差异均有统计学意义;第2组试验动物的形觉剥夺眼眼轴长度为9.84±1.17mm,与1、3两组形觉剥夺眼眼轴长度相比差异没有统计学意义;1、3两组形觉剥夺眼眼轴长度相比差异没有统计学意义; 4.三组实验动物形觉剥夺眼与自身对照眼相比屈光度差异有统计学意义;第2组试验动物的形觉剥夺眼屈光度为-9.25±1.80D,与1、3两组形觉剥夺眼屈光度相比差异没有统计学意义;而1、3两组形觉剥夺眼屈光度相比差异没有统计学意义; 5.第2组实验动物的形觉剥夺眼视网膜细胞凋亡率为1.41±0.42(单位%),第3组试验动物的形觉剥夺眼视网膜细胞凋亡率为2.03±0.73(单位%),第1组试验动物的形觉剥夺眼视网膜细胞凋亡率为2.14±0.58(单位%),1、3组与第2组相比差异均有统计学意义; 6.另外,我们发现利用吸光光度值测定法反映Caspase-3表达情况显示,第2组试验动物的形觉剥夺眼视网膜细胞中Caspase-3表达最少,与第3组试验动物的形觉剥夺眼视网膜细胞中Caspase-3表达相比差异有统计学意义。视网膜细胞中Caspase-3表达与视网膜细胞凋亡率具有相关性。 结论 神经生长因子能够抑制豚鼠形觉剥夺性近视视网膜细胞凋亡的发生。 半透明眼罩遮盖法建立豚鼠近视动物模型是成功的。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 郝更生,杨君,曾利,刘琼;形觉剥夺性眼病与轴性近视关系的探讨[J];中国斜视与小儿眼科杂志;2002年03期
2 闫磐石;张金嵩;郭浩轶;;转化生长因子-β_2在豚鼠形觉剥夺性近视中的表达[J];眼科研究;2007年03期
3 李秀娟;张金嵩;;形觉剥夺性近视雏鸡眼细胞凋亡情况观察[J];郑州大学学报(医学版);2008年06期
4 王应飞;张金嵩;;神经生长因子在豚鼠形觉剥夺性近视中的作用[J];医药论坛杂志;2010年21期
5 李翊;;豚鼠形觉剥夺早期生物学参数的动态变化研究[J];国际眼科杂志;2011年06期
6 李涛;周晓东;崔心瀚;周行涛;;豚鼠眼形觉剥夺后恢复期的生物学参数变化规律探讨[J];中国实验动物学报;2012年06期
7 高岩;崔冬梅;吴开力;黄强;曾骏文;;形觉剥夺性近视豚鼠巩膜形态学观察[J];眼科研究;2006年03期
8 张艳明;瞿佳;周翔天;;形觉剥夺性近视中巩膜重塑机制的研究[J];眼科研究;2007年05期
9 邓志宏;谭佳;刘双珍;赵少贞;汪建涛;;重组人胰岛素样生长因子2对豚鼠眼球发育的调控作用及其与形觉剥夺的关系[J];眼视光学杂志;2009年02期
10 陆云峰,邸保忠;鸡眼形觉剥夺性近视的实验研究[J];眼视光学杂志;2001年01期
11 张金嵩,高雪霞;脑源性神经营养因子在鸡形觉剥夺性近视恢复期中的作用[J];眼科研究;2005年05期
12 赵海岚;王瑞卿;吕帆;;幼年期豚鼠形觉剥夺性近视的动态变化[J];临床眼科杂志;2006年02期
13 郭小川,徐艳春,刘汉强,孙宝志;应用阿托品防止形觉剥夺诱发近视的实验研究[J];中国实用眼科杂志;1996年01期
14 王淑华 ,郑海涛,卫玉荣,张金嵩;阿托品抑制形觉剥夺性近视的作用机制[J];眼科新进展;2002年05期
15 朱玉广,刘双珍;形觉剥夺性近视中巩膜变化的生物学机制[J];眼科新进展;2003年01期
16 格日勒图,李晓芳,崔巍,王晶;兔实验性形觉剥夺性近视的研究[J];内蒙古医学杂志;2004年08期
17 阎磐石,张金嵩,吕勇;形觉剥夺性近视豚鼠视网膜中脑源性神经营养因子的表达[J];郑州大学学报(医学版);2005年03期
18 许思思;陈悦;;豚鼠形觉剥夺性近视视网膜组织中褪黑素受体表达及眼压的变化[J];郑州大学学报(医学版);2009年03期
19 范惠民,阴正勤,高朋芬,王仕军;双眼形觉剥夺对大鼠视皮层神经元电生理特性的影响[J];第三军医大学学报;2003年21期
20 田军,吕勇;豚鼠形觉剥夺性近视模型的实验研究[J];医药论坛杂志;2005年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 赵海岚;吕帆;王瑞卿;周翔天;;幼年期豚鼠形觉剥夺性近视的动态变化[A];2005年浙江省眼科学术会议论文集[C];2005年
2 吴捷;刘琼;杨晓;杨晖;王新梅;曾骏文;;豚鼠形觉剥夺性近视中一氧化氮信号传导通路的动态变化[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
3 王淑华;张金嵩;;鸡形觉剥夺性近视作用机制的研究[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
4 田军;代涛;秦玉芝;张晓利;;胰岛素样生长因子Ⅰ、Ⅱ与形觉剥夺性近视的实验研究[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
5 龙克利;蒋丽琴;李翌;周翔天;吕帆;瞿佳;;豚鼠形觉剥夺性近视发生及恢复期眼球生物参数的变化[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
6 张金嵩;王应飞;;神经生长因子对豚鼠形觉剥夺眼抗凋亡作用的探讨[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
7 王剑锋;张璇;刘双珍;;双硫仑对鸡眼球形觉剥夺性近视发生发展的影响[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
8 董枫;周翔天;蒋丽琴;任岳萍;吕帆;瞿佳;;阿朴吗啡对豚鼠形觉剥夺性近视作用的研究[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
9 闫磐石;;转化生长因子—β2在豚鼠形觉剥夺性近视中的表达[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
10 龙克利;周翔天;吕帆;;豚鼠形觉剥夺性近视发生及恢复期视网膜电图研究[A];2005年浙江省眼科学术会议论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前8条
1 许军;视黄酸在形觉剥夺性近视形成中作用的研究[D];中国医科大学;2004年
2 陈悦;神经生长因子及其受体在形觉剥夺性近视中作用的实验研究[D];郑州大学;2007年
3 闫磐石;脑源性神经营养因子及转化生长因子-β_2在形觉剥夺性近视中作用的实验研究[D];郑州大学;2005年
4 王莹;甘油醛后巩膜交联治疗豚鼠形觉剥夺性近视的实验研究[D];天津医科大学;2012年
5 吕勇;视黄酸及其受体RARβ在形觉剥夺性近视中作用的研究[D];郑州大学;2005年
6 钱宜珊;小鼠形觉剥夺性近视眼模型Sonic hedgehog信号通路的表达及干预研究[D];复旦大学;2008年
7 刘兆强;mAChR、VIP在豚鼠FDM模型中表达的实验研究及PRK、LASIK远期效果的临床研究[D];山东大学;2007年
8 朱玉广;TGF-β1、iNOS在鸡FDM的表达及作用[D];中南大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王应飞;神经生长因子对豚鼠形觉剥夺性近视凋亡作用的探讨[D];郑州大学;2007年
2 高雪霞;脑源性神经营养因子在形觉剥夺性近视形成与发展中作用的研究[D];郑州大学;2004年
3 杨蓓;豚鼠短期形觉剥夺性近视生物学和巩膜形态学改变[D];青岛大学;2008年
4 郝尚臣;形觉剥夺性近视形成过程中巩膜的重新塑形[D];郑州大学;2003年
5 李亚娣;树鼩形觉剥夺性近视视蛋白及其发育分化调控因子表达变化的研究[D];昆明医科大学;2013年
6 田军;胰岛素样生长因子Ⅰ、Ⅱ与形觉剥夺性近视的实验研究[D];郑州大学;2005年
7 李秀娟;一氧化氮、氧自由基及细胞凋亡与形觉剥夺性近视[D];郑州大学;2003年
8 许思思;豚鼠形觉剥夺性近视视网膜中褪黑素受体的表达及眼压变化的研究[D];郑州大学;2009年
9 杨颖;消旋山莨菪碱对豚鼠形觉剥夺性近视的影响及机制研究[D];复旦大学;2011年
10 张衡頔;形觉剥夺性近视/弱视对小鼠高血糖视网膜损伤影响的研究[D];第三军医大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978